李慧峰，單明輝，李子平

（1.河北北方學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院藥學(xué)教研室，河北張家口075000；2.河北廊坊市大廠畜牧水產(chǎn)局，河北廊坊065300）

炎癥是臨床常見(jiàn)的病理過(guò)程之一，也是許多疾病發(fā)生與發(fā)展的基礎(chǔ)［1-4］。因此抗炎藥物的研究具有重要的意義。經(jīng)典的抗炎藥物有甾體類(lèi)和非甾體類(lèi)兩大類(lèi)，但由于這兩類(lèi)藥物均存在明顯的不良反應(yīng)，而限制了它們的臨床應(yīng)用［5-7］。研制療效好、不良反應(yīng)小的新型抗炎藥物成為目前抗炎藥研究的重要研究方向之一。中藥資源豐富，除具有抗炎作用外，還具有免疫調(diào)節(jié)、清熱解毒、活血化淤等藥理作用，加強(qiáng)中藥抗炎活性成分的研究，可為開(kāi)發(fā)更有效、更安全的新型抗炎藥提供理論基礎(chǔ)。本試驗(yàn)通過(guò)觀察金歸煎劑對(duì)動(dòng)物炎癥模型的作用而研究其抗炎作用，從而為其藥理作用的進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)昆明種小鼠，體重15g±2.0g；SD大鼠，150g～180g，雌雄各半，均由河北北方學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。

1.1.2 中藥煎劑制備 金銀花60g，當(dāng)歸30g，紫背天葵15g，天花粉9g，生甘草9g，通草3g。先用1 500mL重蒸水浸泡生藥1h，電爐加熱至沸后改用文火微沸保持45min后攪拌，趁熱過(guò)濾，藥渣再用1 500mL重蒸水煮沸45min，過(guò)濾，合并兩次濾液，濃縮至含生藥1g／mL。

1.2 方法

1.2.1 金歸煎劑對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響參照文獻(xiàn)［9］方法，取小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，空白對(duì)照組灌胃生理鹽水10mL／kg，阿司匹林組0.2g／kg，金歸煎劑低、中、高劑量組分別為5、10、20g／kg，連續(xù)給藥7d，末次給藥后30 min，將0.1mL二甲苯均勻涂于小鼠右耳兩側(cè)致炎，左耳不涂為對(duì)照。致炎1h后，頸椎脫臼致死，用直徑6.0mm打孔器沖下雙耳同一相應(yīng)部分的圓片，分別稱(chēng)重，以左右兩耳片重量之差為腫脹指標(biāo)，計(jì)算腫脹抑制率。

1.2.2 金歸煎劑對(duì)棉球誘發(fā)小鼠肉芽組織增生的影響 取小鼠50只，分組及給藥劑量同1.2.1，給藥前各鼠用乙醚麻醉后，背部切一個(gè)0.5cm的小口，從切口向兩側(cè)腋下各植入一個(gè)5mg的滅菌棉球。從手術(shù)當(dāng)日開(kāi)始連續(xù)給藥7d，第8天頸椎脫臼處死小鼠，將棉球連同周?chē)娜庋拷M織一起取出，剔除脂肪組織。置60℃干燥箱烘干，精確稱(chēng)取重量，減去原棉球重量即為肉芽組織增生的重量。

1.2.3 金歸煎劑對(duì)蛋清所致大鼠足跖腫脹的影響取SD大鼠50只，動(dòng)物分組及給藥劑量見(jiàn)表3，給藥途徑同1.2.1，各組每日給藥1次，于第8天給藥1h后大鼠右后足跖腱膜下注射10ml／L的蛋清液0.1mL致炎，30min后用排水法測(cè)致炎前和致炎后右后足的容積并計(jì)算腫脹程度。

2 結(jié)果

2.1 金歸煎劑對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響

由表1可知，與空白對(duì)照組比較，金歸煎劑低、中、高劑量均能明顯減輕二甲苯所致小鼠右耳的紅、腫等癥狀，高劑量組差異極顯著（P＜0.01），作用強(qiáng)度與劑量呈正相關(guān)。

2.2 金歸煎劑對(duì)棉球誘發(fā)小鼠肉芽組織增生的影響

由表2可知，金歸煎劑低劑量組對(duì)小鼠肉芽組織增生無(wú)抑制作用，中劑量組與空白對(duì)照組相比差異顯著（P＜0.05），高劑量組與空白對(duì)照組相比差異極顯著（P＜0.01），但抑制作用不及阿司匹林組。

2.3 金歸煎劑對(duì)蛋清所致大鼠足跖腫脹的影響

由表3可知，給藥后0.5h，阿司匹林組能顯著抑制蛋清導(dǎo)致的大鼠足跖腫脹（P＜0.05），致炎后1 h、2h阿司匹林組與空白對(duì)照組相比對(duì)足跖腫脹有極顯著的抑制作用（P＜0.01），金歸煎劑高劑量組對(duì)大鼠足跖腫脹在致炎后0.5h～4h均有顯著的抑制作用（P＜0.05）。

表1 金歸煎劑對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響Table 1 Effects of Jin-gui decoction on ear-swelling of mice induced by xylene

表2 金歸煎劑對(duì)棉球誘發(fā)小鼠肉芽組織增生的影響Table 2 Effects of Jin-gui decoction on granuloma induced by planted cotton ball in mice

3 討論

由二甲苯所致小鼠耳廓腫脹局部血管擴(kuò)張為特征，這種模型用于評(píng)價(jià)藥物對(duì)炎癥早期血管通透性增加的影響程度，從而反映藥物對(duì)急性炎癥的作用。蛋清所致大鼠足跖腫脹主要以局部腫脹為特征，該模型的特點(diǎn)是致炎局部前列腺素合成增加，并與血管活性物質(zhì)和激肽類(lèi)一起誘發(fā)水腫，用于觀察藥物對(duì)急性炎癥的影響。小鼠棉球肉芽腫實(shí)驗(yàn)主要反應(yīng)對(duì)慢性炎癥肉芽組織增生的影響，以組織變形和纖維化為特征，屬于增生性炎癥試驗(yàn)，常作為篩選抑制炎癥增殖期藥物的模型。試驗(yàn)結(jié)果表明，金歸煎劑各劑量組對(duì)二甲苯誘發(fā)的小鼠耳廓腫脹均具有明顯的抑制作用，還能顯著性降低蛋清所致大鼠足跖腫度。它不僅對(duì)以血漿蛋白滲出為主的急性炎癥有顯著對(duì)抗作用，而且對(duì)以肉芽組織增生為主的慢性增殖性炎癥也有較強(qiáng)的抑制作用。

表3 金歸煎劑對(duì)蛋清所致大鼠足跖腫脹的影響試驗(yàn)Table 3 Effects of Jin-gui decoction on edema of rat hind paw induced by albumen

金銀花具有清熱解毒、疏散風(fēng)熱的功效，現(xiàn)代藥理學(xué)證明其藥理作用主要包括抗病原微生物、抗內(nèi)毒素、抗炎、解熱、增強(qiáng)免疫力等藥理作用［9］。當(dāng)歸其味甘而重，故專(zhuān)能補(bǔ)血，其氣輕而辛，故又能行血，補(bǔ)中有動(dòng)，行中有補(bǔ)，誠(chéng)血中之氣藥，亦血中之圣藥也。紫背天葵味甘，微酸，性涼，具清熱解毒、散淤消腫、生津止渴之功效。天花粉與金銀花合用可潰瘡排膿。故本方主要功效即清熱解毒、消瘡排膿、補(bǔ)血行氣。結(jié)果顯示該方劑對(duì)急慢性炎癥均具有顯著地抑制作用，這為臨床用藥提供了充分的理論依據(jù)，但對(duì)于其藥效機(jī)理的研究，仍需進(jìn)一步探討。

本試驗(yàn)通過(guò)觀察金歸煎劑對(duì)急性和慢性炎癥模型抗炎作用，結(jié)果表明金歸煎劑對(duì)急性和慢性炎癥均有顯著的抑制作用，可用于奶牛乳房炎的臨床治療。

［1］ 李國(guó)華，李 貞，喬 軍，等.奶牛乳房炎防治的新進(jìn)展［J］.中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2011，38（5）：186-189.

［2］ 曹 志，何生虎.奶牛乳房炎防治技術(shù)研究進(jìn)展［J］.農(nóng)業(yè)科學(xué)研究，2011，32（1）：76-82.

［3］ 陳永耀，楊雪峰.奶牛乳房炎的危害及其預(yù)防措施［J］.河南科技學(xué)院學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2010，38（4）：58-61.

［4］ 張偉民，張昌斗.奶牛乳房炎的危害與防治［J］.現(xiàn)代化農(nóng)業(yè)，2010（3）：42-43.

［5］ 米耀榮，郭生泉，張 勇.奶牛乳房炎的危害及其防治措施［J］.畜牧與飼料科學(xué)，2009，30（10）：163-165.

［6］ 喬 樵，周亨德，朱曙東.談中醫(yī)中藥的優(yōu)勢(shì)［J］.浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，31（2）：147-148.

［7］ 張昭文.發(fā)揮中醫(yī)中藥的優(yōu)勢(shì)是減少和預(yù)防抗生素的使用與濫用的有效途徑［J］.中華中西醫(yī)學(xué)雜志，2005，3（7）：81-82.

［8］ 楊巨成.雙向調(diào)節(jié)作用在中醫(yī)臨床實(shí)踐中的重要意義［J］.北京中醫(yī)藥，2008，27（11）：860-861.

［9］ 李慧峰，單明輝.復(fù)方白頭翁散的抗炎作用研究［J］.河北北方學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，27（2）：72-75.