閆怡軒 李偉忠

[摘要] 目的 研究選擇性環(huán)氧化酶-2（COX-2）抑制劑塞來昔布影響口腔癌耐長(zhǎng)春新堿細(xì)胞株KB/VCR細(xì)胞對(duì)長(zhǎng)春新堿敏感性的效應(yīng)，探討其作用機(jī)制。方法 采用MTT法分別檢測(cè)塞來昔布組、長(zhǎng)春新堿組、塞來昔布+長(zhǎng)春新堿組、塞來昔布+長(zhǎng)春新堿+前列腺素E2（PGE2）組對(duì)KB/VCR細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用，用Western印跡法檢測(cè)P-糖蛋白（P-gp）、Bcl-2和Bcl-XL的表達(dá)，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)塞來昔布對(duì)KB/VCR細(xì)胞凋亡的影響。采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 塞來昔布+長(zhǎng)春新堿組的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率高于塞來昔布組、長(zhǎng)春新堿組及塞來昔布+長(zhǎng)春新堿+PGE2組（P<0.01）。塞來昔布+長(zhǎng)春新堿組和塞來昔布組P-gp的表達(dá)顯著低于長(zhǎng)春新堿組及塞來昔布+長(zhǎng)春新堿+PGE2組（P<0.01），塞來昔布+長(zhǎng)春新堿組、塞來昔布+長(zhǎng)春新堿+PGE2組和塞來昔布組Bcl-2、Bcl-XL的表達(dá)顯著低于長(zhǎng)春新堿組（P<0.01）。塞來昔布+長(zhǎng)春新堿組、塞來昔布+長(zhǎng)春新堿+PGE2組細(xì)胞凋亡率均顯著高于長(zhǎng)春新堿組、塞來昔布

組，塞來昔布+長(zhǎng)春新堿+PGE2組細(xì)胞凋亡率顯著低于塞來昔布+長(zhǎng)春新堿組（P<0.01）。結(jié)論 塞來昔布可以通過下調(diào)P-gp的表達(dá)及促進(jìn)細(xì)胞凋亡，增強(qiáng)長(zhǎng)春新堿耐藥株KB/VCR細(xì)胞對(duì)長(zhǎng)春新堿的敏感性。

[關(guān)鍵詞] KB/VCR細(xì)胞； 多藥耐藥； P-糖蛋白； 環(huán)氧化酶-2抑制劑； 細(xì)胞凋亡

[中圖分類號(hào)] R 739.86 [文獻(xiàn)標(biāo)志碼] A [doi] 10.7518/hxkq.2013.04.018

口腔癌是常見的口腔頭頸部惡性腫瘤之一，近年來口腔癌的發(fā)病率呈現(xiàn)明顯增高趨勢(shì)，已成為威脅人類健康的重要因素之一?；熓强谇话┲匾妮o助治療方法之一，目前化療所面臨的主要問題是癌細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性下降，導(dǎo)致多藥耐藥（multidrug resistant，MDR）的產(chǎn)生，使癌細(xì)胞產(chǎn)生

抵抗廣譜化療藥物的能力。

近來研究[1-3]發(fā)現(xiàn)，選擇性環(huán)氧化酶-2（cycloxy-genase-2，COX-2）抑制劑可抑制許多類型癌細(xì)胞的生長(zhǎng)及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，增強(qiáng)抗腫瘤藥物對(duì)癌細(xì)胞的毒性作用。COX-2抑制劑的抗腫瘤活性的作用機(jī)制包括抑制細(xì)胞分裂周期、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和抑制腫瘤新生血管生成等。此外有研究[4-5]認(rèn)為，COX-2抑制劑可以通過調(diào)節(jié)ABC轉(zhuǎn)運(yùn)家族中的膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白活性而增強(qiáng)腫瘤對(duì)化療藥物的敏感性。研究[6]發(fā)現(xiàn)，在腫瘤組織內(nèi)COX-2與P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）的表達(dá)呈顯著性正相關(guān)。本課題組前期研究[7-8]也證實(shí)，選擇性COX-2抑制劑塞來昔布可顯著增強(qiáng)順鉑對(duì)人舌癌細(xì)胞株Tca8113細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用，增加耐長(zhǎng)春新堿細(xì)胞株KB/VCR細(xì)胞內(nèi)化療藥物的蓄積[9]。本實(shí)驗(yàn)研究塞來昔布對(duì)口腔上皮癌耐長(zhǎng)春新堿細(xì)胞株KB/VCR化療敏感性的影響，探討塞來昔布增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物敏感性的作用機(jī)制。

1 材料和方法

1.1 藥物及試劑

長(zhǎng)春新堿（Vincristine，VCR）（Merck公司，德國(guó)），塞來昔布膠囊（Pfizer公司，美國(guó)），MTT、二甲基亞砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）（Sigma公司，美國(guó)），RPMI-1640、胎牛血清（Invitrogen公司，美國(guó)），P-gp、Bcl-2、Bcl-XL及β-肌動(dòng)蛋白鼠抗人單克隆抗體、熒光標(biāo)記的羊抗鼠二抗（Epitomics公司，美國(guó)），人

口腔表皮樣癌耐長(zhǎng)春新堿細(xì)胞株KB/VCR、人口腔表皮樣癌細(xì)胞KB、膜聯(lián)蛋白（annexin）V-異硫氰酸熒光素（fluorescein isothiocyanate，F(xiàn)ITC）細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒、Hoechst 33342/PI雙染試劑盒（南京凱基生物

科技發(fā)展有限公司）。

1.2 細(xì)胞培養(yǎng)

KB/VCR細(xì)胞用含有10%胎牛血清和200 nmol·L-1 VCR的RPMI-1640培養(yǎng)基于37 ℃、5%CO2環(huán)境中培養(yǎng)，KB細(xì)胞用含有10%胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基，于37 ℃、5%CO2環(huán)境中培養(yǎng)。

1.3 MTT法檢測(cè)

將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的KB/VCR細(xì)胞，以每孔2×103個(gè)細(xì)胞的密度接種于96孔板中，常規(guī)培養(yǎng)24 h，細(xì)胞貼壁后分別加入含10 μmol·L-1塞來昔布（塞來昔布組）、1.5 μmol·L-1長(zhǎng)春新堿（長(zhǎng)春新堿組）、10 μmol·L-1塞來昔布+1.5 μmol·L-1長(zhǎng)春新堿（塞來昔布+長(zhǎng)春新堿

組）及10 μmol·L-1塞來昔布+1.5 μmol·L-1長(zhǎng)春新堿+100 μg·L-1前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2）（塞

來昔布+長(zhǎng)春新堿+PGE2組）的培養(yǎng)基，終液量為每孔200 μL，另外以未添加藥物的RPMI-1640培養(yǎng)基作為空白對(duì)照。繼續(xù)培養(yǎng)24、48、72 h后，加入終質(zhì)量濃度1 g·L-1的MTT溶液100 μL，繼續(xù)培養(yǎng)4 h，棄上清后每孔加入150 μL DMSO，緩搖15 min，酶標(biāo)儀（EL×800型，BioTek公司，美國(guó)）490 nm波長(zhǎng)下檢測(cè)光密度（optical density，OD）值。每孔設(shè)4個(gè)復(fù)孔，取其平均值，重復(fù)3次。按下述公式計(jì)算細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率：細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率=1-（實(shí)驗(yàn)組OD值/對(duì)照組OD值）×100%。用金正均法計(jì)算塞來昔布與長(zhǎng)春新堿兩藥聯(lián)用后的合并效應(yīng)（q值）：q=EA+B /（EA+EB-EA·EB ）。其中EA代

表A藥單獨(dú)給藥時(shí)的效應(yīng)，EB代表B藥單獨(dú)給藥時(shí)的效應(yīng)，EA+B代表A、B兩藥合并給藥后的效應(yīng)，0.85≤q≤1.15為相加作用，q>1.15為協(xié)同作用，q<0.85為拮抗作用。

1.4 Western印跡法檢測(cè)細(xì)胞P-gp、Bcl-2、Bcl-XL

的表達(dá)

將KB/VCR細(xì)胞分別用含10 μmol·L-1塞來昔布（塞來昔布組）、1.5 μmol·L-1長(zhǎng)春新堿（長(zhǎng)春新堿組）、

10 μmol·L-1塞來昔布+1.5 μmol·L-1長(zhǎng)春新堿（塞來昔布+長(zhǎng)春新堿組）及10 μmol·L-1塞來昔布+1.5 μmol·L-1長(zhǎng)春新堿+100 μg·L-1 PGE2（塞來昔布+長(zhǎng)春新堿+

PGE2組）的培養(yǎng)基，于37 ℃、5%CO2條件下培養(yǎng)48 h。然后收集細(xì)胞并用冰PBS液洗滌3次。用含1%Triton X-100的細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞。收取總蛋白，按照常規(guī)的方法進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodium dod-

cyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）、轉(zhuǎn)膜。一抗為鼠抗人P-gp單克隆抗體（1∶

1 000）、鼠抗人Bcl-2單克隆抗體（1∶400）、鼠抗人Bcl-XL單克隆抗體（1∶400）、鼠抗人β-肌動(dòng)蛋白單克隆抗

體（1∶2 000），二抗為熒光標(biāo)記的羊抗鼠抗體（1∶300），進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)，然后進(jìn)行熒光顯色并測(cè)定反應(yīng)條帶灰度值，以β-肌動(dòng)蛋白作為內(nèi)參，計(jì)算相對(duì)灰度值，重復(fù)3次。

收集相同數(shù)量的KB和KB/VCR細(xì)胞，提取總蛋白質(zhì)，按常規(guī)方法進(jìn)行SDS-PAGE、轉(zhuǎn)膜。一抗為鼠抗人P-gp單克隆抗體（1∶1 000）、鼠抗人β-肌動(dòng)蛋白單克隆抗體（1∶2 000），二抗為熒光標(biāo)記的羊抗鼠抗體（1∶300），進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)，然后進(jìn)行熒光顯色并測(cè)定反應(yīng)條帶灰度值，以β-肌動(dòng)蛋白作為內(nèi)參，計(jì)算相對(duì)灰度值，重復(fù)3次。

1.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的KB/VCR細(xì)胞按每毫升1×106個(gè)接種于6孔板中，細(xì)胞貼壁后，分別加入含10 μmol·L-1塞來昔布（塞來昔布組）、1.5 μmol·L-1長(zhǎng)春新堿（長(zhǎng)春新堿組）、10 μmol·L-1塞來昔布+1.5 μmol·L-1長(zhǎng)春新堿（塞來昔布+長(zhǎng)春新堿組）及10 μmol·L-1塞來昔布+1.5 μmol·L-1長(zhǎng)春新堿+100 μg·L-1 PGE2（塞來昔布+

長(zhǎng)春新堿+PGE2組）的培養(yǎng)基10 μmol·L-1，繼續(xù)培養(yǎng)48 h。收集細(xì)胞后加入500 μL結(jié)合緩沖液（Binding Buffer）懸浮細(xì)胞，加入5 μL FITC標(biāo)記的膜聯(lián)蛋白V

熒光探針混勻，再加入5 μL碘化丙啶混勻，室溫下避光反應(yīng)10 min，流式細(xì)胞儀檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，取平均值。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，多樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析，組間多重比較用LSD法，方差不齊用Dunnett法，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 塞來昔布聯(lián)合長(zhǎng)春新堿對(duì)KB/VCR細(xì)胞的生長(zhǎng)

抑制作用

MTT法檢測(cè)結(jié)果表明，作用KB/VCR細(xì)胞24、48、72 h后，塞來昔布+長(zhǎng)春新堿組的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率高于塞來昔布組、長(zhǎng)春新堿組及塞來昔布+長(zhǎng)春新堿+PGE2組（P<0.01）（表1）。塞來昔布與長(zhǎng)春新堿聯(lián)用在24、48、72 h時(shí)的q值分別為1.160、1.282、1.287，均為協(xié)同作用。這表明，塞來昔布聯(lián)合長(zhǎng)春新堿可顯著增強(qiáng)長(zhǎng)春新堿對(duì)KB/VCR的生長(zhǎng)抑制作用。

2.2 P-gp、Bcl-2、Bcl-XL的表達(dá)

Western印跡檢測(cè)結(jié)果表明：1）塞來昔布+長(zhǎng)春新堿組和塞來昔布組P-gp的表達(dá)顯著低于長(zhǎng)春新堿組、對(duì)照組及塞來昔布+長(zhǎng)春新堿+PGE2組，塞來昔布+長(zhǎng)春新堿+PGE2組P-gp的表達(dá)顯著低于長(zhǎng)春新堿組和對(duì)照組（P<0.01）（圖1）；塞來昔布+長(zhǎng)春新堿組、塞來昔布+長(zhǎng)春新堿+PGE2組和塞來昔布組Bcl-2、Bcl-XL的表達(dá)都顯著低于長(zhǎng)春新堿組和對(duì)照組（P<0.01），塞

來昔布+長(zhǎng)春新堿組、塞來昔布+長(zhǎng)春新堿+PGE2組和塞來昔布組之間Bcl-2、Bcl-XL的表達(dá)則無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）（圖2）。2）KB/VCR細(xì)胞P-gp的表達(dá)高于

KB細(xì)胞（P<0.01）（圖3）。

1：對(duì)照組；2：長(zhǎng)春新堿組；3：塞來昔布組；4：塞來昔布+長(zhǎng)春新堿組；5：塞來昔布+長(zhǎng)春新堿+PGE2組。

2.3 塞來昔布對(duì)KB/VCR細(xì)胞凋亡的影響

流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)表明：對(duì)照組、長(zhǎng)春新堿組、塞來昔布組、塞來昔布+長(zhǎng)春新堿組和塞來昔布+長(zhǎng)春新堿+PGE2組的細(xì)胞凋亡率分別為3.84%±1.52%、13.61%±1.45%、24.73%±2.64%、58.07%±5.36%和41.74%±3.17%。塞來昔布+長(zhǎng)春新堿組、塞來昔布+長(zhǎng)春新堿+PGE2組細(xì)胞凋亡率均顯著高于對(duì)照組、長(zhǎng)春新堿組、塞來昔布組（P<0.01）；塞來昔布+長(zhǎng)春新堿+PGE2組細(xì)胞凋亡率顯著低于塞來昔布+長(zhǎng)春新堿組（P<0.01）。

3 討論

化療是口腔癌的重要輔助治療方法之一，但是長(zhǎng)期化療所導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞耐藥性的產(chǎn)生已經(jīng)成為癌癥治療的主要障礙之一。癌細(xì)胞耐藥性的產(chǎn)生可能與外排泵的活性增加、藥物的吸收減少、解毒酶的激活、藥物作用靶點(diǎn)的改變以及細(xì)胞凋亡減少等有關(guān)[10]。

在人惡性腫瘤的研究中發(fā)現(xiàn)，P-gp的表達(dá)水平與腫瘤細(xì)胞對(duì)抗腫瘤藥物的敏感性以及腫瘤患者的生存率成負(fù)相關(guān)。近年來研究發(fā)現(xiàn)，在腫瘤組織內(nèi)COX-2與P-gp的表達(dá)呈顯著性正相關(guān)。Nardone等[11]采用免疫組織化學(xué)方法在幽門螺桿菌陽性的胃癌患者中發(fā)現(xiàn)COX-2與P-gp表達(dá)顯著相關(guān)。Lee等[12]研究發(fā)現(xiàn)犬移行細(xì)胞癌中P-gp與COX-2的表達(dá)成正相關(guān)。Fantappiè等[13]也證實(shí)了COX-2與P-gp的表達(dá)存在相

關(guān)性，在多藥耐藥腫瘤細(xì)胞中兩者的表達(dá)都顯著增加。這些研究均證明，在多藥耐藥腫瘤組織中COX-2與P-gp的表達(dá)都顯著增強(qiáng)。本研究也證實(shí)，耐長(zhǎng)春新堿細(xì)胞株KB/VCR細(xì)胞P-gp的表達(dá)顯著高于非耐藥細(xì)胞株KB細(xì)胞，這表明P-gp表達(dá)量的高低與細(xì)胞敏感性的產(chǎn)生具有正相關(guān)關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步研究能否通過調(diào)控腫瘤組織中COX-2酶的活性進(jìn)而調(diào)控P-gp的表達(dá)，從而影響腫瘤細(xì)胞對(duì)抗腫瘤藥物的敏感性。

本研究證實(shí)，低濃度COX-2抑制劑10 μmol·L-1塞來昔布可明顯增強(qiáng)長(zhǎng)春新堿對(duì)KB/VCR細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用，經(jīng)塞來昔布處理后的KB/VCR細(xì)胞與未經(jīng)塞來昔布處理的相比，P-gp的表達(dá)量明顯降低。這提示COX-2抑制劑塞來昔布對(duì)KB/VCR細(xì)胞P-gp的表達(dá)具有明顯的抑制作用。經(jīng)過加入外源性的PGE2后，P-gp的表達(dá)量增加。因此，塞來昔布能通過抑制P-gp的表達(dá)使細(xì)胞內(nèi)長(zhǎng)春新堿蓄積增多、細(xì)胞內(nèi)藥物濃度增加，進(jìn)而增加長(zhǎng)春新堿對(duì)KB/VCR的細(xì)胞毒性作用，而塞來昔布抑制P-gp表達(dá)的途徑在一定程度上是通過PGE2途徑實(shí)現(xiàn)的。有關(guān)COX-2抑制劑調(diào)節(jié)P-gp表達(dá)的機(jī)制尚需進(jìn)一步的研究。目前認(rèn)為MDR-1基因啟動(dòng)子可能含有激活蛋白1（activator pro-tein-1，AP-1）和核因子κB（nuclear factor κB，NF-κB）結(jié)合位點(diǎn)，這可能與MDR-1基因的表達(dá)有關(guān)。

Tegeder等[14]研究證實(shí)，非類固醇抗炎藥（nonsteroidal anti-inflammatory drags，NSAIDS）如布洛芬可通過

COX-2依賴途徑直接抑制轉(zhuǎn)錄因子AP-1和NF-κB，下調(diào)相關(guān)基因如COX-2或腫瘤壞死因子（tumor ne-

crosis factor，TNF-α）等的表達(dá)來抑制炎癥過程。另外有研究[15]發(fā)現(xiàn)，塞來昔布可以通過抑制轉(zhuǎn)錄因子

AP-1和NF-κB的表達(dá)，從而抑制乳腺癌細(xì)胞P-gp的表達(dá)。

Bcl-2、Bcl-XL是Bcl-2家族中一類抗凋亡的細(xì)胞死亡負(fù)調(diào)節(jié)因子，在細(xì)胞受到外界刺激時(shí)能保護(hù)細(xì)胞免于凋亡[16-17]。Fantappiè等[13]研究證實(shí)，塞來昔布可通過下調(diào)Bcl-2、Bcl-XL的表達(dá)促進(jìn)耐藥肝癌細(xì)胞的凋亡。本研究結(jié)果與之相一致，塞來昔布具有誘導(dǎo)及促進(jìn)長(zhǎng)春新堿誘導(dǎo)KB/VCR細(xì)胞凋亡的作用。塞來昔布聯(lián)合長(zhǎng)春新堿處理細(xì)胞后，KB/VCR細(xì)胞Bcl-2、Bcl-XL的表達(dá)明顯減少。其機(jī)制可能與以下兩方面有關(guān)，一是P-gp表達(dá)的降低導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)長(zhǎng)春新堿的濃度增高，促進(jìn)了長(zhǎng)春新堿對(duì)細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用；二是塞來昔布處理細(xì)胞后抑制了Bcl-2、Bcl-XL的表達(dá)，從而促進(jìn)細(xì)胞的凋亡。但是塞來昔布抑制Bcl-2、Bcl-XL表達(dá)的途徑尚不確定，實(shí)驗(yàn)中加入外源性的PGE2后并不能使Bcl-2、Bcl-XL的表達(dá)增加，因此塞來昔布下調(diào)KB/VCR細(xì)胞Bcl-2、Bcl-XL的表達(dá)可能是通過非PGE2依賴途徑實(shí)現(xiàn)的。

本研究結(jié)果表明，塞來昔布可以增強(qiáng)長(zhǎng)春新堿對(duì)KB/VCR細(xì)胞的毒性作用，這種作用與抑制P-gp的表達(dá)和促進(jìn)細(xì)胞凋亡有關(guān)，為進(jìn)一步理解COX-2在腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性的產(chǎn)生及其COX-2抑制劑增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞化療敏感性的機(jī)制提供幫助。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Yu L， Wu WK， Li ZJ， et al. Enhancement of doxorubicin cytot-

oxicity on human esophageal squamous cell carcinoma cells by in-

domethacin and 4-[5-（4-chlorophenyl）-3-（trifluoromethyl）-1H-

pyrazol-1-yl] benzenesulfonamide（SC236） via inhibiting P-glyco-

protein activity[J]. Mol Pharmacol， 2009， 75（6）：1364-1373.

[2] Kim SH， Kim SH， Song YC， et al. Celecoxib potentiates the an-

ticancer effect of cisplatin on vulvar cancer cells independently of

cyclooxygenase[J]. Ann N Y Acad Sci， 2009， 1171：635-641.

[3] Li WZ， Huo QJ， Wang XY， et al. Inhibitive effect of celecoxib on

the adhesion and invasion of human tongue squamous carcinoma

cells to extracellular matrix via down regulation of MMP-2 ex-

pression[J]. Prostaglandins Other Lipid Mediat， 2010， 93（3/4）：113-

119.

[4] Zrieki A， Farinotti R， Buyse M. Cyclooxygenase-2 inhibitors pre-

vent trinitrobenzene sulfonic acid-induced P-glycoprotein up-re-

gulation in vitro and in vivo[J]. Eur J Pharmacol， 2010， 636（1/

2/3）：189-197.

[5] Zatelli MC， Luchin A， Piccin D， et al. Cyclooxygenase-2 inhibitors

reverse chemoresistance phenotype in medullary thyroid carcinoma

by a permeability glycoprotein-mediated mechanism[J]. J Clin En-

docrinol Metab， 2005， 90（10）：5754-5760.

[6] Raspollini MR， Amunni G， Villanucci A， et al. Increased cyclooxy-

genase-2（COX-2） and P-glycoprotein-170（MDR1） expression is

associated with chemotherapy resistance and poor prognosis. Ana-

lysis in ovarian carcinoma patients with low and high survival[J].

Int J Gynecol Cancer， 2005， 15（2）：255-260.

[7] Li WZ， Wang XY， Li ZG， et al. Celecoxib enhances the inhibi-

tory effect of cisplatin on Tca8113 cells in human tongue squa-

mous cell carcinoma in vivo and in vitro[J]. J Oral Pathol Med，

2010， 39（7）：579-584.

[8] 李偉忠， 王曉燕， 李祖國(guó)， 等. 塞來昔布聯(lián)合順鉑對(duì)人舌癌Tca8113

細(xì)胞移植瘤的生長(zhǎng)抑制作用[J]. 中華腫瘤防治雜志， 2010， 17（8）：

579-583.

Li Weizhong， Wang Xiaoyan， Li Zuguo， et al. Inhibitory effect of

celecoxib combined with cisplatin on xenografts of Tca8113 cells

in vivo[J]. Chin J Cancer Prevention Treatment， 2010， 17（8）：579-

583.

[9] Yan YX， Li WZ， Huang YQ， et al. The COX-2 inhibitor Cele-

coxib enhances the sensitivity of KB/VCR oral cancer cell lines

to Vincristine by down-regulating P-glycoprotein expression and

function[J]. Prostaglandins Other Lipid Mediat， 2012， 97（1/2）：29-

35.

[10] Shain KH， Dalton WS. Cell adhesion is a key determinant in de

novo multidrug resistance（MDR）： New targets for the prevention

of acquired MDR[J]. Mol Cancer Ther， 2001， 1（1）：69-78.

[11] Nardone G， Rocco A， Vaira D， et al. Expression of COX-2， mPGE-

synthase1， MDR-1（P-gp）， and Bcl-xL： A molecular pathway of

H pylori-related gastric carcinogenesis[J]. J Pathol， 2004， 202（3）：

305-312.

[12] Lee JY， Tanabe S， Shimohira H， et al. Expression of cyclooxyge-

nase-2， P-glycoprotein and multi-drug resistance-associated pro-

tein in canine transitional cell carcinoma[J]. Res Vet Sci， 2007，

83（2）：210-216.

[13] Fantappiè O， Solazzo M， Lasagna N， et al. P-glycoprotein me-

diates celecoxib-induced apoptosis in multiple drug-resistant cell

lines[J]. Cancer Res， 2007， 67（10）：4915-4923.

[14] Tegeder I， Pfeilschifter J， Geisslinger G. Cyclooxygenase-indepen-

dent actions of cyclooxygenase inhibitors[J]. FASEB J， 2001， 15

（12）：2057-2072.

[15] Chen C， Shen HL， Yang J， et al. Preventing chemoresistance of

human breast cancer cell line， MCF-7 with celecoxib[J]. J Cancer

Res Clin Oncol， 2011， 137（1）：9-17.

[16] Krishna S， Low IC， Pervaiz S. Regulation of mitochondrial meta-

bolism： Yet another facet in the biology of the oncoprotein Bcl-2

[J]. Biochem J， 2011， 435（3）：545-551.

[17] Zhou F， Yang Y， Xing D. Bcl-2 and Bcl-XL play important roles

in the crosstalk between autophagy and apoptosis[J]. FEBS J， 2011，

278（3）：403-413.

（本文編輯 李彩）