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犬瘟熱病毒截短P蛋白單克隆抗體的制備與鑒定

2014-01-27 09:47:45袁維峰中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所北京100193賈紅于萍萍中國畜牧獸醫(yī)2013402225
中國畜牧獸醫(yī)文摘 2014年3期
關(guān)鍵詞:犬瘟熱單克隆結(jié)果表明

/袁維峰(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所,北京100193),賈紅,于萍萍…//中國畜牧獸醫(yī).-2013,40(4).-22~25

為制備針對犬瘟熱病毒(canine distemper virus,CDV)P1蛋白的單克隆抗體(McAb),本研究利用重組犬瘟熱病毒P1蛋白免疫BALB/c小鼠,并將其脾淋巴細(xì)胞與SP2/0進(jìn)行融合,用CDV包被ELISA板,通過間接ELISA法篩選出兩株穩(wěn)定分泌抗CDV-P1的雜交瘤細(xì)胞株(E9E4C10、E9F8D9)。間接ELISA檢測腹水效價均為1∶106,亞類鑒定結(jié)果均為IgG2b。Western blotting和間接免疫熒光(IFA)分析結(jié)果表明,兩株單克隆抗體均能與重組P1蛋白和CDV發(fā)生反應(yīng);ELISA疊加試驗增殖結(jié)果表明,兩株單克隆抗體識別的抗原表位不同。本研究制備的特異性抗CDV-P1的單克隆抗體為建立CDV免疫學(xué)檢測方法和P蛋白的功能研究奠定了基礎(chǔ)。

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