黃際薇 麥海燕 江先合

·論著·

崗梅感冒靈顆粒薄層色譜鑒別方法的研究

黃際薇 麥海燕 江先合

目的 建立崗梅感冒靈顆粒的薄層色譜鑒別方法。方法 采用薄層色譜法對崗梅感冒靈顆粒中崗梅、野菊花、板藍(lán)根進(jìn)行了鑒別。結(jié)果 圖譜斑點清晰、分離度好，陰性對照無干擾。結(jié)論 該方法簡便、快速、重現(xiàn)性好，為制訂崗梅感冒靈顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了參考。

崗梅感冒靈顆粒；薄層色譜法；崗梅；野菊花；板藍(lán)根

崗梅感冒靈顆粒是由崗梅、野菊花、板藍(lán)根等六味藥材經(jīng)水提醇沉而制成的復(fù)方中藥制劑，具有清熱解毒、疏風(fēng)降火的功效，臨床上主要用于感冒及上呼吸道感染。崗梅根含三萜皂苷、內(nèi)酯(或香豆精)、少量生物堿[1-4]。野菊花含有野菊花內(nèi)酯、矢車菊苷、野菊花三醇、野菊花酮、蘇格蘭蒿素A、艾尼羅依萊肩定素、野菊花醇等，尚含刺槐素、木犀草素、木犀草素-7-葡萄糖苷、刺槐素-7-O-β-D-吡喃半乳糖苷、刺槐素-7-鼠李糖-葡萄糖苷、蒙花苷等[5]。板藍(lán)根含靛苷、β-谷甾醇、靛紅、板藍(lán)根結(jié)晶乙、板藍(lán)根結(jié)晶丙、板藍(lán)根結(jié)晶丁、氨基酸有精氨酸、脯氨酸、谷氨酸、酪氨酸、γ-氨基丁酸、纈氨酸和亮氨酸、芥子苷[6,7]。游離氨基酸的總量為生藥量的8.749%，水解氨基酸的總量為13.292%，精氨酸的含量高達(dá)5.5%以上，從整體上看，氨基酸可能是板藍(lán)根中的一個主要有效成分[5]。本研究采用薄層色譜鑒別方法對崗梅感冒靈顆粒中崗梅、野菊花、板藍(lán)根進(jìn)行定性鑒別，為制訂崗梅感冒靈顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 電子分析天平(瑞士Precisa)；CQ-10超聲波清洗器(功率：150W，廣州經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)明珠電器有限公司)；三用紫外儀(ZF-2型，上海市安亭電子儀器廠)；電熱恒溫水浴鍋(H·S·G·IB2，寧波自動化儀表廠)；理化干燥箱(LG050B，上海市實驗儀器總廠)；2 μl、3 μl、5 μl定量毛細(xì)管(廣州市藥品檢驗所提供)；硅膠G板(青島譜科分離材料有限公司)；聚酰胺薄膜(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；95%乙醇、正丁醇、冰醋酸、茚三酮、甲醇、乙酸乙酯、丁酮、三氯甲烷、甲酸、三氯化鋁、無水乙醇、甲苯為分析純，水為純凈水。

1.2 材料 崗梅對照藥材(批號：121152-201103)、野菊花對照藥材(批號：120995-201105)、板藍(lán)根對照藥材(批號：121177-201105)，蒙花苷對照品(批號：111528-201107)、精氨酸對照品(批號：872-200204)，均購自中國藥品生物制品檢定所；崗梅藥材(廣西，批號：20121120)、崗梅藥材(廣東，批號：20121103)野菊花藥材(批號：20121125)、板藍(lán)根藥材(批號：20121105)，為巿售藥品，均購自廣州市藥材公司，是用于制備崗梅感冒靈顆粒的原料，崗梅感冒靈顆粒樣品由本院制劑室提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 崗梅的薄層色譜鑒別[8]

2.1.1 崗梅感冒靈顆粒供試品溶液的制備 稱取崗梅感冒靈顆粒7.5 g，加水30 ml水浴加熱回流提取2 h，過濾，濾液加乙酸乙酯萃取2次，25 ml/次，合并乙酸乙酯液，置水浴上濃縮至1 ml，作為崗梅感冒靈顆粒供試品溶液。

2.1.2 崗梅對照藥材溶液的制備 稱取崗梅對照藥材5 g，加水30 ml水浴加熱回流提取2 h，過濾，濾液加乙酸乙酯萃取2次，每次25 ml，合并乙酸乙酯液，置水浴上濃縮至1 ml，作為崗梅對照藥材溶液。

2.1.3 缺崗梅陰性對照溶液的制備 按處方工藝制備缺崗梅的陰性制劑，按2.1.1項下供試品溶液制備方法制得缺崗梅陰性對照溶液。

2.1.4 薄層鑒別 用5 μl定量毛細(xì)管分別吸取崗梅感冒靈顆粒供試品溶液、崗梅對照藥材溶液、崗梅陰性對照溶液各10 μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(10 ∶ 3 ∶ 1)為展開劑，展開，取出，晾干，濃氨溶液熏蒸后置紫外光燈(365nm)下檢視。結(jié)果，色譜圖中，供試品在與崗梅對照藥材相應(yīng)位置上顯示出相同藍(lán)色的斑點，缺崗梅的陰性對照溶液無干擾，崗梅藥材(廣西)為制劑原藥材。色譜圖見圖1所示。

圖1 崗梅薄層色譜鑒別圖譜

1.崗梅感冒靈顆粒；2.崗梅對照藥材；3.崗梅藥材(廣西)；4.崗梅藥材(廣東)；5.崗梅陰性對照

2.2 野菊花的薄層色譜鑒別[9]

2.2.1 崗梅感冒靈顆粒供試品溶液的制備 取崗梅感冒靈顆粒研缽研細(xì)，稱取粉末1.2 g，加甲醇20 ml，超聲處理30 min，放冷，濾紙過濾，取濾液作為供試品溶液。

2.2.2 野菊花對照藥材溶液的制備 稱取野菊花對照藥材0.3 g，加甲醇20 ml，超聲處理30 min，放冷，濾紙過濾，取濾液作為野菊花對照材溶液。

2.2.3 蒙花苷對照品溶液的制備 稱取蒙花苷對照品，加甲醇制成每1 ml含0.2 mg的溶液，作為蒙花苷對照品溶液。

2.2.4 缺野菊花陰性對照溶液的制備 按處方工藝制備缺野菊花的陰性制劑，按2.1.1項下供試品溶液制備方法制得缺野菊花陰性對照溶液。

2.2.5 薄層鑒別 用3 μl定量毛細(xì)管吸取崗梅感冒靈顆粒供試品溶液、野菊花對照藥材溶液、蒙花苷對照品溶液、缺野菊花陰性對照溶液各3 μl，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以乙酸乙酯-丁酮-三氯甲烷-甲酸-水(15 ∶ 15 ∶ 6 ∶ 4 ∶ 1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%三氯化鋁溶液，熱風(fēng)吹干，置紫外光燈(365nm)下檢視。結(jié)果，色譜圖中，供試品與野菊花對照藥材和蒙花苷對照品相應(yīng)的位置上，顯示出相同黃色的熒光斑點，缺野菊花的陰性對照無干擾。色譜圖見圖2所示。

圖2 野菊花薄層鑒別圖譜1.蒙花苷對照品；2.野菊花對照藥材；3.野菊花藥材；4.野菊花陰性對照；5-7崗梅感冒靈顆粒

2.3 板藍(lán)根的薄層色譜鑒別[9]

2.3.1 崗梅感冒靈顆粒供試品溶液的制備 取崗梅感冒靈顆粒研缽研細(xì)，稱取粉末3 g，加稀乙醇20 ml，超聲處理20 min，濾紙過濾，濾液蒸干，殘渣加稀乙醇2 ml使溶解，即得供試品溶液。

2.3.2 板藍(lán)根對照藥材溶液的制備 稱取板藍(lán)根對照藥材1 g，加稀乙醇20 ml，超聲處理20 min，濾紙過濾，濾液蒸干，殘渣加稀乙醇2 ml使溶解，即得板藍(lán)根對照藥材溶液。

2.3.3 精氨酸對照品溶液的制備 稱取精氨酸對照品，加稀乙醇制成每1 ml含0.5 mg的溶液，即得精氨酸對照品溶液。

2.3.4 缺板藍(lán)根陰性樣品溶液的制備 按處方工藝制備缺板藍(lán)根供試品，按2.3.1項下供試品溶液制備方法制得缺板藍(lán)根陰性樣品溶液。

2.3.5 薄層鑒別 用2 μl定量毛細(xì)管吸取崗梅感冒靈顆粒供試品溶液、板藍(lán)根對照藥材溶液、精氨酸對照品溶液、缺板藍(lán)根陰性樣品溶液各2 μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(19 ∶ 5 ∶ 5)為展開劑，展開，取出，熱風(fēng)吹干，噴以2%茚三酮試液，105℃加熱至斑點顯色清晰。結(jié)果，色譜圖中，供試品在與板藍(lán)根對照藥材和精氨酸對照品相應(yīng)的位置上，顯示出相同紫色的斑點，缺板藍(lán)根的陰性對照無干擾。色譜圖見圖3所示。

圖3 板藍(lán)根薄層色譜鑒別圖譜

1.精氨酸對照品；2.板藍(lán)根對照藥材；3.板藍(lán)根藥材；4.板藍(lán)根陰性對照；5-8崗梅感冒靈顆粒

3 討論

3.1 本實驗嘗試對崗梅感冒靈顆粒中野菊花、板藍(lán)根和崗梅三味藥進(jìn)行薄層色譜法定性鑒別研究，結(jié)果顯示圖譜中主斑點清晰、陰性對照無干擾，方法簡單易行，重現(xiàn)性高，能夠達(dá)到鑒別目的，可用于崗梅感冒靈顆粒的質(zhì)量控制。

3.2 在野菊花TLC鑒別實驗中，曾嘗試采用硅膠G薄層板，分別以氯仿-甲醇(5 ∶ 2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外光燈(365nm)下檢視，結(jié)果蒙花苷對照品斑點無法顯現(xiàn)。

3.3 中藥復(fù)方中，每種生藥都含有多種化學(xué)成分，臨床共煎過程中，可能產(chǎn)生揮發(fā)、分解、助溶、吸附、水解、取代、中和、沉淀等一系列十分復(fù)雜的化學(xué)物理變化，這些變化直接影響到制劑的療效和毒副作用[10]。本實驗僅對崗梅感冒靈顆粒中的崗梅、野菊花和板藍(lán)根進(jìn)行薄層色譜法定性鑒別，各斑點具體代表什么成分有待進(jìn)一步深入研究。

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Study on the thin layer chromatography of gangmei ganmaoling granules

HUANGJi-wei，MAIHaiyan，JIANGXian-he.

TheThirdAffiliatedHospitalofSunYat-senUniversity，Guangzhou510630，China

Objective To establish a method for the thin layer chromatography(TLC) of Gangmei Ganmaoling granules. Methods The thin layer chromatography(TLC) was used to identify Radix Et Caulis Ilicis Asprellae,Flos Chrysanthemi Indici,Radix Isatidis in Gangmei Ganmaoling granules. Results The TLC figures of Radix Et Caulis Ilicis Asprellae,Flos Chrysanthemi Indici,Radix Isatidis were distinct with good resolution and no disturbance negative group. Conclusion The method is simple,rapid,reproducible, and provides reference for the formulation of gangmeiganmailing quality standard.

Gangmei Ganmaoling granule；Thin layer chromatography(TLC)；Radix Et Caulis Ilicis Asprellae；Flos Chrysanthemi Indici；Radix Isatidis

廣州巿計劃項目科技攻關(guān)專項(項目編號：2012J4300071)

510630廣州，中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院