尚東亞 趙紹華 謝雪平

動(dòng)脈粥樣硬化是一種慢性炎癥性病變，補(bǔ)體活化在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起重要作用［1］。補(bǔ)體系統(tǒng)由補(bǔ)體固有成分、補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白及補(bǔ)體受體組成，多種內(nèi)源或外源性物質(zhì)可激活補(bǔ)體，而補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白可抑制補(bǔ)體活化。老年人群高血脂的發(fā)生率較高，而高脂血癥是動(dòng)脈粥樣硬化的重要危險(xiǎn)因素。本研究旨在探討高脂血癥患者補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白CD55、CD59 與踝臂指數(shù)(ABI)的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 選擇2009 年10 月至2011 年5 月我院門診及住院高脂血癥患者243 例為高脂血癥組，其中男127 例，女116 例，年齡61 ～87 歲，平均(68.6 ±6.3)歲，合并高血壓108 例，穩(wěn)定型心絞痛103 例。高脂血癥診斷標(biāo)準(zhǔn)參照我國(guó)血脂異常防治建議［2］，血清總膽固醇(TC)≥5.72 mmol/L 和(或)三酰甘油(TG)≥1.70 mmol/L 作為入選條件，血脂水平應(yīng)有2 次結(jié)果達(dá)標(biāo)方可確診。排除標(biāo)準(zhǔn):肝腎疾病以及甲狀腺功能低下和糖尿病等內(nèi)分泌疾病引起的繼發(fā)性高脂血癥，自身免疫性疾病，近期(＜1 月)有嚴(yán)重感染、手術(shù)和外傷史，以及半年內(nèi)有急性心腦血管事件發(fā)生者，就診時(shí)已使用他汀類藥物治療者(不包括已使用他汀類藥物但在就診時(shí)已停用＞2 月)。正常對(duì)照組60 例，均來(lái)自我院門診健康體檢者，男36 例，女24 例，年齡61 ～84 歲，平均(69.3 ±5.2)歲。記錄入選對(duì)象的年齡、身高、體質(zhì)量、腰圍、臀圍、吸煙指數(shù)、血壓、血糖，通過(guò)公式計(jì)算體質(zhì)量指數(shù)［BMI = 體質(zhì)量(kg)/身高(m)2］，腰臀比=腰圍/臀圍。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集:所有觀察對(duì)象空腹＞12 h，于清晨8時(shí)取肘靜脈血6 ml 于真空抗凝或促凝管中。

1.2.2 血脂測(cè)定:采用酶法，取當(dāng)日所采血清，用美國(guó)Beckman Coulter 公司LX20 型全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。

1.2.3 白細(xì)胞補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白CD55、CD59 檢測(cè):采用全血流式細(xì)胞法，用美國(guó)Coulter EPICS XL 流式細(xì)胞儀測(cè)定?？崭谷≈忪o脈血2 ml，置含依地酸二鈉的真空采血器，取血后30 min 內(nèi)開(kāi)始測(cè)定。將鼠抗人CD55-R-PE、CD59-FITC 單克隆抗體及陰性對(duì)照抗體10 μl 分別加入不同試管中，每管中加入100 μl 新鮮抗凝全血，震蕩混勻后室溫避光反應(yīng)15 min，每管加紅細(xì)胞裂解液溶解紅細(xì)胞后，上機(jī)檢測(cè)CD 分子平均熒光強(qiáng)度。

1.2.4 高敏C 反應(yīng)蛋白(hsCRP)測(cè)定:hsCRP(血清)采用ELISA 法測(cè)定，試劑盒購(gòu)自美國(guó)BioCheck 公司。

1.2.5 ABI 檢測(cè)方法:按美國(guó)心臟病學(xué)會(huì)(AHA)推薦的測(cè)算方法［3］:室溫21 ℃左右，囑其取仰臥位，安靜休息5 min，置12 cm × 40 cm 的袖帶縛于上臂，Doppler 探頭置于動(dòng)脈搏動(dòng)處，調(diào)整探頭直到清晰聞及動(dòng)脈音，不斷打氣，在動(dòng)脈音消失后再將水銀面提高20 ～30 mmHg，然后以2 ～4 mmHg/s 的下降速度放氣，再次聽(tīng)到動(dòng)脈音時(shí)的血壓即為收縮壓。先測(cè)量雙側(cè)肱動(dòng)脈的收縮期血壓，同一部位重復(fù)測(cè)量2 次，每次間隔3 s 至2 min 并取其平均值，若兩側(cè)血壓差＞10 mmHg則以高值作為肱動(dòng)脈收縮期血壓;再測(cè)同側(cè)脛后動(dòng)脈和足背動(dòng)脈收縮期血壓，取其中的高值作為踝部收縮壓;最后用選定的踝部收縮壓除以選定的肱部收縮壓計(jì)算ABI。ABI 的正常值為1.0 ～1.4，ABI ＞1.4 為動(dòng)脈鈣化不可壓縮而出現(xiàn)的假陰性結(jié)果，從研究中剔除。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 12.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，2 組間比較用獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)，變量之間的關(guān)系用直線相關(guān)分析及多元回歸，P ＜0.05 為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般臨床資料 高脂血癥組BMI、腰圍、腰臀比、收縮壓、血糖、TC、TG、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、hsCRP 較正常對(duì)照組明顯升高(P ＜0.01)，有顯著性差異，高脂血癥組ABI 較正常對(duì)照組降低(P ＜0.05)，有顯著性差異，2 組體質(zhì)量、臀圍、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、舒張壓無(wú)明顯差異。見(jiàn)表1。

表1 2 組臨床資料及ABI 的比較(±s)

表1 2 組臨床資料及ABI 的比較(±s)

注:與對(duì)照組比較，* P ＜0.05，＊＊P ＜0.01

項(xiàng)目正常對(duì)照組(n=60)高脂血癥組(n=243)69.3 ±5.268.6 ±6.3 BMI22.5 ±2.324.1 ±3.3＊＊腰圍(cm)80.4 ±8.587.3 ±9.6＊＊臀圍(cm)96.7 ±5.898.6 ±6.6腰臀比0.83 ±0.070.88 ±0.08＊＊收縮壓(mmHg)123.9 ±10.5134.6 ±17.3＊＊舒張壓(mmHg)75.6 ±8.279.4 ±11.2空腹血糖(mmol/L)4.90 ±0.516.62 ±2.73＊＊吸煙指數(shù)585 ±389599 ±534 TC(mmol/l)4.59 ±0.625.73 ±1.53＊＊TG(mmol/l)1.24 ±0.542.19 ±1.77＊＊LDL-C(mmol/l)3.04 ±0.723.67 ±1.23＊＊HDL-C(mmol/l)1.21 ±0.211.35 ±0.55 hsCRP(mg/L)2.55 ±2.445.11 ±8.28＊＊ABI1.21 ±0.111.12 ±0.15年齡(歲)*

2.2 2 組血清白細(xì)胞補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白CD55、CD59 的表達(dá)比較 高脂血癥組CD55 陽(yáng)性淋巴細(xì)胞平均熒光強(qiáng)度及百分率均較正常對(duì)照組明顯降低(P ＜0.05)，2 組間CD59 表達(dá)水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞0.05)。見(jiàn)表2。

表2 2 組補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白CD55 表達(dá)的比較(±s)

表2 2 組補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白CD55 表達(dá)的比較(±s)

注:與對(duì)照組比較，* P ＜0.05

組別平均熒光強(qiáng)度(道數(shù))單核細(xì)胞粒細(xì)胞淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞粒細(xì)胞百分率(%)淋巴細(xì)胞正常對(duì)照組(n=60)2.33 ±0.384.17 ±2.082.45 ±0.7041.77 ±12.688 9.76 ±13.4383.29 ±14.28高脂血癥組(n=243)2.07 ±0.26*3.58 ±1.262.29 ±0.6835.26 ±13.38*82.56 ±15.7882.03 ±13.67

2.3 補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白CD55、CD59 影響因素分析CD55 陽(yáng)性淋巴細(xì)胞平均熒光強(qiáng)度與腰臀比、腰圍、BMI 呈負(fù)相關(guān)(r =－0.343、－0.241、－0.183，P 均＜0.05)，多元線性回歸分析腰圍進(jìn)入回歸方程，CD55陽(yáng)性淋巴細(xì)胞平均熒光強(qiáng)度=3.460－1.403 ×腰圍。CD59 與上述指標(biāo)無(wú)相關(guān)性。

2.4 ABI 影響因素分析 直線相關(guān)分析顯示，ABI 與年齡、hsCRP、TC、收縮壓、BMI 呈負(fù)相關(guān)(r =－0.243、－0.330、－0.276、－0.228、－0.257，P 均＜0.05)，ABI 與CD55 陽(yáng)性淋巴細(xì)胞平均熒光強(qiáng)度呈正相關(guān)(r=0.308，P ＜0.05)，多元回歸分析發(fā)現(xiàn)，hsCRP、CD55陽(yáng)性淋巴細(xì)胞平均熒光強(qiáng)度、年齡進(jìn)入回歸方程，回歸方程為:ABI =1.287－0.006 ×hsCRP +0.073 ×CD55陽(yáng)性淋巴細(xì)胞平均熒光強(qiáng)度－0.167 ×年齡。

3 討論

動(dòng)脈粥樣硬化導(dǎo)致的心腦血管疾病已成為現(xiàn)代社會(huì)威脅人們健康及生命的最常見(jiàn)原因［4］，目前認(rèn)為動(dòng)脈粥樣硬化是一種慢性炎癥，以動(dòng)脈管壁單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)、泡沫細(xì)胞形成、脂質(zhì)沉積和鈣化為特點(diǎn)。補(bǔ)體系統(tǒng)是固有免疫的組成部分，是炎癥反應(yīng)的重要介質(zhì)和效應(yīng)分子。補(bǔ)體參與動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展的整個(gè)過(guò)程，補(bǔ)體活化也是缺血再灌注損傷和糖尿病大小血管并發(fā)癥的重要原因［1，5］。補(bǔ)體活化受補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白的調(diào)控，CD55(衰變加速因子)和CD59(膜保護(hù)素)是重要的補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白，能防止補(bǔ)體活化對(duì)自身組織的損傷。CD55 通過(guò)阻斷補(bǔ)體C3/C5 轉(zhuǎn)化酶的組裝并促進(jìn)其衰變而抑制補(bǔ)體激活;CD59 通過(guò)抑制膜攻擊復(fù)合物C5b-9 的形成而防止細(xì)胞溶解。

本研究顯示，高脂血癥患者CD55 陽(yáng)性淋巴細(xì)胞平均熒光強(qiáng)度及百分率均較正常對(duì)照組明顯降低，CD55表達(dá)下調(diào)，降低了機(jī)體對(duì)補(bǔ)體活化的抑制作用，有利于動(dòng)脈粥樣硬化的形成。相關(guān)分析顯示CD55 陽(yáng)性淋巴細(xì)胞平均熒光強(qiáng)度與腰臀比、腰圍、BMI 呈負(fù)相關(guān)，與劉永銘等［6］研究結(jié)果一致，提示肥胖或脂肪組織增加可導(dǎo)致補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白表達(dá)下調(diào)。補(bǔ)體活化產(chǎn)物有多種致動(dòng)脈粥樣硬化的特性，因此，CD55 表達(dá)下調(diào)可能是高脂血癥患者動(dòng)脈粥樣硬化易感性的機(jī)制之一。

ABI 通常用于外周動(dòng)脈疾病的診斷，反映患肢缺血程度的輕重，但近年來(lái)ABI 作為動(dòng)脈粥樣硬化的一種測(cè)量手段，正受到越來(lái)越多的關(guān)注。2007 年ESH/ES 也明確指出，ABI 降低是反映動(dòng)脈粥樣硬化性疾病與總體心血管危險(xiǎn)增加的指標(biāo)。國(guó)內(nèi)外多項(xiàng)研究表明［7-9］:ABI 異常是心血管事件的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，ABI降低則心血管意外的發(fā)生率增高，其對(duì)預(yù)測(cè)心血管事件的發(fā)生和死亡風(fēng)險(xiǎn)具有很高的價(jià)值。本研究發(fā)現(xiàn)高脂血癥組ABI 較正常對(duì)照組明顯降低，ABI 與年齡、hsCRP、高膽固醇、收縮壓、BMI 呈負(fù)相關(guān)，與國(guó)外報(bào)道一致［10-11］，多元回歸顯示hsCRP、CD55 陽(yáng)性淋巴細(xì)胞平均熒光強(qiáng)度、年齡進(jìn)入ABI 回歸方程，表明上述指標(biāo)是動(dòng)脈粥樣硬化的重要影響因素。補(bǔ)體系統(tǒng)組成的多樣性和補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白的存在為動(dòng)脈粥樣硬化的防治提供了多個(gè)潛在的干預(yù)靶點(diǎn)。

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