林 飛，王 階，2*

(1.湖北中醫(yī)藥大學，湖北武漢 430061;2.中國中醫(yī)科學院廣安門醫(yī)院，北京 100053)

經(jīng)方是漢代以前經(jīng)典醫(yī)藥著作中記載的方劑，《傷寒雜病論》中的方劑，以其言簡意賅、法度嚴密作為經(jīng)方代表，力專效宏則是經(jīng)方生命力核心關鍵所在。經(jīng)方組分配伍規(guī)律也一直以來作為眾醫(yī)家和研究者聚焦的靶點，以方證對應為核心在病證結合的基礎上剖析經(jīng)方組分配伍規(guī)律，對探析經(jīng)方高效組合作用機制、提高臨床療效以及新藥研發(fā)有重要的意義。關于經(jīng)方的現(xiàn)代研究方法主要有:化學成分研究、藥理研究 (拆方研究、配比研究、藥對研究)、血清藥理學研究、有效成分配伍研究、體內(nèi)化學成分及藥物動力學研究、數(shù)學量化研究等等［1］。研究方法較多且分工越來越精細，甚至出現(xiàn)所謂的“破碎化”現(xiàn)象，但是經(jīng)方組分配伍規(guī)律的內(nèi)在機制，卻仍需進一步深入探究。

1 系統(tǒng)生物學與整體觀念

1.1 系統(tǒng)生物學與方劑 系統(tǒng)生物學是在細胞、組織、器官和生物體整體水平上研究結構和功能各異的生物分子及其相互作用，并通過計算生物學來定量闡明和預測生物功能、表型和行為。主要包括:基因組學、轉(zhuǎn)錄組學、蛋白質(zhì)組學、代謝組學、相互作用組學以及表型組學等［2］。目標是利用計算模型，定向定量描述完整的機體對環(huán)境干擾所起反應，預測“組件到組件”關系的功能性結果［3］。

方劑是辨證、辨病，在確定立法的基礎上，根據(jù)組方原則和結構，選擇適宜藥物組合而成的藥方和制劑?！端貑枴ぶ琳嬉笳摗费?“主病之為君，佐君之謂臣，應臣之謂使”，由此提出君臣佐使的組方原則。以病證結合為基點，與證候相對應，以若干藥物配伍而成，是實施與體現(xiàn)治法的方式與手段。方劑的配伍規(guī)律和配伍變化決定著臨床療效，主要為①方劑配伍規(guī)律和配伍變化決定中藥的不同功效;②藥物功效與物質(zhì)基礎關系密切;③配伍規(guī)律影響藥物的分離提?。?］。

1.2 系統(tǒng)生物學、整體觀念的統(tǒng)一性 生物學物質(zhì)基礎是人類認知各種疾病及證候發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)歸的物質(zhì)本質(zhì)，系統(tǒng)生物學使用的是大通量的生物信息測定和生物信息學、生物統(tǒng)計學相結合的研究策略，涵蓋了中醫(yī)獨特理論體系的特點之一整體觀念，即人自身整體觀和天人合一觀。系統(tǒng)生物學認為構成生物系統(tǒng)的組分在結構上不可區(qū)分，且相互影響，相互作用，并認為各個生物系統(tǒng)構成一定的網(wǎng)絡，這個網(wǎng)絡縱橫交錯，往來有序，網(wǎng)絡間的各個信號通過相關通道有條不紊地、不斷地進行多靶點、多組分、多層次的作用與聯(lián)系。系統(tǒng)生物學更加注重復雜生命系統(tǒng)中所有成分以及它們之間的動態(tài)關系，而不是將機體作為孤立的很多部分，這種整體思想與中醫(yī)證候體系的“整體觀”、“動態(tài)觀”、“辨證觀”等不謀而合［5］。中醫(yī)學整體觀念認為組成機體的各元素在結構上不可分割，在生理上相互聯(lián)系、制約，在病理上相互影響，又強調(diào)人與自然環(huán)境和社會環(huán)境相統(tǒng)一。人體的局部與整體是辨證的統(tǒng)一，人體的每個相對獨立部分，都寓藏著整個機體的生命信息，如“寸口脈象能反應出整個機體的狀況”。人體某一局部的病理變化，也往往蘊涵著全身臟腑氣血陰陽盛衰的整體信息。而在整體觀念指導下確定的治療原則也有效地指導著臨床用藥:“從陰引陽，從陽引陰”，“病在上者下取之，病在下者上取之”(《靈樞·終始》)等等以及根據(jù)自然氣候地理環(huán)境不同的“三因制宜”。

1.3 各組學的在經(jīng)方配伍規(guī)律中的主要作用 系統(tǒng)生物學是建立在傳統(tǒng)生物學基礎上，結合了系統(tǒng)科學的思維模式，運用以“組學分析，整體構建，宏-微觀相結合”為特征的系統(tǒng)論［6］。部分學者認為系統(tǒng)生物學通過建立詳盡的細胞模型，通過對多級信號轉(zhuǎn)導和分子間的復雜作用能夠系統(tǒng)地深層次地理解以機制為基礎的藥物發(fā)現(xiàn)，有助于鑒別補償藥物的效果并預測系統(tǒng)副作用的反饋機制，甚至能夠用多重藥物把機能失調(diào)的細胞引向正常的狀態(tài)而產(chǎn)生的副作用最少［7］。

目前藥物基因組學、藥物轉(zhuǎn)錄組學、蛋白質(zhì)組學、代謝組學等方法參與已在經(jīng)方配伍規(guī)律研究中起到重要的作用，通過藥物對整體、組織、細胞以及基因的反映，進行綜合系統(tǒng)性的分析，用現(xiàn)代科學系統(tǒng)闡明經(jīng)方組方配伍的科學性。分述如下:藥物基因組學主要研究個體遺傳變異對藥物應答的影響，包括研究影響藥物的吸收、轉(zhuǎn)運、代謝、消除以及藥物靶分子等基因在不同群體和個體中的差異特性，研究這些差異與藥物效應或毒副作用之間的相關性及其發(fā)生機制［8］。藥物轉(zhuǎn)錄組學是研究整體水平上細胞中基因轉(zhuǎn)錄的情況及轉(zhuǎn)錄調(diào)控規(guī)律，主要研究內(nèi)容是針對不同的環(huán)境條件變化下，基因表達方式的特征［8］。蛋白質(zhì)組學是采用大規(guī)模、高通量、高頻率的技術手段研究蛋白質(zhì)的特征，包括蛋白質(zhì)的組成、表達水平、翻譯后的修飾、蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用等，整體上研究基因組所表達的所用蛋白質(zhì)在不同時間與空間的表達譜，全景式地揭示生命活動的本質(zhì)［8］。據(jù)報道學者運用系統(tǒng)生物學研究模式對中藥復方雙龍方進行了研究，應用比較蛋白質(zhì)組學鑒定了13個差異表達蛋白;利用基因芯片技術，篩查出了Cfb、Nfi13、Arntl和Nppa等9個基因，可能是治療心肌梗死中藥共同的靶基因。系統(tǒng)地從蛋白組學和基因組學的角度研究雙龍方治療心肌梗死的作用機理和藥效分子基礎［9］。代謝組學通過對生物體液和組織中的代謝物進行動態(tài)檢測和分類以定性、定量，將代謝信息與機體病理生理過程中生物學事件關聯(lián)起來，監(jiān)測活細胞中的化學變化［10］。如柳長風等運用代謝組學研究對黃連解毒湯配伍規(guī)律進行了深入研究，通過實驗組對熱病證候的整體代謝和生物標志物的干預作用，結果顯示黃連解毒湯全方作用最好，黃連-黃芩-黃柏次之，黃連作用第三，黃連-黃芩的干預作用最弱［11］。

因此，將藥物研究與系統(tǒng)生物學結合，在各種調(diào)控網(wǎng)絡的背景中研究多個基因 (靶點)之間的聯(lián)系與作用，有可能系統(tǒng)地預測和解釋藥物的作用，發(fā)現(xiàn)影響藥物有效性和安全性的因素，從而產(chǎn)生新的治療復雜疾病的策略［12］。

2 系統(tǒng)生物學與經(jīng)方組分配伍規(guī)律

2.1 經(jīng)方組分配伍規(guī)律研究 如何利用系統(tǒng)生物學進行組分配伍規(guī)律研究?例如:《傷寒論》中由桂枝、白芍、炙甘草、生姜、大棗組成的桂枝湯配伍縝密、功效卓著為群方之首?，F(xiàn)代對“桂枝湯”及其類方的臨床應用以及各組分的化學成分做了較多研究。其中桂枝主要含有反式桂皮酸、花旗松素、原兒茶酸、反式-鄰羥基桂皮酸等［13］。白芍主要含單萜及其苷類、三萜類、黃酮及其苷類、鞣質(zhì)化合物、多糖類、揮發(fā)油等［14］。甘草主要含黃酮類、三萜類、皂苷類衍生物及甘草多糖等［15］。桂枝湯具有多組分、多靶點的特點，關于組成桂枝湯的各要素即桂枝、白芍、甘草等有效成分的化學成分均已知曉，但是各組分融合在一起，被機體吸收、分布、代謝和排泄后產(chǎn)生了什么變化，這些變化對機體的影響如何?規(guī)律如何?機體在服用桂枝湯及其桂枝湯類方之后桂枝湯及各組分之間的細胞、組織和器官等生物分子之間的發(fā)生了哪些改變?基因組、轉(zhuǎn)錄組、蛋白質(zhì)組及代謝組等演變規(guī)律如何?即系統(tǒng)生物學意義下的組分配伍規(guī)律等方面的問題還無從知曉。

2.2 整合研究 運用系統(tǒng)生物學方法分別分析桂枝湯、桂枝湯類方及配伍高頻藥物經(jīng)過機體吸收、轉(zhuǎn)運、代謝及消除后的細胞信號傳導、基因調(diào)控網(wǎng)路及代謝物質(zhì)變化等。假設以病證結合為基點，以方證對應為核心，采用系統(tǒng)生物學研究桂枝湯及其類方被機體吸收、轉(zhuǎn)運、代謝、消除后的化學成分對體內(nèi)基因組學、轉(zhuǎn)錄組學、蛋白質(zhì)組學和代謝組學的反應，該反應是多靶點、多層次的單個或相關性反應，將結果用計算機進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析、綜合并判斷其作用與系統(tǒng)生物的共性與差異性，從而分析桂枝湯在體內(nèi)代謝的物質(zhì)基礎和分子機理。

物質(zhì)代謝通過細胞水平、激素水平和整體水平對機體進行調(diào)節(jié)，藥物的對生物體的調(diào)節(jié)也是如此，因此需要掌握其在體內(nèi)吸收、轉(zhuǎn)運、代謝及消除后的物質(zhì)基礎和分子機制，包括基因相互作用的網(wǎng)絡和藥物作用的代謝途徑，以及細胞內(nèi)和細胞間的作用，借鑒 (基因組學、轉(zhuǎn)錄組學、蛋白質(zhì)組學和代謝組學、)和現(xiàn)代分析等前沿技術，系統(tǒng)地研究組分、成方、成方與組分等方劑成方對基因→蛋白質(zhì)→細胞→組織→生物體的各層次的作用，進行系統(tǒng)的“信息整合”，得到一個理想的模式，使其能夠反映出藥物對生物系統(tǒng)的真實性及全面性。同時對其共性和差異性信息進行多層次的研究，進一步探索和闡明機體各物質(zhì)組學的整體變化的關聯(lián)性，，這種模式將有助于從現(xiàn)代生物學角度闡釋經(jīng)方的作用機制，深入尋找經(jīng)方配伍規(guī)律的研究方法，進一步了解經(jīng)方作用于人體的生物學基礎，從而闡明經(jīng)方組分配伍規(guī)律的科學內(nèi)涵。

3 整體觀念下的經(jīng)方配伍

經(jīng)研究經(jīng)方配伍規(guī)律基于病證結合和方證對應，涵蓋了中醫(yī)學中的兩大重要組成——整體觀念和辯證論治。辨證論治是基于整體觀念的思想，根據(jù)主證進行調(diào)方遣藥，“方中君臣佐使各司其職、主次分明，酌情配伍”。以上調(diào)方原則是基于機體整體變化，不同時期根據(jù)辯證，而進行施治用藥，通過藥物干預整體系統(tǒng)性的變化。

“依法選藥，主從有序，輔反成制，方證相合”是方劑的組成原則，《素問·至真要大論》:“主病之謂君，佐君之謂臣，應臣之謂使?！薄熬怀级?，制之小也。君二臣三佐五，制之中也。君一臣三佐九，制之大也”，闡明了君臣佐使的配伍規(guī)律。張仲景以《湯液經(jīng)》為基礎，博采眾長，根據(jù)方劑的組成和適應證，設立了傷寒論方證體系。即病下系證，證下系方，方隨證出，辨證論治，理法方藥一體。其配伍嚴謹、力專效宏、言簡意賅成為經(jīng)方代表。經(jīng)研究《傷寒論》方劑配伍規(guī)律即:依據(jù)疾病進退設方，用藥精細;祛邪為主，設方與體質(zhì)結合;方設君臣佐使，配伍有序;細辨氣味厚薄，施藥靈便;同氣相投，取得協(xié)同作用;法中有變，用藥剛柔相濟;細分病程進展，進退有序［16］。其組方用藥特點是“有是證用是方”，則針對病機立方，立方作用機理呈動態(tài)性，立方講究整體功能性，立方呈靈活性［17］，如桂枝湯、桂枝加葛根湯、桂枝加厚樸杏子湯、桂枝加附子湯、桂枝加桂湯以及桂枝類方等均是基于不同病機而進行加減變化。

方藥中各組分的合理配伍是方證對應有效實施的根本保障。具有治療整體性和復雜性的方藥，采用動態(tài)調(diào)節(jié)的實施過程，干預著人體疾病表現(xiàn)的病證，使機體處于一個動態(tài)的閾值范圍之內(nèi)。以上闡明經(jīng)方配伍基于系統(tǒng)性的整體變化，選擇藥物、藥量以最佳方式進行施治，但是表面上的征象顯示，藥物對疾病進行干預，盡管現(xiàn)代醫(yī)學的發(fā)展，中藥對機體的作用涉及到基因研究，但是藥物對機體、組織、細胞、細胞器、基因的系統(tǒng)性研究需進一步深入。

4 結語

綜上所述，經(jīng)方作為病證結合—方證對應的實施與體現(xiàn)，它的科學闡述不僅是探討配伍規(guī)律高效地應用臨床，而是深入研究中醫(yī)藥理論發(fā)展現(xiàn)代中醫(yī)藥，使中醫(yī)藥走向世界的必然選擇。系統(tǒng)生物學是對生物信息的測定和生物信息學、生物統(tǒng)計學相結合的策略，基于中醫(yī)學整體觀念思想，以病證結合、方證對應為落腳點，采用系統(tǒng)生物學基因組學、蛋白組學等多種方式，深入研究人體對方劑整體性的多靶點、多層次的反應，剖析經(jīng)方配伍各組分經(jīng)機吸收、轉(zhuǎn)運、代謝、消除后的生物學基礎，進而探索和闡明機體物質(zhì)組學的整體變化和的配伍規(guī)律。掌握經(jīng)方在體內(nèi)代謝的物質(zhì)基礎和分子機制，揭示方中君臣佐使的配伍關系，對其共性和差異性信息進行多層次的探討，既能克服中醫(yī)學的模糊性、不確定性和經(jīng)驗性的不足，又進一步探索和闡明機體物質(zhì)組學的整體變化，從而研究出經(jīng)方各組分的配伍規(guī)律而指導臨床合理用藥，進一步促進中醫(yī)藥與系統(tǒng)生物學的協(xié)同發(fā)展，深入挖掘出經(jīng)方配伍規(guī)律的科學內(nèi)涵。

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