賈秋穎
(長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院老年病一療區(qū),長春130021)
自制中藥調(diào)脂湯對高脂血癥大鼠血脂調(diào)節(jié)作用的實驗研究※
賈秋穎
(長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院老年病一療區(qū),長春130021)
目的 探討中藥調(diào)脂湯對實驗性高脂血癥大鼠的脂代謝影響及心肌細胞、主動脈血管改變。方法 將60例實驗性大鼠隨機分成6組:正常組、模型組、立普妥組、調(diào)脂湯小劑量組、中劑量組、大劑量組。除了空白組外,其余各組每天灌胃高脂乳劑造成高脂血癥動物模型,造模成功后,各實驗組灌胃給予相應(yīng)藥物,治療2周后,取眼動脈血,分離血清處死大鼠,取出心臟、主動脈和肝臟,觀察各項指標(biāo)。結(jié)果 調(diào)脂湯能顯著降低高脂模型大鼠血漿總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白,升高高密度脂蛋白。結(jié)論 調(diào)脂湯對實驗性高脂血癥大鼠的血脂有明顯改善,同時對主動脈弓脂質(zhì)沉積有一定的改善作用。
中藥調(diào)脂湯;實驗性高脂血癥大鼠;實驗研究
血脂異常也常稱作高脂血癥,一般是指血中總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C),甘油三醋(TG)超過正常范圍及(或)高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)低下。目前公認調(diào)脂最有效并廣泛應(yīng)用的調(diào)脂藥為他汀類藥物,為了達到理想的調(diào)脂效果,聯(lián)合應(yīng)用其他調(diào)脂藥物非常必要,但是聯(lián)合貝特類、煙酸類等會增加毒副作用,嚴重者可導(dǎo)致橫紋肌溶解癥的發(fā)生。
中藥治療血脂異常因其療效好、副作用小,已愈來愈受到國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注。中藥復(fù)方調(diào)脂湯,內(nèi)清外柔,化痰祛瘀,用于治療血脂異常,已在臨床上取得了較好的療效。本實驗通過動物實驗觀察中藥調(diào)脂湯對血脂異常大鼠血清和組織血脂的治療作用,為中藥治療血脂異常及相關(guān)疾病提供了新的思路及理論依據(jù)。
1.1 實驗動物 SPF級的雄性大鼠采購自軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院。
1.2 調(diào)脂湯 由吉林省中醫(yī)學(xué)院制備:山楂、葛根、萊菔子各30g,水煎取汁300ml備用。
1.3 立普妥 生產(chǎn)編號:1237325輝瑞制藥有限公司生產(chǎn)。
1.4 高脂乳劑[1]取1g丙硫氧嘧啶于乳缽中研細,備用,取豬油20g置于40度水浴加熱融化,置于乳缽中,加入10g膽固醇、1g丙硫氧嘧啶,充分攪拌,溶解。再徐徐加入10%去氧膽酸鈉水溶液20ml,并不斷攪拌,然后加入5ml吐溫-80,研磨乳化均勻,最后加蒸餾水至100ml,密閉冰箱保存,使用時先于37度水浴中融化。
1.5 主要儀器 Olympus CKX41倒置顯微鏡,LEICA Rm2245電動進樣切片機。
2.1 實驗動物分組 SPF級的雄性大鼠60只,隨機分為6組:正常組、模型組、立普妥組、調(diào)脂湯小劑量組、中劑量組、大劑量組。除了空白組外,其余各組每天灌胃高脂乳劑(1ml/100g體重),7天后采眼眶血確定造模成功,開始實驗組灌胃給藥,治療2周,各組動物最后一次灌胃后,禁食12小時,不禁水,此后取眼動脈血,分離血清處死大鼠,取出心臟、主動脈和肝臟。
2.2 檢測指標(biāo)及方法[2]
2.2.1 血清脂質(zhì)檢測
總膽固醇:酶法。
高密度脂蛋白膽固醇:硫酸葡聚糖-鎂法。
低密度脂蛋白膽固醇:十二烷基硫基硫酸鈉雙沉淀法。
甘油三酯:分溶抽提-乙酰丙酮顯色法。
磷脂:硫酸亞鐵還原法。
游離脂肪酸:一次抽提比色法。
2.2.2 組織脂質(zhì)檢測 將肝臟充分搗碎,每100mg加入2ml氯仿-甲醇(1∶1)抽提液。抽提脂質(zhì)24小時以上,測定抽提液中的脂質(zhì),膽固醇測定采用改良的單一試劑法,甘油三酯和磷脂測定同血清脂質(zhì)檢測方法。
2.2.3 病理檢查 整個主動脈用蘇丹三染色。心臟和主動脈于10%甲醛中固定,石蠟包埋,切片,HE常規(guī)染色,觀察動脈的脂質(zhì)沉淀以及狹窄程度。
2.3 統(tǒng)計學(xué)分析 測定結(jié)果采用均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差表示,
數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進行分析。
3.1 血清脂質(zhì)檢測結(jié)果 見表1。
表1 各組治療前血脂比較,mmol/L)
表1 各組治療前血脂比較,mmol/L)
TC TG LDL-C HDL-C正常對照組組別1.65±0.13 0.43±0.16 1.20±0.18 0.62±0.14高脂模型組4.95±0.65 0.68±0.13 4.35±0.59 0.62±0.13立普妥組4.96±0.68 0.65±0.14 4.36±0.64 0.62±0.15調(diào)脂湯小劑量組4.96±0.52 0.64±0.12 4.38±0.80 0.61±0.12調(diào)脂湯中劑量組4.94±0.58 0.65±0.15 4.40±0.49 0.63±0.13調(diào)脂湯大劑量組4.95±0.74 0.67±0.13 4.40±0.65 0.64±0.14
與正常對照組相比,高脂模型組、立普妥組、調(diào)脂湯小、中、大劑量組血脂各項指標(biāo)比較P<0.05,血脂改變符合飲食性高脂血癥特點。
表2 各組治療后血脂比較,mmol/L)
表2 各組治療后血脂比較,mmol/L)
TC TG LDL-C HDL-C正常對照組組別3.02±0.65 0.38±0.13 2.22±0.78 0.83±0.12 1.64±0.12 0.43±0.15 1.23±0.12 0.61±0.15高脂模型組4.77±0.63 0.62±0.15 4.25±0.54 0.57±0.12立普妥組2.97±0.56 0.38±0.14 2.56±0.57 0.64±0.12調(diào)脂湯小劑量組3.24±0.47 0.39±0.12 2.72±0.75 0.62±0.13調(diào)脂湯中劑量組3.11±0.56 0.39±0.15 2.52±0.35 0.64±0.17調(diào)脂湯大劑量組
結(jié)果顯示,調(diào)脂湯大中劑量組及立普妥劑量組治療后血清TC,TG,LDL-C降低,差異具有顯著性意義(P<0.05),調(diào)脂湯大劑量組治療后血清HDL-C顯著升高(P<0.05)。
3.2 組織脂質(zhì)檢測結(jié)果
表3 各組治療前肝臟血脂比較(,mmol/L)
表3 各組治療前肝臟血脂比較(,mmol/L)
TC TG正常對照組組別3.54±0.74 7.21±1.13 0.45±0.13 2.12±0.24高脂模型組3.54±0.86 7.25±1.24立普妥組3.52±0.77 7.21±1.15調(diào)脂湯小劑量組3.56±0.76 7.19±1.19調(diào)脂湯中劑量組3.52±0.81 7.25±1.20調(diào)脂湯大劑量組
與正常對照組相比,高脂模型組、立普妥組、調(diào)脂湯小、中、大劑量組血脂各項指標(biāo)比較P<0.05,血脂改變符合飲食性高脂血癥特點。
表4 各組治療后肝臟血脂比較(,mmol/L)
表4 各組治療后肝臟血脂比較(,mmol/L)
TC TG正常對照組組別1.61±0.12 3.88±1.13 0.41±0.13 1.89±0.24高脂模型組2.76±0.24 6.12±1.24立普妥組2.05±0.35 4.42±1.15調(diào)脂湯小劑量組2.21±0.74 4.62±1.19調(diào)脂湯中劑量組2.34±0.32 4.55±1.20調(diào)脂湯大劑量組
結(jié)果顯示,各組治療后組織TC、TG降低,差異具有顯著性意義(P<0.05),調(diào)脂湯小劑量組和調(diào)脂湯中劑量組具有相似的治療效果,調(diào)脂湯高劑量組的治療效果優(yōu)于其他治療組(P<0.05)。
3.3 病理檢查結(jié)果 大鼠治療后,取主動脈弓作組織病理檢測。肉眼觀察,各主動脈弓未見明顯異常。HE染色,鏡下觀察各例動物的組織病理改變,如表5所示,主動脈弓脂質(zhì)沉淀范圍較小,且只有輕度脂質(zhì)沉淀,空白對照組、模型對照組和各劑量治療組的主動脈弓未見病理改變。
表5 大鼠肝臟的病理表現(xiàn)(只)
調(diào)脂湯大中劑量組及立普妥劑量組治療后血清TC、TG、LDL-C降低,差異具有顯著性意義(P<0.05),調(diào)脂湯大劑量組治療后血清HDL-C顯著升高(P<0.05),說明調(diào)脂湯可以起到對血脂的調(diào)節(jié)作用。
在對肝臟血脂的影響方面,調(diào)脂湯小劑量組和調(diào)脂湯中劑量組具有相似的治療效果,調(diào)脂湯高劑量組的治療效果優(yōu)于其他治療組(P<0.05)。說明調(diào)脂湯小、中、高劑量組均對肝臟血脂有一定的調(diào)節(jié)作用。
病理方面,調(diào)脂湯對于大鼠主動脈弓脂質(zhì)沉淀范圍較小,且只有輕度脂質(zhì)沉淀,但主動脈弓未見病理改變。
[1]郭建,高福云,李宏.大鼠高脂血癥模型的改進方法[J].實驗動物科學(xué),2008,12(25):6.
[2]劉明,董超仁,蘇靜怡.一種簡便實用的大鼠高脂血癥模型[J].中國藥理學(xué)通報,1989,(5)2:43.
Experimental Research on Blood Lipid Regulation of Hyperlipidemia Rats by Chinese Medicine Tiaozhi Decoction
Jia Qiuying
(Department of Geriatrics,Affiliated Hospital,Changchun University of TCM,Changchun,130021,China)
Objective To explore fat metabolic effects,myocardial cells and aortic vascular changes of experimental hyperlipidemia rat by Chinese medicine Tiaozhi decoction.Methods 60 experimental rats were randomly divided into 6 groups,the normal group,model group,lipitor group,Tiaozhi decoction small dose group,medium dose group,high-dose group.In addition to the blank group,the rest of the group were filled the stomach with high fat emulsion every day to build hyperlipidemia animal model.After the success,the experimental group was given corresponding drugs.After treatment for 2 weeks,ophthalmic artery blood was taken and serum was separated,then to put to death the rat,take out the heart,the aorta,and liver,observes the indicators.Results Tiaozhi decoction can significantly reduce low plasma total cholesterol,triglyceride,low density lipoprotein, increase high-density lipoprotein cholesterol in the high fat model rats.Conclusion Tiaozhi decoction has improved significantly in the experimental hyperlipidemia rats;at the same time have some improvement on the aorta lipid deposition.
Chinese medicine Tiaozhi decoction,Experimental hyperlipidemia rats,Experimental research
10.3969/j.issn.1672-2779.2014.01.096
1672-2779(2014)-01-0150-02
??吳義紅 本文校對:李燚緋
2013-11-06)
吉林省科技廳青年科研基金[No:20100121]