蔣小良，賈長(zhǎng)生，賀拂，卿寧，曾銘，郝雨，陳凱

（1.江門(mén)出入境檢驗(yàn)檢疫局，廣東江門(mén) 529000；2.五邑大學(xué)，廣東江門(mén) 529000；3.花都出入境檢驗(yàn)檢疫局，廣東廣州 510800）

雙酚 A（bisphenol A，BPA）學(xué)名 2，2-二（4-羥基苯基）丙烷，是世界上使用最廣泛的工業(yè)化合物之一，是制造環(huán)氧樹(shù)脂、聚碳酸酯、聚砜、聚芳酯及酚醛樹(shù)脂等產(chǎn)品的重要原料。雙酚A被廣泛應(yīng)用在食品包裝材料、容器內(nèi)壁涂料等方面，其可通過(guò)食品包裝容器和塑料薄膜遷移到食品中并進(jìn)入體內(nèi)。食品包裝具有保護(hù)食品，方便貯運(yùn)，促進(jìn)銷(xiāo)售，提高食品價(jià)值的重要作用。食品包裝已經(jīng)成為食品不可分割的重要組成部分。塑料用于食品包裝的量占塑料總產(chǎn)量的1/4；塑料包裝形式多種多樣，如托盤(pán)類(lèi)、容器類(lèi)、軟管類(lèi)、編織袋類(lèi)、單層塑膜、多層復(fù)合薄膜類(lèi)等。

雙酚A具有某些雌激素特性，對(duì)淋巴細(xì)胞具有增殖的作用，雙酚A被認(rèn)為與心血管疾病、腸道疾病、免疫系統(tǒng)等疾病有密切關(guān)系。不同劑量的雙酚A能夠誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞的增殖，從而有潛在的免疫毒性[1]。歐盟食物鏈和動(dòng)物健康委員會(huì)（SCFCAH）日前決定，歐盟規(guī)定成員國(guó)從2011年6月1日起禁止進(jìn)口含有化學(xué)物質(zhì)雙酚A的塑料嬰兒奶瓶。目前美國(guó)、加拿大、日本和挪威等國(guó)家也嚴(yán)令限制雙酚A這類(lèi)化合物在食品包裝材料中使用。

目前，塑料包裝材料中雙酚A的潛在遷移性對(duì)人體健康的危害已引起了社會(huì)的關(guān)注。研究方法基本上是研究塑料包裝材料中雙酚A的總含量，通過(guò)索氏提取[2]、液-液萃取[3]、加速溶劑萃取[4]、微波輔助萃取[5]、固相萃取[6]及固相微萃取[7]等處理方法，將塑料包裝材料中的雙酚A轉(zhuǎn)移成合適溶劑中，然后通過(guò)紫外分光光度法[8]、高效液相色譜法[9]、氣質(zhì)聯(lián)用法[10－12]、氣相色譜法[13]、熒光檢測(cè)法[14－15]及傳感器檢測(cè)法[16]等進(jìn)行定性定量分析。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

氣相色譜－質(zhì)譜儀GC－MS（GC 7890A/MS 5975C）：美國(guó)Agilent公司；超聲波發(fā)生器：上海之信儀器有限公司；R－210旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：瑞士BUCHI公司；SHA－CA（WHY－2）型水浴恒溫振蕩器：金壇市晶玻實(shí)驗(yàn)儀器廠；ZM200超離心研磨儀：德國(guó)RETSCH公司。雙酚A標(biāo)準(zhǔn)品：純度≥99.9%，德國(guó)Supelco公司，甲醇：色譜純，上海德正化工有限公司。

雙酚A標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：精確稱(chēng)取雙酚A標(biāo)準(zhǔn)品0.025 0 g，用甲醇溶解并定容至250 mL，即1 mL溶液含雙酚A 0.1 mg，臨用前根據(jù)需要用甲醇稀釋至合適濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.2 氣相色譜－質(zhì)譜條件

1.2.1 色譜條件

色譜柱：DB－5MS柱（30 m ×0.25 mm ×0.25μm）；升溫程序：初始溫度100℃，以10℃/min升至200℃保持2 min，再以20℃/min升至280℃，保持1 min后再以10℃/min升至300℃；載氣：高純氦氣（純度＞99.999%）；載氣流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣口溫度280℃；進(jìn)樣量：1.0 μL；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣。

1.2.2 質(zhì)譜條件

離子源溫度230℃；四極桿溫度：150℃；EI源：電子能量70 eV；色譜－質(zhì)譜接口溫度：280℃；溶劑延遲：3 min；MS檢測(cè)方式：全掃描；檢測(cè)雙酚A的特征質(zhì)譜峰：m/z=213，228，119。

1.3 樣品處理

選取有代表性的食品包裝材料樣品，先剪成2 mm×2 mm以下，再采用超離心研磨儀將樣品研磨成粉末狀，準(zhǔn)確稱(chēng)取粉末樣品1.0 g（精確到0.001 g），分別采用恒溫水浴振蕩提取、超聲波提取和索氏提取，將提取液在37℃條件下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至近干，再用甲醇定容到1 mL，上GC－MS分析。

1.4 檢測(cè)和計(jì)算

吸取1.0μL雙酚A標(biāo)準(zhǔn)溶液注入GC－MS儀，對(duì)特征色譜峰的峰面積進(jìn)行自動(dòng)積分，得出相應(yīng)的峰面積－濃度線(xiàn)性回歸方程。吸取樣品溶液進(jìn)行分析，得到色譜峰和質(zhì)譜圖，與標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜峰的保留時(shí)間和質(zhì)譜圖進(jìn)行比較。然后再根據(jù)下式求出樣品中雙酚A含量

式中：Xi為試樣中雙酚 A 含量，（mg/kg）；Ai為樣品溶液中雙酚A的峰面積；A0為空白樣中雙酚A的峰面積；Ais為標(biāo)準(zhǔn)工作液中雙酚A的峰面積；ci為標(biāo)準(zhǔn)工作液中雙酚A的質(zhì)量濃度，（mg/mL）；V為樣品溶液最終定容體積，mL；m為試樣質(zhì)量，g。

2 結(jié)果與討論

2.1 雙酚A提取溶劑的選擇

按照方法1.3分別試驗(yàn)了甲醇、二氯甲烷、三氯甲烷和正己烷4種提取溶劑，分別稱(chēng)取4份樣品加入到100 mL錐形瓶中，依次加入20 mL甲醇、二氯甲烷、三氯甲烷和正己烷，于室溫下超聲波萃取1.5 h，然后減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至近干，用甲醇定容到1 mL，用GCMS定量分析。試驗(yàn)結(jié)果表明，在同樣的提取條件下，甲醇對(duì)雙酚A提取的效率最高，雙酚A是具有較強(qiáng)的極性分子，根據(jù)相似相溶原理，4種溶劑中甲醇的分子極性最強(qiáng)，所以試驗(yàn)選擇甲醇做提取溶劑。

2.2 提取方法的選擇

按照方法1.3分別試驗(yàn)了恒溫水浴振蕩提取、超聲波提取和索氏提取，恒溫水浴振蕩提取的條件是溫度37℃，甲醇溶液40 mL，提取時(shí)間為3 h；超聲波提取的條件是室溫下超聲提取3h，提取溶劑為甲醇，溶劑體積為40 mL；索氏提取的條件是室溫下提取3 h，提取溶劑為甲醇，溶劑體積為100mL。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 3種提取方法提取3種樣品中雙酚A的結(jié)果Table 1 Determination results of Bisphenol A in three samples extracted by three methods

從表1可以看出，對(duì)于3種不同的食品包裝材料，3種提取方法的提取效果趨勢(shì)一致，索氏提取明顯好于超聲波提取，而水浴振蕩提取效果最差，所以試驗(yàn)選擇索氏提取為最佳提取方法。

2.3 提取時(shí)間的選擇

以選定的索氏提取法作為研究對(duì)象，考察了提取時(shí)間。一般索氏提取時(shí)間較長(zhǎng)，所以在快速檢測(cè)中較少采用，為了更有效縮短提取時(shí)間，提高提取效率，試驗(yàn)了提取時(shí)間為 1、2、3、4、5、6 h 提取 PC 奶瓶中的雙酚A，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 提取時(shí)間的選擇Table 2 The chioce of extracted time

由表2數(shù)據(jù)看出，隨著索氏提取時(shí)間的增加，雙酚A提取量逐步增大，當(dāng)提取時(shí)間達(dá)到3 h后，雙酚A的提取量趨于穩(wěn)定，所以試驗(yàn)選擇索氏提取時(shí)間為3 h。

2.4 雙酚A的GC－MS確證

試驗(yàn)了雙酚A標(biāo)準(zhǔn)物的GC－MS色譜條件，測(cè)得雙酚A的特征色譜峰如圖1所示。

圖1 雙酚A的色譜峰Fig.1 Chromatograms spectra of bisphenol A

由圖1可知，其保留時(shí)間為14.845 min。對(duì)該色譜峰進(jìn)行譜庫(kù)檢索分析，得到質(zhì)譜圖如圖2所示。

圖2 雙酚A的質(zhì)譜圖Fig.2 Mass spectra of bisphenol A

由圖 2 可知，特征譜峰為：m/z=119，213，228。經(jīng)比對(duì)，與數(shù)據(jù)庫(kù)中雙酚A的質(zhì)譜圖一致。

2.5 線(xiàn)性范圍和檢出限

用甲醇逐級(jí)稀釋雙酚A貯備液，配成質(zhì)量濃度分別為 0.10、0.50、2.0、10、50、100、200 mg/L 的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。按GC－MS工作條件進(jìn)行測(cè)定，以質(zhì)量濃度x（mg/L）對(duì)色譜峰面積y進(jìn)行線(xiàn)性回歸，得到線(xiàn)性方程y=7 843.7x－261.7及相關(guān)系數(shù)0.999 8。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，雙酚A在0.10 mg/L～10 mg/L的濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好線(xiàn)性關(guān)系。連續(xù)做樣品空白20次，用GC－MS檢測(cè)分析，得出方法檢出限LOD（信噪比＞3）為0.02 mg/kg。

2.6 樣品分析和加標(biāo)回收率

將本方法用于食品包裝材料樣品分析，按照1.3處理樣品及1.4分析檢測(cè)及計(jì)算結(jié)果，結(jié)果表明：樣品溶液中雙酚A保留時(shí)間和質(zhì)譜圖與雙酚A標(biāo)準(zhǔn)溶液一致，5種食品包裝材料中雙酚A的含量分別為5.56、14.08、65.48、105.37 和 142.85 mg/kg。對(duì)某食品包裝材料中雙酚A含量進(jìn)行測(cè)定，檢測(cè)結(jié)果為45.16 mg/kg（n=7），對(duì)其分別加入 0.25、0.50、1.0 mL 雙酚 A 標(biāo)準(zhǔn)溶液（100 mg/L）進(jìn)行回收率試驗(yàn)（n=5），樣品平均回收率為90.1%～102.2%，精密度為2.2%～3.7%。

3 結(jié)語(yǔ)

本方法采用索氏提取－氣相色譜－質(zhì)譜法測(cè)定食品包裝材料中的雙酚A，考察了提取溶劑及提取時(shí)間，確定了最佳試驗(yàn)條件，在選擇是實(shí)驗(yàn)條件下，樣品的平均回收率為90.1%～102.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于3.7%，目前該方法已用于實(shí)際樣品檢測(cè)。

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