張貴成
(甘肅省通渭縣榜羅鎮(zhèn)中心衛(wèi)生院,甘肅 定西 743311)
對中藥冬蟲夏草所含成分的分析和療效功能的探討
張貴成
(甘肅省通渭縣榜羅鎮(zhèn)中心衛(wèi)生院,甘肅 定西 743311)
【摘要】冬蟲夏草(Cordyceps Sinesis B.sacc),屬于植物學(xué)的子囊菌綱(Ascmycete-ae)、肉座菌目(Hypocr Cales),麥角菌屬(Cordyceps)。為一種動植物兼明的名貴中藥。主治和功能:①冬蟲夏草:能補虛損、益精氣,止咳化痰、治療痰飲喘急,咳血盜汗,陽痿早泄,腰膝酸痛,久病體虛,并有滋精益髓之功。②近年來,臨床上多用于治療癌癥,效果顯著。
【關(guān)鍵詞】對中藥冬蟲夏草;所含成分;分析探討
1.1 準備分析材料
①選取冬蟲夏草,蟲體色澤黃白,蟲體大小適中,體態(tài)飽滿,發(fā)育健壯,頭部子座棕褐色,長度適中,發(fā)育健全,完整無損的個體,選作分析試料。②除垢洗污,用水清透表面,用小毛刷刷洗多次,再用蒸餾水,沖洗多次,并用酒精消毒棉球擦干,在酒精燈上燒去殘存的酒精,放入45 ℃烘箱中,烘烤8 h。
1.2 研磨粉碎
①將烘干的冬蟲草,自蟲體頭部,子座基底部處剪斷,收集蟲體,子座兩藥,各秤取3 g。②將秤好的蟲體,子座,2種藥材,分別在研體內(nèi),反復(fù)研成極細粉末,(子座粉末呈棕褐色,蟲體粉末呈黃褐色)。將兩種藥材的粉末,分別裝入2只錐形瓶內(nèi)。
1.3 用堿水解
①將分裝的蟲體,子座粉末的兩只錐形瓶,裝好冷凝管,放在水浴鍋內(nèi),回流蒸煮4~6 h。在兩只錐形瓶內(nèi),各加入20%的NaOH溶液100 mL,在回流蒸煮期間,時時添加水分,以免蒸干。②當(dāng)蒸煮完畢后,乘熱用HCl調(diào)pH至微酸性,靜置,待析出沉淀后,濾除。(蟲體粉末水解液的沉淀呈黃褐色;子座粉末水解液的沉淀呈紅褐色)[1]。③取2種水解液的濾液、分別點樣,作氨基酸的層析實驗,用茚三酮顯色后,兩種水解液均呈現(xiàn)出相同的8種色斑。(表面在蟲體,子座兩藥材內(nèi),均含有同一種類,同一結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)。)④在2種水解后的濾液內(nèi),分別加95%的酒精,一直至出現(xiàn)核蛋白的沉淀為止。
1.4 分離腺嘌呤核苷
將此酒精沉淀析出的核蛋白,分別離心發(fā)出后,依然分別裝入2只錐形瓶內(nèi),用95%酒精沖洗2次,在此2種沉淀物內(nèi),各加入5%的硫酸溶液100 mL,在水浴鍋內(nèi),回流蒸煮3~4 h。除去回流裝置,將硫酸水解液,繼續(xù)加熱,驅(qū)除部分酸,待冷后,加入氨水,調(diào)pH至微堿性,作如下實驗:①腺嘌呤試驗-于試管中加入水解液0.5 mL,并加入濃氨水3滴,使顯堿性,隨即在溶液內(nèi)加入5%硝酸銀0.5 mL,靜置片刻,觀察時出現(xiàn)土黃色的腺嘌呤銀的沉淀。②核糖試驗—于試管中加入水解液1 mL,加入4%聯(lián)苯胺的冰醋酸試驗0.5 mL,煮沸冷后呈粉紅色。(說明有游離的核糖存子,由于腺嘌呤核糖苷鏈被硫酸水解,核糖游離)。③磷酸鹽反應(yīng)-于試管中加入水解液1 mL,滴入氨水3滴,使成弱堿性。再滴入稀硝酸2滴,后加入1 mL鉬酸銨試液,加熱后不呈現(xiàn)黃色的磷鉬酸沉淀[2]。表明無磷存在。④核苷的層析試驗:取水解液,在紙上點樣做層析分析;酸性擴展劑,正丁醇:甲酸:水(15∶3∶2)。堿性擴展劑,正丁醇:氫氧化銨:乙醇(13∶3∶3)。在紫外光下顯示出兩個色斑,腺嘌呤和腺嘌呤核苷。(在兩種藥材內(nèi)的水解液的色相同)。⑤將上述2種水解液繼續(xù)加熱,驅(qū)除殘存的氨,待冷后,加入苦味酸的水飽和溶液,靜置片刻,呈現(xiàn)出大而長的針狀結(jié)晶,為苦味酸腺嘌呤的結(jié)晶。⑥用HCl將苦味酸酸化,濾除沉淀,用乙醇長時間提取,分離出腺嘌呤核苷和腺嘌呤(在蟲體和子座內(nèi)的兩種水解液中的結(jié)晶相同)。
由上述分析實驗表明,冬蟲夏草的主要成分,是腺嘌呤核苷,在蟲體部分和子座部分的成分完全相同:同時兩部分內(nèi)的含量大體相等。
2.1 在冬蟲夏草內(nèi)所含蛋白質(zhì)的水解物內(nèi),主要含有8種以上的氨基酸,在蟲體部分和子座部分,所含的氨基酸完全相同,表明子在2種藥材內(nèi),都含有同樣結(jié)構(gòu)和相同成分,種類一致的蛋白質(zhì)。這些蛋白質(zhì)主要有纈氨酸、谷氨酸、精氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、組氨酸等。
2.2 從分子生物學(xué)的水平探討冬蟲夏草的藥理功效
冬蟲夏草,歷代醫(yī)家學(xué)者,都認為他有茲精益髓,大補元氣,功同人參的滋補要藥。
今天,我們對它的看法如何?只能根據(jù)該藥的內(nèi)含成分,及對該藥所作的科學(xué)分析為依據(jù),去論述其機制和功效[3]。在蟲草內(nèi),含有8種以上氨基酸,這是作為補藥的首藥根據(jù),更為重要的是他含有“腺嘌呤”,這是組成核酸的重要原料之一,而核酸是構(gòu)成生物體內(nèi)的重要成分,它關(guān)系著生物的生長,繁殖以及蛋白質(zhì)的合成,它關(guān)系著生物的許多重要的生理功能。所以說,在冬蟲夏草內(nèi),具有重要成分的腺嘌呤苷。他是機體合成核酸的重要原料,因而它能促進生物機體內(nèi)DNA的合成,進一步促進機體內(nèi)部蛋白質(zhì)的合成。并能增強機體的新陳代謝和增強機體組織的建造和復(fù)修[4]。由此看來,歷代醫(yī)家學(xué)者,將冬蟲草用作滋補強壯,以及久病后恢復(fù)健康,是完全正確的。是合乎科學(xué)性的。
2.3 冬蟲夏草治療性功能萎縮癥狀的作用
在我們肯定古人將冬蟲夏草用作滋補藥的同時,也對古人所說:“冬蟲夏草有治療陽痿早泄,補腎生精,大有奇功”,的論述同樣找到了科學(xué)根據(jù),像古人這種總結(jié)性的論述,突出表明了冬蟲草內(nèi)含重要成分“腺嘌呤核苷”的藥理實質(zhì)。因為在目前許多動物實驗證明,“腺嘌呤核苷”和“腺嘌呤苷酸”,均對實驗動物由于營養(yǎng)不良,所造成的性功能障礙的肌萎縮癥狀及肌強直癥狀,均有明顯的改善,并有其恢復(fù)正常的功能作用。因此,歷代醫(yī)家學(xué)者,對冬蟲草在藥理功能方面的論述,隨著藥物化學(xué)的分析和藥理實驗的不斷發(fā)展,將逐漸得到驗證[5]。
2.4 冬蟲夏草抑癌消腫作用
近年來,臨床上用冬蟲夏草煎劑治療晚期癌癥,療效顯著,從分子生物學(xué)的水平,進一步看冬蟲夏草內(nèi)含的“腺嘌呤核苷”重要成分時,認識到“腺嘌呤核苷”是一種“天然的核酸合成阻斷劑”。目前臨床用來治療癌癥的許多藥物,統(tǒng)稱為“人工合成核酸阻斷劑”。例如,6-巰基嘌呤(6-MP);6-巰基鳥嘌呤(6-TG)等,都是嘌呤核酸合成的抑制劑,這樣看來,在冬蟲夏草內(nèi),它所具有的重要成分腺嘌呤核苷的分子結(jié)構(gòu),同機體內(nèi)含有的次黃嘌呤分子結(jié)構(gòu),極為相似,因此,冬蟲草內(nèi)的腺嘌呤核苷,能競爭性地抑制機體內(nèi)部的次黃嘌呤不致轉(zhuǎn)變成為次黃嘌呤核苷酸,其結(jié)果,“冬蟲草腺嘌呤核苷”,代替了次黃嘌呤核苷酸,所以阻斷了核苷酸相互轉(zhuǎn)變的活動。所以DNA和RNA的合成受到了阻礙,所以蛋白質(zhì)的合成就無法進行,從而癌瘤的生長就受到了抑制。
同時,當(dāng)“冬蟲草腺嘌呤核苷”在進入機體內(nèi)的細胞時,要經(jīng)過磷酸酶的活化,轉(zhuǎn)變成“冬蟲草腺嘌呤核苷酸”,形成了合成DNA(脫氧核糖核酸)的偽品原料,當(dāng)在參加DNA的復(fù)制時,加入的偽品“冬蟲草腺嘌呤核苷酸”,組成一種“摻假的DNA”,當(dāng)DNA進一步復(fù)制和轉(zhuǎn)錄成RNA時,就擾亂了堿基配對的正常規(guī)律。其結(jié)果,引起正常復(fù)制和轉(zhuǎn)錄作用的終判。因此,癌癥的生長,發(fā)育直接受到抑制,癌體組織逐漸解體死亡,從而達到抑制腫瘤消腫的作用。
參考文獻
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中圖分類號:R284.2
文獻標識碼:B
文章編號:1671-8194(2014)15-0065-02