姚 樂* 李 梅安 毅

(1 陜西省榆林市第一醫(yī)院消化內(nèi)科，陜西 榆林 719000；2 陜西省腫瘤醫(yī)院腫瘤介入科，陜西 西安 710061)

Tiam1和nm23H1在胃癌中的表達(dá)

姚 樂1* 李 梅2安 毅1

(1 陜西省榆林市第一醫(yī)院消化內(nèi)科，陜西 榆林 719000；2 陜西省腫瘤醫(yī)院腫瘤介入科，陜西 西安 710061)

目的探討Tiam1和nm23H1與胃癌發(fā)生、發(fā)展過程中的相關(guān)性，從而有助于進(jìn)一步探討胃癌侵襲與轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制。方法收集胃癌標(biāo)本60例，用免疫組化Max-Vision法測(cè)定Tiam1和nm23H1蛋白的表達(dá)。結(jié)果胃癌臨床病理學(xué)特征與Tiam1和nm23H1表達(dá)的關(guān)系：①Tiam1蛋白在胃癌組織中的表達(dá)水平與胃癌組織的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度以及浸潤(rùn)深度，存在顯著相關(guān)性，組間比較差異具有顯著性（P＜0.05）。②nm23H1蛋白在胃癌組織中的表達(dá)水平與胃癌組織的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)深度以及分化程度存在明顯相關(guān)性，組間比較差異具有顯著性（P＜0.05）。③Tiam1與nm23H1蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。結(jié)論①Tiam1在胃癌組織中的表達(dá)隨著胃癌組織的病理分化程度的降低，淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移，浸潤(rùn)深度的加深而明顯增高。②nm23H1在胃癌組織表達(dá)較低，與胃癌的浸潤(rùn)程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及病理分化程度有關(guān)。

胃癌；T淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)因1；nm23H1

胃癌仍然是全世界最常見的惡性腫瘤。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因T細(xì)胞淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)因子1（Tiam1）在多種腫瘤細(xì)胞中異常高表達(dá)，nm23H1蛋白在正常組織發(fā)育中起正調(diào)控作用，是調(diào)控細(xì)胞增殖的因子。在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中起到負(fù)調(diào)控作用的代表基因，在多種惡性腫瘤的發(fā)生過程中nm23H1基因有缺失的現(xiàn)象。

1 材料與方法

1.1 一般資料：收集延安大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理教研室2007年1月至2010年10月間存檔的病理組織蠟塊，均經(jīng)有經(jīng)驗(yàn)的病理醫(yī)師確診，術(shù)前均未經(jīng)放療、化療。入選病例60例，年齡最小30歲，最大81歲，其中男性患者32例，女性18例。

1.2 主要試劑及實(shí)驗(yàn)儀器：①即用型鼠抗人Tiam1單克隆抗體、鼠抗人nm23H1單克隆抗體、免疫組化MaxVision試劑盒及DAB顯色試劑盒，均購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)有限公司。②蘇木素、無(wú)水酒精、中性樹膠等由延安大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心實(shí)驗(yàn)室提供。③DNP-9162型恒溫培養(yǎng)箱 （上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）微量移液器（北京青云航空儀表公司）BX-41型奧林巴斯光學(xué)顯微鏡。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法：快捷免疫組化Max-Vision法，高溫抗原修復(fù)。HP染色：①石蠟切片考片、脫蠟、水化。②亞甲藍(lán)溶液中染色1 min。③水洗晾干后，中性樹膠封固。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：免疫組化結(jié)果分析采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行。

2 胃癌臨床病理學(xué)特征與Tiam1和nm23H1表達(dá)的關(guān)系

Tiam1和nm23H1表達(dá)的關(guān)系與胃癌臨床病理學(xué)特征：Tiam1蛋白在胃癌組織中的表達(dá)水平與患者的性別，年齡無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），與腫瘤組織的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化類型，浸潤(rùn)范圍，情況存在相關(guān)性，組間比較有顯著性差異（P＜0.05）。nm23H1蛋白在胃癌組織中的表達(dá)情況與患者的性別，年齡無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），與胃癌組織的分化類型，浸潤(rùn)范圍，淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移存在相關(guān)性，組間比較差異具有顯著性（P＜0.05）。

3 討 論

胃癌的是最常見的惡性腫瘤之一，近些年來(lái)在我國(guó)的發(fā)病率和病死率呈上升趨勢(shì)。早發(fā)現(xiàn)、早治療是改善預(yù)后的重要因素。胃癌發(fā)生是多因素作用的結(jié)果，近年研究發(fā)現(xiàn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展與多種癌基因的增加和抑癌基因的減少密切相關(guān)。Tiam 1蛋白參與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的一種蛋白質(zhì)分子，他是Racl的特異性轉(zhuǎn)化因子,有活性的Racl與其他效應(yīng)分子協(xié)同作用，完成影響細(xì)胞的形體極化過程、結(jié)構(gòu)重組、調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架、促進(jìn)細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)、轉(zhuǎn)移，調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖與凋亡、參與基因表達(dá)的調(diào)控[1-2]，nm23H1是腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因，位于人的17q21基因鏈，其參與體內(nèi)磷酸核苷的生成，可以干擾G蛋白介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)通路而影響細(xì)胞代謝及微管聚合狀態(tài)[3]，nm23H1與Tiam 1蛋白質(zhì)分子之間有無(wú)關(guān)系，已經(jīng)有了部分實(shí)驗(yàn)研究。在體內(nèi)nm23H1通過限制Rac1的活化,減少細(xì)胞膜皺褶和片足的形成，起到對(duì)Tiam1蛋白活化的抑制作用，抑制胃癌發(fā)展和轉(zhuǎn)移[4]。我們?cè)谔接慣iam1與胃癌生物學(xué)行為的關(guān)系中發(fā)現(xiàn)以下結(jié)果：Tiam1蛋白的表達(dá)在不同性別、年齡、腫瘤原發(fā)部位中未表現(xiàn)出明顯差異，盡管細(xì)胞突變可能受到患者的居住環(huán)境、年齡、性別、等社會(huì)因素在不同程度上影響，胃癌組織隨胃癌組織浸潤(rùn)深度的加深、分化程度的降低中Tiam1蛋白的表達(dá)率明顯增高(P<0.05)，Tiaml蛋白表達(dá)率在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，組間比較有顯著差異(P<0.05)。本研究發(fā)現(xiàn)作為腫瘤轉(zhuǎn)移促進(jìn)因子的Tiam1，與胃癌生物學(xué)行為（包括組織淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度、浸潤(rùn)深度）息息相關(guān)，而這些生物學(xué)將直接影響患者的預(yù)后及術(shù)后5年生存率的重要因素。Meghan[5]發(fā)現(xiàn)在人類乳腺癌的形成、進(jìn)展和轉(zhuǎn)移過程中Tiam1高水平表達(dá)。國(guó)內(nèi)也有人[6]乳腺癌患者不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況和臨床分期Tiam1蛋白表達(dá)程度差異有顯著性，大量臨床實(shí)驗(yàn)證明Tiaml蛋白可能作為肺癌轉(zhuǎn)移、治療效果及預(yù)后的監(jiān)測(cè)指標(biāo)。Engers等[7]報(bào)告在前列腺癌患者的癌組織發(fā)現(xiàn)Tiam1蛋白的超表達(dá)可能提示預(yù)后不佳。國(guó)內(nèi)有人[8]用免疫熒光法單純測(cè)定Tiam1蛋白在中晚期胃癌組織中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)與癌組織的分化程度、淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移情況、浸潤(rùn)深度、具有顯著相關(guān)性。本實(shí)驗(yàn)表明在胃癌的發(fā)展過程中nm23-H1基因失活發(fā)揮了部分作用，但不是在所有胃癌標(biāo)本中都表達(dá)率過低，nm23-H1表達(dá)率陽(yáng)性的多少與胃癌患者的腫瘤的發(fā)生部位、性別、年齡、及生活環(huán)境均無(wú)相關(guān)性，顯示在抑制胃癌的局部浸潤(rùn)中可起到一定的作用，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，說(shuō)明nm23-Hl表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)，提示在抑制胃癌轉(zhuǎn)移中nm23-Hl基因可起到作用，與大多數(shù)學(xué)者的觀點(diǎn)相符，nm23-Hl基因是一個(gè)腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因。分化程度高的腫瘤組織中nm23H1的表達(dá)率均高于分化程度低的腫瘤組織，可見nm23-H1表達(dá)率的高低在部分程度上可以為胃癌的惡性程度的判斷提供參考價(jià)值。Nesi G等[9]研究認(rèn)為胃癌患者nm23-H1基因表達(dá)較高者5年生存率明顯升高。國(guó)內(nèi)有人研究發(fā)現(xiàn)[10]，隨胃癌分化程度的降低，nm23H1的表達(dá)率逐漸下降。在探討Tiam1和nm23H1表達(dá)與胃癌發(fā)生的相關(guān)性中，我們的研究數(shù)據(jù)表明：Tiam1和nm23H1蛋白表達(dá)呈顯著的負(fù)相關(guān)。在Tiam1染色陰性中的nm23H1染色陽(yáng)性率高于Tiam1染色陽(yáng)性的胃癌組織中nm23H1的染色陰性率(P<0.05)。此現(xiàn)象說(shuō)明在胃癌發(fā)生，發(fā)展的過程中Tiam1和nm23H1協(xié)同參與其中。

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Tiam1 and nm23H1 Expression in Gastric Cancer

YAO Le1*, LI Mei2, AN Yi1
(1 Department of Gastroenterology, Yulin First Hospital, Yulin 719000, China; 2 Department of Cancer Interventional Radiology, Shaanxi Provincial Tumor Hospital, Xi'an 710061, China)

Objective To study the correlation between Tiam1 and nm23H1 in the process of gastric cancer occurrence and development, which contribute to further explore the molecular mechanisms of gastric cancer invasion and metastasis. Methods 50 cases of gastric cancer specimens collection, using immunohistochemical s-p method to determinate the expression of Tim1 and nm23H1 protein. Results The gastric cancer clinical pathology characteristic and the Tiam1 and the relationship between nm23H1 expression: ①Tiam1 protein expression levels in gastric cancer tissue differentiation degree, inf i ltration depth, lymph node metastasis have signif i cant correlation, compare the differences between groups is signif i cant (P<0.05). ②nm23H1 expression levels of protein in gastric cancer tissue differentiation degree, inf i ltration depth, lymph node metastasis is a signif i cant correlation, compare the differences between groups is signif i cant (P<0.05). ③Tiam1 and negatively correlated with nm23H1 protein expression. Conclusion ①Tiam1 expression in gastric cancer tissue with the loss of the differentiation degree and lymph node metastasis, invasion depth deepening, which increased obviously. ②Nm23H1 expression in gastric cancer tissue is low, which have relationship with gastric cancer inf i ltration, lymph node metastasis and pathologic differentiation degree.

Gastric cancer; Tiam1; nm23H1

R735.2

B

1671-8194（2014）35-0021-02

*通訊作者