■周孟清 張慧茹 賈 峰 趙銀麗 黃 進(jìn) 齊仁立 羅 宇

（1.河南工業(yè)大學(xué)生物工程學(xué)院，河南鄭州，450001；2.重慶市畜牧科學(xué)院動物營養(yǎng)研究所，重慶，402460）

黃芪（Astragalus）為豆科多年生草本植物，性味甘、性溫，歸脾、肺經(jīng),中醫(yī)古籍大多把它歸為補(bǔ)氣藥,具有補(bǔ)氣升陽、益衛(wèi)固表、利水消腫、托瘡生肌之功效。藥用黃芪有兩種：蒙古黃芪和膜莢黃芪，主要化學(xué)成分有多糖類、皂苷類、黃酮類物質(zhì)及22種氨基酸和14種微量元素，其他成分包括香豆素、苦味素、膽堿、甜菜堿、亞油酸、B-谷甾醇,以及維生素A、E、B1、B2和葉酸等營養(yǎng)物質(zhì)，其中黃芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)是主要生物活性成分，機(jī)體免疫調(diào)節(jié)方面和抗腫瘤方面也具有重要的作用[1]。

板藍(lán)根（radix isatidis）是我國的傳統(tǒng)中藥,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，為常用中藥材，具有味苦、性寒、歸心等性質(zhì)。板藍(lán)根分為兩種：一種為十字花科植物菘藍(lán)的根，在北方得到廣泛使用，習(xí)稱“北板藍(lán)”。另一種為爵床科植物馬藍(lán)的根，在華南地區(qū)及西南大部分地區(qū)得到廣泛使用，習(xí)稱“南板藍(lán)”。板藍(lán)根具有較強(qiáng)的抗病毒、抗菌消炎、免疫調(diào)節(jié)、抗內(nèi)毒素、抗癌等作用。板藍(lán)根的主要有效成分有：板藍(lán)根多糖(radix isatidis polysaccharide,RIPS)、靛玉紅、靛藍(lán)等。

黃芪和板藍(lán)根多糖成分對家禽養(yǎng)殖中常見的細(xì)菌和病毒是否具有直接的抑殺作用還未見報(bào)道，本試驗(yàn)對這兩種活性成分直接的抗菌抗病毒能力進(jìn)行比較，并通過動物試驗(yàn)研究其對雞免疫系統(tǒng)的具體影響，以利于黃芪和板藍(lán)根多糖類中草藥添加劑的開發(fā)和應(yīng)用。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

菌種：雞大腸桿菌和沙門氏菌由本實(shí)驗(yàn)室制備保存。新城疫Ⅰ系強(qiáng)毒苗，新城疫Ⅳ系弱毒Lasta疫苗：購于乾元浩生物股份有限公司鄭州生物制藥廠。采用酶法[2]提取制備黃芪多糖，用水解醇沉法[3]制備板藍(lán)根多糖，兩者純度分別為69.0%和75.5%。SPF受精蛋，購于乾元浩生物股份有限公司，其它試劑均為國產(chǎn)分析純級。0.5%雞紅細(xì)胞自配。SPF雛雞，96孔反應(yīng)板。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 體外抑菌試驗(yàn)

取內(nèi)徑90 mm的培養(yǎng)皿高壓滅菌30 min，在超凈操作臺上將培養(yǎng)皿依次標(biāo)號，倒入滅菌的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，放置使其冷卻凝固。待培養(yǎng)基表面干燥后，用涂布玻璃棒粘取一滴菌懸液（大腸桿菌或沙門氏菌），均勻涂布在培養(yǎng)基表面。然后用打孔器（內(nèi)徑4 mm）在培養(yǎng)基上打4個(gè)小孔，酒精燈上短暫烘烤使培養(yǎng)基底部輕微融化封上孔底，然后向孔內(nèi)注0.025 ml藥液（指黃芪或板藍(lán)根多糖，濃度0.5 mg/ml或1 mg/ml）。把培養(yǎng)皿放入生化培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)18 h后測量培養(yǎng)基上抑菌圈的大小。

1.2.2 雞胚法抗病毒試驗(yàn)

黃芪多糖（含量60%）、板藍(lán)根多糖（含量45%），分別用滅菌后的生理鹽水配成100、500、1 000 μg/ml 3個(gè)濃度的溶液，高壓滅菌后備用。

選擇尿囊液豐富的9～11日齡健康SPF受精雞胚，37℃、50%濕度條件下孵育，每2 h翻蛋1次。依照藥物不同作用模式，試驗(yàn)分為預(yù)防，治療和直接反應(yīng)3種。

預(yù)防試驗(yàn)，即先用藥后接新城疫病毒。治療試驗(yàn)，即先接毒后用藥。直接作用試驗(yàn)，即將藥液和病毒混合后接種。用注射器取0.1 ml藥物溶液接種于雞胚內(nèi)37℃作用2 h，然后接種0.1 ml病毒液繼續(xù)孵育72 h。收集24 h后全部雞胚的尿囊液，進(jìn)行血凝試驗(yàn)測定病毒的效價(jià)。新城疫病毒效價(jià)測定——采用血凝試驗(yàn)。

1.2.3 雞群攻毒保護(hù)法抗病毒試驗(yàn)

按照預(yù)防和治療的不同處理方法，把雞分為兩個(gè)處理，同時(shí)設(shè)立免疫對照和非免疫對照（見表1），這樣既能檢測藥物對疫苗作用的影響，又能研究藥物對染毒后的雞的作用。

表1 攻毒試驗(yàn)分組設(shè)計(jì)（黃芪多糖和板藍(lán)根多糖濃度為1 mg/ml）

200只1日齡羅曼蛋公雞預(yù)飼，3日齡用新城疫Ⅳ系苗對雞群進(jìn)行免疫（預(yù)留50只不免疫，做對照組），13日齡進(jìn)行二次免疫，18日齡分組。選取120只健康雞,按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)隨機(jī)分為6組,每組20只雞。

分組當(dāng)天對各預(yù)防組開始給藥，采用飲水方式每天每組給藥即黃芪多糖和板藍(lán)根多糖300 ml，濃度為1 mg/ml，飲完為止。給藥后第7 d進(jìn)行Ⅰ系強(qiáng)毒苗攻毒，通過噴霧加飲水方式攻毒，確保雞的致病量。攻毒12 h后開始給治療組喂藥，同樣是每天濃度為1 mg/ml的藥液300 ml，預(yù)防組則繼續(xù)給藥。攻毒后記錄雞的發(fā)病和死亡情況,對于死亡的病雞及時(shí)剖檢，觀察病變情況。

攻毒后第1、3、5日每組隨機(jī)選取3只雞抽血，檢測新城疫抗體。免疫對照組和未免疫對照組在整個(gè)試驗(yàn)過程中不給藥。

1.2.4 動物飼養(yǎng)試驗(yàn)

為研究黃芪多糖和板藍(lán)根多糖對雞的生長性能和免疫功能的影響，試驗(yàn)中把雞分為免疫處理和未免疫處理。同時(shí)在免疫處理的基礎(chǔ)上部分給藥，處理1：黃芪多糖組，按1 mg/ml濃度，飲水飼喂，進(jìn)行新城疫疫苗免疫。處理2：板藍(lán)根多糖組，按1 mg/ml濃度，飲水飼喂，進(jìn)行新城疫疫苗免疫。處理3：免疫對照組，進(jìn)行新城疫疫苗免疫，但不給藥。處理4：基礎(chǔ)對照組，不免疫，不給藥。

取200只1日齡羅曼蛋公雞預(yù)飼。3日齡用新城疫Ⅳ系苗對雞進(jìn)行免疫。12日齡時(shí)對雞進(jìn)行分組。取120只健康雞,隨機(jī)分為4個(gè)處理,每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只雞。分組當(dāng)天開始給藥。早上先斷水2 h，然后通過飲水喂黃芪多糖、板藍(lán)根多糖（溫水助溶，藥物濃度1 mg/ml），每天每個(gè)處理給藥300 ml，飲完為止。分組后第0、5、10、15 d，分別對雞稱重一次，計(jì)算日增重。然后每個(gè)組隨機(jī)抽取3只雞心臟取血，測定新城疫抗體水平。試驗(yàn)第20 d時(shí)每個(gè)組取5只雞采血后處死，摘取脾臟，法氏囊，胸腺稱重，計(jì)算免疫器官指數(shù)。

試驗(yàn)日糧主要由玉米，豆粕，魚粉，次粉，石粉，碳酸氫鈣和預(yù)混料組成。粗蛋白≥16%、粗纖維≤6%、粗灰分≤10%、Ca 0.8%～1.3%、P≥0.55%、食鹽0.3%～0.8%、蛋氨酸≥0.28%、水分≤14%。

免疫器官指數(shù)：32日齡時(shí)每組取8只雞采血后處死，摘取脾臟，法氏囊，胸腺稱重，計(jì)算免疫器官指數(shù)。免疫器官指數(shù)=免疫器官重量/雞體重。新城疫抗體水平測定用微量血凝抑制法（HI），T細(xì)胞轉(zhuǎn)化率：采用ANAE法測定T-淋巴細(xì)胞比率。肥大細(xì)胞計(jì)數(shù)：參考Ginsburg等[4]的方法進(jìn)行。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)結(jié)果用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差,或平均數(shù)”表示。數(shù)據(jù)采用SPSS18.0軟件進(jìn)行單因素方差分析和T檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異顯著；P＜0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 兩種多糖成分抑菌能力的比較

采用兩種有效成分進(jìn)行體外抑菌試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果見表2。

表2 兩種多糖成分對大腸桿菌和沙門氏菌的抑制效果

通過表2結(jié)果可以看出，0.5 mg/ml和1.0 mg/ml兩種濃度的黃芪多糖對大腸桿菌和沙門氏菌均沒有直接的抑制能力。板藍(lán)根多糖在低濃度（0.5 mg/ml）時(shí)沒有明顯的抑菌能力，在高濃度（1.0 mg/ml）時(shí)則較弱的抑菌能力，對兩種菌的抑制作用無明顯區(qū)別。

2.2 兩種多糖成分抗病毒能力的比較（見表3）

表3 兩種多糖成分雞胚法抗病毒結(jié)果

以兩種多糖成分與新城疫病毒作用后，測定經(jīng)雞胚培養(yǎng)后的病毒效價(jià)評價(jià)病毒的抑殺作用。

由表3可見，當(dāng)藥物濃度升高時(shí)，兩種藥物均表現(xiàn)出明顯的抗病毒的效果。黃芪多糖和板藍(lán)根多糖在直接與病毒混合作用時(shí)有一定的抑制作用。3種不同的藥物作用方式中，藥物和病毒直接作用的效果最好，而治療處理（先接毒后給藥）的效果最差。

2.3 體內(nèi)抗病毒試驗(yàn)的比較（見表4）

表4 攻毒后各組雞新城疫抗體水平變化

由表4可知，在攻毒后各處理的雞的HI抗體水平都發(fā)生了顯著的變化。H組未免疫，抗體水平為0。攻毒后第1 d，預(yù)防處理的各組的雞抗體普遍高于治療處理各組。攻毒第3 d，所有處理的雞的HI抗體水平都出現(xiàn)明顯下降，這與發(fā)病狀況吻合。經(jīng)過持續(xù)給藥，各處理的雞的抗體水平均有提高，說明藥物在雞的體內(nèi)發(fā)揮了作用，起到一定的保護(hù)效應(yīng)。

表5 不同藥物成分對雞攻毒保護(hù)率的影響

由表5可知，新城疫病毒對未免疫處理的雞的傷害嚴(yán)重，多數(shù)都明顯發(fā)病，發(fā)病率達(dá)到85%，且病癥較重，尤其是在攻毒后第2 d到第3 d，連續(xù)出現(xiàn)病死雞，病死率達(dá)到60%。這也再次說明新城疫是一種烈性傳染病，一旦發(fā)病，傳播非常迅速且大量致死。而對于免疫對照組，雞的發(fā)病率和死亡率都顯著的低于未免疫處理，這證明了早期免疫對于預(yù)防新城疫是有效的。

而藥物處理組，無論是預(yù)防處理還是治療處理，都能夠進(jìn)一步的降低雞群的發(fā)病率和死亡率。在攻毒后各組雖然也普遍發(fā)生精神委靡，食欲下降等不良反應(yīng)，但病癥輕微，如果嚴(yán)格判斷，發(fā)病率低于30%，且經(jīng)過持續(xù)給藥，大部分雞都能在3 d內(nèi)徹底好轉(zhuǎn)。特別是在預(yù)防處理各組中，雞的病死數(shù)很少。黃芪多糖組無病死雞。這些結(jié)果說明中藥成分具有一定的增強(qiáng)免疫的效果，能夠提高免疫成功率和保護(hù)率。

2.4 兩種多糖成分對雞生長性能和免疫功能的影響

表6 黃芪多糖和板藍(lán)根多糖對雞生長性能的影響

表6結(jié)果表明黃芪多糖和板藍(lán)根多糖均使試驗(yàn)組雞的生長性能有一定的提高，黃芪多糖和板藍(lán)根多糖分別使處理組雞的日均增重比免疫對照組提高了10.53%和9.21%，比基礎(chǔ)對照組分別提高了20.00%和18.57%，但差異不顯著（P＞0.05）。

由圖1可知，黃芪多糖和板藍(lán)根多糖對雞HI抗體水平具有不同的影響。免疫后各組的抗體水平都顯著高于基礎(chǔ)對照組（P＜0.01），說明疫苗免疫對新城疫病毒感染有抵抗作用，而黃芪多糖和板藍(lán)根多糖能在免疫基礎(chǔ)上加強(qiáng)保護(hù)作用。但與免疫對照組相比時(shí)，只有22、27日齡時(shí)黃芪多糖使HI抗體提高1.26和1.75個(gè)滴度，影響顯著（P＜0.05）。

圖1 黃芪多糖和板藍(lán)根多糖對雞HI抗體水平的影響

表7顯示兩種多糖對雞體內(nèi)T細(xì)胞轉(zhuǎn)化率具有不同程度的影響。與基礎(chǔ)對照組和免疫對照組相比，黃芪多糖能極顯著促進(jìn)T細(xì)胞的轉(zhuǎn)化(P＜0.01)，板藍(lán)根多糖處理組使雞體內(nèi)T細(xì)胞轉(zhuǎn)化率顯著升高(P＜0.05)。這些結(jié)果說明兩種藥物成分對T細(xì)胞及其所參與的細(xì)胞免疫反應(yīng)均有一定的促進(jìn)作用。

表7 兩種藥物成分對免疫系統(tǒng)影響

T細(xì)胞通過其表達(dá)的受體可以識別機(jī)體內(nèi)衰老、死亡、突變或被病毒感染的細(xì)胞，并在刺激分子的協(xié)同作用下，直接對靶細(xì)胞產(chǎn)生免疫效應(yīng)[4]。T細(xì)胞的轉(zhuǎn)化程度反映了細(xì)胞的應(yīng)答功能。

肥大細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)一種重要的免疫細(xì)胞，能夠分泌多種活性物質(zhì)，在許多生理和病理過程中起重要作用[5]。由表7可以看到，與基礎(chǔ)對照組相比，板藍(lán)根多糖使肥大細(xì)胞數(shù)目極顯著（P＜0.01）增加，而黃芪多糖雖然也使其有所增加但差異不顯著（P＞0.05）。

法氏囊指數(shù)是法氏囊生長發(fā)育程度的一個(gè)指標(biāo)，脾臟和胸腺指數(shù)也不同程度反映了機(jī)體免疫器官發(fā)育的水平。試驗(yàn)結(jié)果表明：與基礎(chǔ)對照組相比，黃芪多糖組的脾臟指數(shù)極顯著升高(P＜0.01)，而板藍(lán)根多糖組的脾臟指數(shù)無顯著變化(P＞0.05)。與基礎(chǔ)對照組相比，黃芪多糖組的法氏囊指數(shù)顯著升高(P＜0.05)，而板藍(lán)根多糖組的法氏囊指數(shù)極顯著降低(P＜0.01)。與基礎(chǔ)對照組相比，黃芪多糖組胸腺指數(shù)顯著提高(P＜0.05)，而板藍(lán)根多糖組極顯著提高(P＜0.01)。

3 討論

黃芪和板藍(lán)根都是常見的中草藥，在我國具有長期使用積累的經(jīng)驗(yàn)，長久以來被廣泛用于增強(qiáng)免疫和治病中。這些藥物的活性物質(zhì)具有不同的性狀和功效，進(jìn)入動物機(jī)體能夠刺激信號因子產(chǎn)生免疫和應(yīng)答，或能夠抑制病原體的增殖和發(fā)育，關(guān)于中草藥具體作用機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。

植物多糖可通過提高機(jī)體特異性免疫來促進(jìn)動物抵抗病原體感染，而本試驗(yàn)的結(jié)果表明黃芪多糖和板藍(lán)根多糖對細(xì)菌生長的直接抑制能力較差，一種可能是本實(shí)驗(yàn)中未考慮pH值因數(shù)；而李瑜[6]報(bào)道對于細(xì)菌黃芪多糖0.02 mg/ml時(shí)效果最佳；對于霉菌黃芪多糖0.02 mg/ml時(shí)效果最佳；當(dāng)黃芪多糖在pH值為6的條件下，抑菌活性均最強(qiáng)。黃芪多糖對細(xì)菌、霉菌都有一定的抑制效果，pH值可影響枸黃芪多糖的抑菌效果。另一可能原因是由于提取方法不同得到的多糖成分不同，本實(shí)驗(yàn)采用酶法提取黃芪多糖，而據(jù)方圣鼎[7]報(bào)道從內(nèi)蒙黃芪根的水提液中分得三種多糖：黃芪多糖I是雜多糖，由D—葡萄糖、D—半乳糖和L-阿拉伯搪組成；黃芪多糖Ⅱ及Ⅲ，均為D—葡聚糖，其平均分子量分別約為12 300和34 000，由水提法得到的多糖部主要由黃茂多糖I及Ⅱ組成,在小鼠上具有廣泛的各種免疫作用,能增加小鼠脾臟的重量及細(xì)胞數(shù),增加小鼠脾臟對綿羊紅細(xì)胞的免疫應(yīng)答反應(yīng)和促進(jìn)腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能。若將黃茂多糖I及Ⅱ分別試驗(yàn),初步結(jié)果表明多糖I能增加脾臟重量及細(xì)胞數(shù),但抑制脾細(xì)胞對綿羊紅細(xì)胞的免疫應(yīng)答反應(yīng),多糖Ⅱ作用與多糖I相似，但較弱，而多糖Ⅲ則沒有作用。Fu[8]通過核磁共振和熒光光譜分析表明黃芪多糖具有線性結(jié)構(gòu)，由1，3-β-d-半乳糖殘基，β-Glc，1,6-α -半乳糖，1,5-β-木聚糖,1,4-β-半乳糖,β-d-半乳糖，1,2-α-Rha，1,2,4-α-Rha殘基，C-2 與 C-6 主要以氫鍵相連。

而不同工藝生產(chǎn)的黃芪多糖對雞免疫細(xì)胞功能的影響有很大差異[9]。本試驗(yàn)雞胚法檢測兩種多糖抗病毒的結(jié)果顯示，隨著濃度的升高，二種多糖成分對新城疫病毒的抵抗力明顯增強(qiáng)，且多糖與病毒的作用方式對其抗病毒效果影響很大，在這些多糖直接與病毒接觸反應(yīng)能取得較好的抗病毒效果。當(dāng)病毒感染雞胚后再給多糖，則治療效果明顯下降。黃芪多糖對H9N2禽流感病毒的復(fù)制有抑制作用，可以促進(jìn)雛雞的體液免疫反應(yīng)[10]。

陸林雁[11]發(fā)現(xiàn)黃芪多糖注射液能增強(qiáng)慶大霉素對腸炎型細(xì)小病毒病的藥效，可能的機(jī)理是黃芪多糖具有促進(jìn)機(jī)體誘導(dǎo)產(chǎn)生干擾素的能力，一定程度地抑制了病毒的繁殖，同時(shí)黃芪多糖在動物體內(nèi)沒有藥物殘留，減輕了長期用藥的毒副作用。鐘華[12]研究結(jié)果表明黃芪多糖單獨(dú)使用時(shí)對豬細(xì)小病毒（PPV）無明顯的抑制作用；板藍(lán)根多糖單獨(dú)使用時(shí)，對PPV有明顯的抑制作用，APS與IRPS等體積合并時(shí)，對PPV的抑制作用顯著增強(qiáng)，最小直接殺滅濃度提高為0.29 mg/ml，最小阻斷濃度提高為0.070 mg/ml。李麗婭[13]采用黃芪多糖溶液100 g/l濃度,經(jīng)小白鼠滴鼻給藥,對小白鼠肺炎實(shí)變有明顯的抑制作用，200 g/l、100 g/l濃度組能抑制流感病毒增殖(與病毒對照組比較P＜0.05或P＜0.01)，200 g/l濃度組能延長流感病毒感染小鼠的生存時(shí)間,表明黃芪多糖有明顯的抗流感作用。另有研究發(fā)現(xiàn)黃芪多糖對豬繁殖與呼吸道病毒(PRRSV)和豬流感病毒(CSFV)有免疫抵抗作用。

在本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，板藍(lán)根多糖和黃芪多糖不同程度的促進(jìn)雞免疫系統(tǒng)T細(xì)胞轉(zhuǎn)化，增加機(jī)體內(nèi)肥大細(xì)胞數(shù)目，促進(jìn)免疫器官的發(fā)育，促進(jìn)動物綜合免疫力的提升，從而達(dá)到協(xié)助機(jī)體抵抗病原體感染的療效。張紅英等[14]的試驗(yàn)結(jié)果表明,板藍(lán)根多糖能顯著促進(jìn)豬脾臟淋巴細(xì)胞的增殖,同時(shí)又能協(xié)同ConA或LPS誘導(dǎo)的豬脾臟淋巴細(xì)胞增殖(P＜0.05)；能顯著促進(jìn)由ConA誘導(dǎo)的豬脾臟淋巴細(xì)胞分泌IFN-γ,抑制IL-2的分泌,對IL-4分泌的影響不明顯；低劑量板藍(lán)根多糖能顯著促進(jìn)NO的分泌(P＜0.01)。劉俊玲[15]發(fā)現(xiàn)板藍(lán)根多糖能引起雞脾臟淋巴細(xì)胞蛋白激酶c活性明顯升高。Du等[16]發(fā)現(xiàn)一種新的板藍(lán)根多糖具有治療肺部炎癥的潛力。

趙云煥等[17]發(fā)現(xiàn)益生菌、黃芪多糖聯(lián)合處理均能顯著提高固始雞雛雞周增重、法式囊指數(shù)、脾臟指數(shù)和血清新城疫抗體效價(jià)。劉俊玲等[18]研究扶正解毒散處方，其主要成分是黃芪、板藍(lán)根、淫羊藿,從其中提取植物多糖成分,制作成注射劑用于病毒病的治療，發(fā)現(xiàn)復(fù)合多糖注射劑對雞脾臟淋巴細(xì)胞的增殖作用最明顯,增殖率為130.42%；對IBDV和NDV均有直接殺滅作用,能夠有效的阻斷和抑制IBDV和NDV對體外培養(yǎng)CEF細(xì)胞的感染。郭新華等[19]研究板藍(lán)根多糖對14日齡蛋公雞新城疫HI抗體滴度、脾臟、胸腺、法氏囊免疫器官指數(shù)的作用，結(jié)果顯示大多數(shù)試驗(yàn)組雞的抗體滴度與免疫器官指數(shù)都顯著高于空白對照組,而且低劑量組高于高劑量組。

由于雞新城疫發(fā)病普遍，控制其發(fā)生意義很大，新城疫HI抗體是反映雞新城疫免疫狀態(tài)的指標(biāo)，也是反映雞的特異性體液免疫反應(yīng)的指標(biāo)[20]，且簡單易測，結(jié)果相對比較準(zhǔn)確，因此本實(shí)驗(yàn)以HI抗體作為評價(jià)三種中藥活性成分免疫調(diào)節(jié)作用的一個(gè)指標(biāo)。已有許多報(bào)道相關(guān)中藥或相關(guān)成分能增加雞新城疫抗體水平，注射黃芪多糖有顯著的免疫增強(qiáng)作用，能顯著逆轉(zhuǎn)環(huán)磷酰胺導(dǎo)致的新城疫HI抗體水平下降[21]。郭新華[19]試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)板藍(lán)根多糖能顯著增強(qiáng)HI抗體水平，且低劑量組效果好于高計(jì)量組。

本試驗(yàn)中黃芪多糖能顯著提高HI抗體水平，而另外兩種藥物并無影響，尤其是板藍(lán)根多糖之前多人報(bào)道有增強(qiáng)HI抗體水平的作用，這可能與給藥方式，和藥物純度和含量有很大關(guān)系，口服給藥可能會降低藥物的功效。

黃芪多糖具有調(diào)節(jié)血糖[22]、保護(hù)心血管系統(tǒng)、改善心肌血性損傷的作用。葉紅英[23]觀察黃芪多糖對STZ糖尿病大鼠物質(zhì)代謝和心臟機(jī)械功能的作用，發(fā)現(xiàn)其具有改善糖尿病糖脂代謝和心臟收縮功能,為黃芪多糖的臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。黃芪多糖APS(100～1 600 mg/ml)可以顯著的促進(jìn)肌管中葡萄糖的攝入，且有時(shí)間和劑量效應(yīng)[24]。黃芪多糖APS能通過激活A(yù)MPK途徑有效的改善棕櫚酸鹽誘導(dǎo)的炎癥性反應(yīng)[25]。

臨床前試驗(yàn)表明,黃芪多糖有提高荷瘤小鼠T、B淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng),促進(jìn)脾細(xì)胞產(chǎn)生IL-2恢復(fù)至正常水平,提高細(xì)胞免疫功能,抗腫瘤的作用[26]。唐雪明等[27]發(fā)現(xiàn)黃芪多糖對21、35日齡雛雞T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能有增強(qiáng)作用,且與劑量有相關(guān)性,而對7、49日齡雛雞的作用不明顯。胡興昌[28]實(shí)驗(yàn)證明板藍(lán)根凝集素對小鼠胸腺的發(fā)育和胸腺細(xì)胞的增殖可能具有促進(jìn)作用,對維持胸腺微環(huán)境可能起間接作用。張萍[3]通過自由基清除試驗(yàn),對板藍(lán)根多糖的活性進(jìn)行了鑒定,結(jié)果顯示其具有較強(qiáng)的自由基清除能力。研究發(fā)現(xiàn)黃芪多糖的抗萎縮和抗自噬作用，在C2C12骨骼肌肌管和成肌細(xì)胞中，黃芪多糖通過Akt,m-TOR,P70s6k,rpS6 and FoxO3A/FoxO1的磷酸化過程可以抑制地塞米松誘導(dǎo)的肌萎縮，通過促進(jìn)細(xì)胞增殖及抑制細(xì)胞自噬保護(hù)C2C12成肌細(xì)胞免受H2O2損害，保護(hù)的機(jī)理涉及到線粒體途徑和死亡受體途經(jīng)，黃芪多糖具有抗氧化作用可以開發(fā)成為保護(hù)劑甚至是治療藥物用于肌萎縮癥治療[29]。而硫酸化的黃芪多糖比未硫酸化的黃芪多糖在體外具有更強(qiáng)的抗炎癥作用[30]，另外，黃芪多糖脂質(zhì)體可以顯著的提高黃芪多糖藥理活性，中高劑量就有最好的作用，黃芪多糖脂質(zhì)體可以開發(fā)成一種新的制劑[31]

4 小結(jié)

綜上所述，黃芪多糖和板藍(lán)根多糖活性成分具有一定的體外抑菌、抗病毒作用，且能促進(jìn)動物免疫機(jī)能，其作用的發(fā)揮受到多糖提取方法、多糖成分與含量、給藥方式和劑量的影響，在實(shí)際生產(chǎn)中需要采取適當(dāng)?shù)墓に囂崛↑S芪多糖和板藍(lán)根多糖，采取適宜的方式添加到飼料中才能取得比較好的生產(chǎn)效果。