陳繁華， 曾玉梅， 姚海燕

(梅州市食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)所，廣東梅州514071)

八寶驚風(fēng)散質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第二十冊，由天麻、防風(fēng)、金礞石、黃芩、龍齒等十余味中藥組成，具有祛風(fēng)化痰，退熱鎮(zhèn)驚的功效［1］，在兒科臨床上使用甚廣。中藥作為天然藥物，因毒副作用小、療效好、使用安全而受到人們的青睞，并越來越被國際社會所接受［2］。人們服用中藥治療的現(xiàn)象與日俱增，同時對中藥的不良反應(yīng)也日益關(guān)注。重金屬量超標(biāo)是造成中藥不良反應(yīng)中最突出的問題之一，已嚴(yán)重影響到中藥的聲譽(yù)及出口［3］。其中尤以鉛、鎘超標(biāo)最為普遍［4］。葉國華等［5］以西南地區(qū)多個GAP種植基地的20多種中藥材為研究對象，對其所含鉛、鎘、銅等重金屬進(jìn)行了測定分析，結(jié)果表明:鎘和銅的超標(biāo)情況最嚴(yán)重，分別為63.2%和30.2%，鉛超標(biāo)的情況較好，為1.19%。

經(jīng)查閱，鉛、鎘對人體的影響是全身性、多系統(tǒng)的，長期接觸低濃度的鉛、鎘會導(dǎo)致免疫、生殖、神經(jīng)等系統(tǒng)的損害［6］?？紤]到八寶驚風(fēng)散中含有多種礦物類藥直接粉碎入藥，重金屬元素富集的可能性較高，本實(shí)驗(yàn)參考《中國藥典》規(guī)定方法［7］測定其中重金屬元素污染概率較高的鉛、鎘和銅的量，為制訂合理安全的限度范圍提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器和試藥

1.1 儀器 AA—7000/GFA—7000原子吸收分光光度計 (日本SHIMADZU公司);Mars 6微波消解儀 (美國CEM公司);Sartorius BP 211D電子分析天平 (德國Sartorius公司)。

1.2 試藥 八寶驚風(fēng)散 (規(guī)格:每瓶裝0.26 g)由廣東聯(lián)康藥業(yè)有限公司生產(chǎn)提供。鉛、鎘、銅單元素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)均由中國計量科學(xué)研究院提供(質(zhì)量濃度:1 000μg/mL);硝酸為優(yōu)級純;其他試劑均為分析純;水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 測定參數(shù) 以石墨爐法測定鉛和鎘的量:以氬氣為載氣，氘燈扣背景，以峰高值測量，進(jìn)樣體積為10μL。以火焰原子吸收法測定銅的量。相關(guān)儀器工作參數(shù)見表1，石墨爐法升溫程序見表2。

表1 測定參數(shù)Tab.1 Working conditions of the instrument

表2 石墨爐法升溫程序Tab.2 Program of temperature elevation of the grahite furnace

2.2 樣品消解方法 取供試品10瓶，混勻，稱取0.2 g，精密稱定，置聚四氟乙烯消解罐中，加硝酸5 mL，混勻，浸泡過夜，蓋好內(nèi)蓋，旋緊罐蓋，置微波消解儀中消解。消解完全后，取消解內(nèi)罐置電熱板上緩緩加熱至紅棕色蒸氣揮盡，并繼續(xù)緩緩濃縮至2～3 mL，放冷，用水轉(zhuǎn)入25 mL量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。同法同時制備試劑空白溶液。

2.3 線性關(guān)系考察

2.3.1 Pb線性關(guān)系考察 取1 000μg/mL的Pb標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2%硝酸溶液稀釋至80 ng/mL的溶液。精密吸取上述溶液2 mL，精密加含1%磷酸二氫銨和0.2%硝酸鎂的溶液1 mL，混勻，置儀器上自動稀釋為 0.00、16.00、32.00、48.00、64.00、80.00 ng/mL作為標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，注入石墨爐原子化器，測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程Y=0.006 560 6X+0.008 963 5(r=0.999 5)。供試品質(zhì)量濃度在0～80.0 ng/mL范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

2.3.2 Cd線性關(guān)系考察 取1 000μg/mL的Cd標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2%硝酸溶液稀釋至8.0 ng/mL的溶液，置儀器上自動稀釋為0、1.6、3.2、4.8、6.4、8.0 ng/mL作為標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，注入石墨爐原子化器，測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程Y=0.061 288X－0.008 247(r=0.999 3)。供試品質(zhì)量濃度在0～8.0 ng/mL范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

2.3.3 Cu線性關(guān)系考察 取1 000μg/mL的Cu標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2%硝酸溶液分別稀釋為0、0.05、0.2、0.4、0.6、0.8μg/mL作為標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，依次噴入火焰，測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程 Y=0.088 433X+0.001 502(r=0.999 7)。供試品質(zhì)量濃度在0～0.8μg/mL范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

2.4 加樣回收率試驗(yàn) 批號為1104004的供試品減半取樣，精密加入相當(dāng)于等量待測元素的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按2.2項(xiàng)樣品消解方法進(jìn)行消解，測定，結(jié)果見表3。

表3 回收率測定結(jié)果 (n=6)Tab.3 Results of recovery tests(n=6)

根據(jù)《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》［8］的規(guī)定 (鉛≤5.0 mg/g，鎘≤0.3 mg/g，銅≤20 mg/g)進(jìn)行評價，表明樣品中鉛、鎘、銅量符合規(guī)定。

2.5 重復(fù)性考察 取同一批樣品 (1104004)6份，按樣品測定項(xiàng)下方法進(jìn)行消解、測定。6份測定的結(jié)果，Pb平均值為4.5μg/g，RSD為2.3%;Cd平均值為0.2μg/g，RSD為1.7%;Cu平均值為16.1μg/g，RSD為1.2%。

2.6 檢出限考察 將儀器設(shè)備調(diào)節(jié)至最佳狀態(tài)，對空白溶液平行測定10次，以空白溶液測定值的3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差除以標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率計算檢出限。鉛、鎘、銅3種元素的檢出限分別為0.49 ng/mL、0.025 ng/mL、7.19 ng/mL。

2.7 樣品測定 稱取供試品適量，按上述方法消解后進(jìn)行測定。結(jié)果見表4。

表4 樣品測定結(jié)果Tab.4 Determination results of samples

3． 討論

目前，實(shí)驗(yàn)室常用的消解方法主要有濕法、干法和微波消解法。濕法操作簡單、對設(shè)備要求低，但缺點(diǎn)是耗時長、用酸量大。干法雖然也操作簡單，對設(shè)備要求低但高溫下砷、鉛等一些熱穩(wěn)定性差的元素容易揮發(fā)損失，導(dǎo)致結(jié)果偏低。微波消解技術(shù)因?yàn)槠浼訜峋鶆?、消解效率高、使用試劑量少、環(huán)保等優(yōu)勢，近年來被大量應(yīng)用于食品、藥品、化妝品等行業(yè)的消解過程中［9］。本實(shí)驗(yàn)采用微波消解技術(shù)對組成復(fù)雜的中成藥八寶驚風(fēng)散進(jìn)行前處理，曾經(jīng)參考《中國藥典》取用0.5 g樣品消解，結(jié)果發(fā)現(xiàn)用5 mL硝酸仍不能消解完全。經(jīng)過試驗(yàn)，取用0.2 g樣品消解結(jié)果空白值低、重復(fù)性好，能滿足靈敏度的要求。

中藥及其制劑中測定微量重金屬元素的方法主要有原子吸收光譜法 (AAS)、電感耦合等離子體質(zhì)譜法 (ICP-MS)、原子發(fā)射光譜法 (AES)、X-射線分析法等［10-11］。由于原子吸收光譜法具有較強(qiáng)的選擇性、較高的靈敏度、分析范圍較廣、很強(qiáng)的抗干擾能力等，使其在中藥重金屬微量元素的形態(tài)分析中，充當(dāng)著極其重要的角色，其應(yīng)用越來越廣泛［12］。本實(shí)驗(yàn)采用原子吸收光譜法測定，結(jié)果鉛、鎘、銅元素的質(zhì)量濃度與吸光度呈良好的線性關(guān)系，各元素的回收率在92.7% ～110.0%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD在1.4%～3.8%，可以滿足定量分析的要求。

本實(shí)驗(yàn)方法簡便，準(zhǔn)確，專屬性強(qiáng)，可用于該制劑的質(zhì)量控制。

［1］衛(wèi)生部藥典委員會．中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第二十冊［S］．1998:7．

［2］汪學(xué)英，殷曉?。⒉ㄏ鈽悠?石墨爐原子吸收光譜法測定雙黃連口服液及其藥材中重金屬元素［J］．理化檢驗(yàn):化學(xué)分冊，2012，48(1):87．

［3］王 剛，陳榮達(dá)，林炳承．中藥中微量元素測定的研究進(jìn)展［J］．藥物分析雜志，2002，22(2):151．

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［6］韓 磊，張恒東．鉛、鎘的毒性及危害［J］．職業(yè)衛(wèi)生與病傷，2009，24(3):173-177．

［7］國家藥典委員會．中華人民共和國藥典:2010年版一部［S］．北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:附錄48．

［8］國家對外貿(mào)易經(jīng)濟(jì)合作部．藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)［S］．WM2-2001．

［9］賈 薇．中藥材中重金屬的分析方法及其吸收富集特征研究［D］．廣州:廣州中醫(yī)藥大學(xué)，2009:40．

［10］Viitak A，Volynsky A B．Simple procedure for the determination of Cd，Pb，As and Se in biological samples by electrothermal atomic absorption spectrometry using colloidal Pd modifier［J］．Talanta，2006，70(4):890．

［11］Switzer J A，Rajasekharan V V，Boonsalee S，et al．Evidence that monochloramine disinfectant could lead to elevated Pb levels in drinking dater［J］．Environ Sci Technol，2006，40(10):3384．

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