齊 陽，馬雙雙，王 瑩，徐紀平，曹 翔，蔡東聯(lián)，黃 文，李兆申

疲勞是機體復(fù)雜的生理生化變化過程，可導(dǎo)致運動能力降低，戰(zhàn)斗力減退。疲勞的恢復(fù)需要快速修復(fù)損傷、清除積累的代謝產(chǎn)物。營養(yǎng)添加劑對于疲勞的快速恢復(fù)的積極作用已經(jīng)被廣泛認可［1－2］。中鏈三酰甘油(medium-chain triglycerides，MCT)是含有6～10個碳原子的三酰甘油，因其水溶性高，所以可以在小腸內(nèi)快速水解和被肝吸收，關(guān)于其可能作為運動中的能量來源通過增加脂肪酸供應(yīng)、減少肝糖原耗竭、延長耐力時間的研究鮮見報道［3］。本實驗觀察MCT抗力竭游泳小鼠疲勞的效果，并探討其機制。

1 材料與方法

1.1 材料 (1)MCT粉，由浙江海力生生物科技公司提供。D12450B化學(xué)合成飼料，蛋白質(zhì)供能占20%，碳水化合物供能占70%，脂肪供能占10%。以D12450B飼料為基礎(chǔ)，在保證豆油含量不變的情況下，分別加入 3.9、11.6、19.3、28.6 g MCT 粉劑取代豬油所占比例，制成 6%MCT、18%MCT、30%MCT、44.4%MCT組飼料(上海斯萊克實驗動物有限公司配制)。(2)ICR小鼠72只，體質(zhì)量(18±4)g，由第二軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心提供。(3)谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxdase，GSH-Px)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)檢測試劑盒，由南京建成生物科技公司提供。(4)H1TACHI7600-120全自動生化分析儀，購自日立公司。

1.2 動物分組 適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，按數(shù)字表法隨機分為6組，每組12只?？瞻讓φ战M:喂養(yǎng)標準D12450B飼料(不含MCT)，不進行游泳訓(xùn)練;游泳對照組:喂養(yǎng)標準D12450B飼料(不含MCT)，進行游泳訓(xùn)練;6%MCT組、18%MCT組、30%MCT組和44.4%MCT組分別給予相應(yīng)的含MCT的飼料，飼料量每只每天4.5 g，自由飲水。同時每周1、3、5進行無負重游泳訓(xùn)練，放入385 mm×380 mm×387 mm的游泳箱內(nèi)，水溫(30±1)℃?？瞻讓φ战M水深4 cm，其他各組水深(15±2)cm，游泳訓(xùn)練結(jié)束后，取出吹干。每間隔2次訓(xùn)練后游泳時間延長10 min，訓(xùn)練時間依次為20、30、40 min，實驗為期21 d。

1.3 實驗方法 (1)負重力竭游泳實驗:第21天時5個游泳組小鼠進行負重力竭游泳實驗。在小鼠尾根部各負荷其體重4%的螺帽作為重物，放入游泳箱內(nèi)，水深35 cm，水溫(30±1)℃，保證小鼠在水中不能用尾巴接觸箱底。以小鼠頭部沉入水中10 s內(nèi)不能浮出水面自由呼吸為力竭標準，用秒表記錄小鼠游泳力竭時間。(2)標本收集:各組小鼠在力竭游泳后摘眼球取血，用不加抗凝劑的1.5 ml離心管收集，3000 r/min離心20 min，吸取血清，然后迅速解剖，取小鼠肝臟用冰冷生理鹽水沖凈血漬，液氮罐中保存待測。

1.4 評價指標 (1)負重力竭游泳時間。(2)血生化指標:檢測肌酸激酶(creatine kinase，CK)和血糖(GLU)水平。(3)肝臟生化指標:肝糖原(hepatic glycogen，HG)測定采用蒽酮-硫酸比色法，非酯化脂肪酸(NEFA)測定采用銅顯色法。(4)肝臟組織抗氧化水平:將肝臟組織制成勻漿，4℃下3000 r/min離心10 min，取上清，BCA蛋白測定法檢測GSH-Px、SOD、MDA水平。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 16.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理，所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差()表示，組間差異用方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各游泳組負重游泳力竭時間 6%MCT組和18%MCT組游泳力竭時間顯著延長(P＜0.05)，分別為游泳對照組的1.4倍和1.6倍，30%MCT組游泳力竭時間與游泳對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P ＞0.05)。見表1。

表1 MCT對小鼠負重游泳力竭時間的影響

2.2 各組血清和肝臟生化指標 與空白對照組比較，除18%MCT組外，力竭游泳各組血清CK活性均明顯升高(P＜0.05)，游泳對照組血清GLU和HG水平均顯著降低(P＜0.05)，各 MCT組血清GLU無明顯降低(P＞0.05)。與游泳對照組比較，各MCT組血清CK活性均顯著降低(P＜0.05)，血糖均顯著增高(P＜0.05)，6%MCT組、18%MCT組、30%MCT組HG水平均顯著高于游泳對照組(P＜0.05)，各MCT組肝臟NEFA含量均顯著低于游泳對照組(P＜0.05)。見表2。提示MCT可能通過增加NEFA氧化供能、減少肝糖原的耗竭、提高血糖水平等機制來對抗疲勞。

表2 MCT對力竭游泳小鼠血和肝臟生化指標的影響

2.3 各組肝臟抗氧化水平 與游泳對照組相比，各MCT組肝臟中GSH-Px和SOD活性增高，6%MCT組和18%MCT組均顯著升高(P＜0.05)，MDA含量均降低，6%MCT組和18%MCT組顯著下降(P＜0.05)，見表3。提示MCT可降低肝臟脂質(zhì)過氧化損害，提高機體抗氧化應(yīng)激的能力。

表3 MCT對力竭游泳小鼠肝臟抗氧化能力的影響

3 討論

疲勞是機體體力和腦力活動到一定階段時必然出現(xiàn)的一種正常的生理現(xiàn)象［4］。其產(chǎn)生的原因是多方面的，主要包括能源物質(zhì)耗竭、代謝產(chǎn)物積累、神經(jīng)遞質(zhì)失衡和自由基產(chǎn)生加劇等［5］。在一般情況下，肝臟和肌肉主要利用脂肪酸β-氧化供能。研究表明，在運動中通過增加脂肪酸的動員減少肝糖原的耗竭也可以延長耐力運動時間。本實驗將MCT按比例添加到小鼠飼料中，觀察MCT抵抗運動性疲勞的效果。

抗疲勞耐力測定最直觀的指標是負重游泳力竭實驗。Wei等［6］的實驗證實，MCT在游泳實驗前0.5 h灌胃劑量680 mg/(kg·d)(相應(yīng)于6%MCT組)可以顯著延長小鼠力竭游泳時間;本實驗中，6%和18%MCT組游泳力竭時間顯著延長。提示，MCT即時或長期飲食攝入有緩解運動性疲勞的功效。血糖是肌肉運動時能量的直接來源，運動初期，血糖水平降低會刺激肝糖原的分解，同時加速脂肪酸的氧化供能過程。血液中CK活性升高提示已經(jīng)或正在發(fā)生肌肉損傷［7］。在本實驗中，18%MCT組較游泳對照組CK活性和肝臟游離脂肪酸含量顯著下降，GLU和HG水平顯著升高，其他各組也有相應(yīng)改變，但無劑量依賴反應(yīng)，提示MCT可以通過增加脂肪動員，增強脂肪酸氧化供能，降低肝糖原耗竭，延長耐力運動時間。

運動過程中有氧代謝活躍會產(chǎn)生大量的活性氧自由基，如超氧陰離子、羥自由基、單線態(tài)氧等［8］。但機體內(nèi)也存在相應(yīng)的抗氧化酶和抗氧化物質(zhì)，如SOD和GSH-Px是保護組織免于自由基攻擊發(fā)生脂質(zhì)過氧化的酶。在本實驗中，6%和18%MCT組GSH-Px活性顯著升高，SOD活性顯著升高，MDA含量顯著下降，提示，運動后游泳對照組小鼠肝臟抗氧化能力顯著降低，脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物增多。6%和18%MCT 2個劑量可以顯著提高肝臟抗氧化酶活性，減少脂質(zhì)過氧化物的生成。大量實驗研究表明，長時間的耐力訓(xùn)練可以使機體抗氧化系統(tǒng)發(fā)生適應(yīng)性變化，表現(xiàn)為可以增強機體的抗氧化能力，降低脂質(zhì)過氧化水平，改善紅細胞膜特性，使其有氧代謝能力及抗疲勞能力得到提高，從而減少因有氧氧化系統(tǒng)過度負荷和組織器官相對缺血所致的自由基生成，降低對細胞的損傷程度，達到延緩疲勞和抗衰老的效果。添加MCT不僅可以迅速增加氧化供能，還可以誘導(dǎo)多不飽和脂肪酸向肝外組織轉(zhuǎn)移，降低肝臟氧化壓力［9］。

綜上所述，本研究表明低劑量MCT具有抵抗和緩解運動性疲勞的效果，與Wei等［6］的結(jié)論一致。其機制可能是MCT作為一種能源物質(zhì)，通過增加運動時的脂肪酸動員氧化供能，節(jié)省了肝糖原的耗竭。各MCT組肝糖原游離脂肪酸在運動后下降，原因可能因其參與了氧化供能，降低了肝臟脂質(zhì)積累和氧化壓力。但是，MCT的長期攝入是否會引起肝臟脂質(zhì)代謝紊亂仍需進一步探討。

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