卿 松李曉紅

1 新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科，新疆 烏魯木齊 830054；2 新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦科，新疆 烏魯木齊 830054

TGF-β1、MDM2在宮頸癌的表達(dá)及意義

卿 松1李曉紅2

1 新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科，新疆 烏魯木齊 830054；2 新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦科，新疆 烏魯木齊 830054

目的觀察宮頸癌中TGF-β1及MDM2的表達(dá)情況，研究其在宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的作用。方法在宮頸癌組（52例）及對(duì)照組（13例）內(nèi)行免疫組化檢測(cè)，觀察TGF-β1及MDM2的陽性表達(dá)情況。結(jié)果TGF-β1、MDM2在對(duì)照組及宮頸癌組內(nèi)的表達(dá)差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而在各組宮頸癌間，僅原位癌組和中低分化癌組表達(dá)差異有意義。并且發(fā)現(xiàn)TGF-β1、MDM2在宮頸癌中的表達(dá)具有正相關(guān)。結(jié)論在宮頸癌發(fā)生發(fā)展中，TGF-β1、MDM2起促進(jìn)作用。

TGF-β1；MDM2宮頸癌；免疫組化

據(jù)統(tǒng)計(jì)，每年女性惡性腫瘤死亡率中宮頸癌居第2位。而宮頸癌的發(fā)生又與多種因素緊密相關(guān)，如種族、環(huán)境、生活習(xí)慣等，分子學(xué)方面包括原癌及抑癌基因的激活和失活等［1］。轉(zhuǎn)化生長因子β1（transfoming growth factor bita1， TGF-β1）是一種特殊的細(xì)胞因子，具有多種功能，其在腫瘤的發(fā)生及發(fā)展中起著特殊的作用。MDM2（mtlrille double minute 2，鼠雙微體2）是近年來發(fā)現(xiàn)的原癌基因，它主要通過p53的負(fù)調(diào)控作用，使其在腫瘤細(xì)胞內(nèi)異常高表達(dá)，導(dǎo)致p53喪失生物學(xué)活性[2]。在本組試驗(yàn)中，行免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)并觀察TGF-β1及MDM2在宮頸癌中的表達(dá)，研究其在宮頸癌發(fā)病機(jī)制中的特定的作用。

1 一般材料

1.1 標(biāo)本來源及臨床資料

收集新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科2008～2013年宮頸癌患者的石蠟標(biāo)本和相應(yīng)的臨床資料，共52例，患者年齡從33歲到68歲，中位年齡44歲。52例宮頸癌中非浸潤性癌（原位癌）8例，浸潤型癌44例，高分化及中低分化各22例，并選用13例慢性宮頸炎患者的石蠟標(biāo)本作為對(duì)照組。

1.2 試劑、方法及判讀

TGF-β1和MDM2的一抗及二抗均購自購自DAKO公司。實(shí)驗(yàn)采用EnVision兩步法，對(duì)TGF-β1和MDM2等抗體進(jìn)行標(biāo)記，操作中緩沖液用PBS，防脫片處理，抗原修復(fù)采用微波修復(fù)。TGF-β1陽性表達(dá)部位在細(xì)胞漿，表現(xiàn)為棕黃色，不均勻顆粒狀。MDM2的陽性表達(dá)部位是細(xì)胞核或細(xì)胞漿或2者共同表達(dá)，也表現(xiàn)為棕黃色、不均勻顆粒狀。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 18.0中的卡方檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用McNemar檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 TGF-β1 在各組內(nèi)的表達(dá)情況，見表1。

如表1所示，TGF-β1在對(duì)照組及腫瘤組內(nèi)均有表達(dá)，其陽性表達(dá)率呈上升趨勢(shì)，但在宮頸癌各組內(nèi)陽性表達(dá)的程度并與不一致，在中低分化組表達(dá)最高，其在對(duì)照組和宮頸癌組中的表達(dá)差異明顯，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而在宮頸癌組間，僅原位癌組與中低分化組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 TGF-β1在對(duì)照組及宮頸癌組中的表達(dá)

2.2 MDM2在各組中的表達(dá)情況，見表2。

表2提示MDM2的表達(dá)存在不連續(xù)性，對(duì)照組和原位癌組中均未表達(dá)，其僅在浸潤性癌中表達(dá)，對(duì)照組和宮頸癌組的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而在腫瘤組內(nèi)部，非浸潤性癌與浸潤型癌差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（原位癌與中低分化癌），而浸潤型癌間（高分化與中低分化癌）差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.3 在宮頸癌中TGF-β1和MDM2的共同表達(dá)情況及相關(guān)性分析，見表3。

從表3可知，52例宮頸癌中，有6例同時(shí)表達(dá)了TGF-β1、MDM2，而17例均不表達(dá)，相關(guān)性分析提示在宮頸癌中這2個(gè)指標(biāo)相互影響，存在正相關(guān)。

3 討論

TGF-β1的分子結(jié)構(gòu)為多肽鏈，2條多肽鏈通過二硫鍵連接而成，它具有多種調(diào)節(jié)功能，可調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和分化、并且可以促進(jìn)血管的形成、同時(shí)還能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、協(xié)同細(xì)胞外基質(zhì)重建、影響間質(zhì)細(xì)胞的產(chǎn)生及機(jī)體抗腫瘤免疫等［3］。若TGF-β1過度表達(dá)，會(huì)造成細(xì)胞TGF信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路紊亂，從而導(dǎo)致蛋白的不正常表達(dá)，誘發(fā)腫瘤。相關(guān)研究提示TGF-β1的高表達(dá)與宮頸癌的發(fā)生有直接相關(guān)性，并且可以促進(jìn)腫瘤間質(zhì)細(xì)胞的纖維化，同時(shí)協(xié)助腫瘤浸潤［4］。本實(shí)驗(yàn)中TGF-β1在對(duì)照組有表達(dá)，但僅有1例，在宮頸癌組中有28例表達(dá)，在非浸潤性癌（原位癌）中有2例，而在浸潤性癌中有26例，強(qiáng)烈提示TGF-β1的表達(dá)與腫瘤病理分級(jí)密切相關(guān)，即腫瘤的分化程度越低、惡性程度越高其陽性表達(dá)率也越高。對(duì)這種結(jié)果的解釋，目前相關(guān)研究提示可能跟腫瘤細(xì)胞表面的TGF-β受體有關(guān)，主要是受體的表達(dá)缺失或功能的喪失，由于不能有效識(shí)別抗體，導(dǎo)致細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路阻滯，造成病變細(xì)胞的異常增生，呈現(xiàn)失控性生長，而在病變細(xì)胞周圍的正常細(xì)胞，由于信號(hào)傳導(dǎo)通路正常，受TGF-β的生長抑制作用，呈現(xiàn)有序性生長，從而使病變細(xì)胞獲得了更多的生長優(yōu)勢(shì)，最終誘發(fā)腫瘤的形成，并隨著腫瘤的進(jìn)展而進(jìn)一步演進(jìn)。

在胚胎發(fā)育及正常人體內(nèi)，MDM2嚴(yán)格控制著腫瘤抑制因子p53的活性，而MDM2在癌中的高表達(dá)，代表p53抑制腫瘤生長能力的下降。MDM2蛋白二聚體與p53結(jié)合，從而形成了蛋白復(fù)合物p53-mdm2，而p53-mdm2蛋白復(fù)合物能夠抑制p53活性，致腫瘤發(fā)生［5］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明MDM2的表達(dá)存在明顯的階段性，即在正常宮頸和腫瘤早期階段（原位癌）均不表達(dá)，但在腫瘤發(fā)展為浸潤型癌時(shí)呈高表達(dá)，說明MDM2的表達(dá)同腫瘤病理分級(jí)呈也成正相關(guān)，并提示MDM2在腫瘤發(fā)生的早期階段，MDM2本身不直接參與而是通過改變信號(hào)通路誘導(dǎo)及促進(jìn)腫瘤的發(fā)生，但隨著腫瘤的進(jìn)展，其直接參與腫瘤的發(fā)展進(jìn)程。

本組研究顯示TGF-β1和MDM2的陽性表達(dá)率在宮頸癌中均呈逐漸增高的趨勢(shì)，提示在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中兩者可能有相互促進(jìn)的作用，存在一定的正相關(guān)性，故聯(lián)合檢測(cè)TGF-β1、MDM2的表達(dá)，對(duì)宮頸癌的早期診斷及臨床對(duì)預(yù)后的判斷有一定的幫助作用。

表2 MDM2在對(duì)照組及宮頸癌中的表達(dá)

表3 TGF-β1和MDM2在宮頸癌中共同表達(dá)及相關(guān)性分析

參考文獻(xiàn)

［1］Seo MJ，Bae SM，Kim YW，et al．New approaches to pathogenic gene function discovery with human squamous cell cervical carcinoma by gene ontology［J］．Gynecol Oncol，2005，96（3）：621-629．

［2］Michael D，Oren M ．The p53-Mdm2 module and the ubiquitin system［J］．Semin Cancer Biol，2003，13（1）：49-58

［3］宋利，孟斐．Smad4蛋白及TGF-β1在子宮頸癌組織中的表達(dá)及意義［J］．中國實(shí)用醫(yī)藥，2012，7（10）：148-149

［4］章麗霞，劉鈞，黃一凡，等．TGF-β1和ERK2蛋白在宮頸癌中的表達(dá)和意義［J］．西部醫(yī)學(xué)，2011，23（5）：828-831

［5］Dolezelova P，Cetkovska K，Vousden KH，et al．Mutational analysis of Mdm2 C-terminal tail suggests an evolutionarily conserved role of its length in Mdm2 activity toward p53 and indicates structural differences between Mdm2 homodimers and Mdm2/MdmX heterodimers［J］．Cell Cycle，2012，11（5）：953-962

R737．33

B

1674-9316（2014）15-0032-03

10．3969/J．ISSN．1674-9316．2014．15．020