中國(guó)牧工商(集團(tuán))總公司 齊 巖
17℃保存,每天混勻兩次,保存2~3天。
需準(zhǔn)備:雙蒸水(D.D.W.)、量筒、燒杯、磁力攪拌器、攪拌棒。
2.1.1 提前用量筒測(cè)量1升的雙蒸水,注入燒杯。開始溶解前的雙蒸水的溫度是35℃~37℃左右。
2.1.2 一邊將稀釋粉緩慢地倒入,一邊輕輕用攪拌器攪拌。為了避免包裝上附著的垃圾混入,提前擦干凈包裝。
2.1.3 用攪拌器輕輕攪拌,直到完全溶解。溶解以后,測(cè)定稀釋液的PH值,確認(rèn)在6.6~7.0的范圍內(nèi)。如果溶解后的稀釋液在溶解當(dāng)日不使用的話,要放在冰箱里保存。
需準(zhǔn)備:稀釋液、自動(dòng)分注器、一次性吸管、量筒、燒杯、熱水池、精液瓶。
2.2.1 加熱稀釋液,使其與精液溫度相同,實(shí)驗(yàn)室的室溫保持在25℃。
2.2.2 計(jì)數(shù)原精液的濃度,計(jì)算稀釋比例。
2.2.3 按稀釋比例,將稀釋液緩慢、分次倒入原精液中。
由于精子非常敏感,所以操作時(shí)一定要注意:
不要給稀釋中的精子帶來溫度刺激;不要使用過冷、過熱的容器;稀釋容器最好放在發(fā)泡容器的蓋子上。
2.2.4 輕輕加入與原精液等量的稀釋液,慢慢地進(jìn)行混合。
2.2.5 再加入與混合后的等量的稀釋液,慢慢地進(jìn)行混合。
2.2.6 反復(fù)操作至目標(biāo)的量為止。
注意:精液不要直接放置在冰冷的桌面上;對(duì)于稀釋精液來說,原精液的比率過大,可能會(huì)造成稀釋液的性能降低;避免原精液量的比率占總量的20%以上。
2.3.1 避免冷氣直接接觸到精子瓶。
2.3.2 如果沒有放在泡沫容器中而直接放在冰箱里,精液的溫度會(huì)急劇下降。
2.3.3 豬精液對(duì)溫度沖擊比較弱,如發(fā)生急劇的溫度下降,精子的存活率和活力都會(huì)降低。
2.3.4 保存精液時(shí),請(qǐng)一定將精液瓶放在泡沫箱中。
2.4.1 輕輕地將精液瓶反轉(zhuǎn)混合。
2.4.2 精子瓶打開之后,用移液器取1毫升的稀釋精液至EP管中。
2.4.3 活力判定之前,在35℃~37℃的熱水鍋里最少加熱10分鐘。
注意:如加熱不夠的話,也許無法正確的判定;檢測(cè)使用的載玻片需要預(yù)熱。