李青松,吳起成

(江蘇省昆山市中醫(yī)醫(yī)院藥劑科,昆山 215300)

狼毒大戟化學(xué)成分的研究

李青松,吳起成

(江蘇省昆山市中醫(yī)醫(yī)院藥劑科,昆山 215300)

目的 對(duì)狼毒大戟的化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)研究。方法采用乙醇冷浸提取方法,經(jīng)乙酸乙酯、正丁醇分步萃取,利用硅膠柱色譜柱層析和重結(jié)晶等方法對(duì)兩個(gè)部分進(jìn)行分離純化,依據(jù)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)鑒定化學(xué)結(jié)構(gòu)。結(jié)果從狼毒大戟的乙酸乙酯部位得到狼毒乙素(Ⅰ)、2,4-羥基-6-甲氧基苯乙酮(Ⅱ)、東莨菪亭(Ⅲ)、東莨菪苷(Ⅳ)、二十四烷酸(Ⅴ)、丁香酸(Ⅵ)、正丁醇部位得到蔗糖(Ⅶ)。結(jié)論化合物Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ為首次從狼毒大戟中分離得到。

狼毒大戟;化學(xué)成分;物質(zhì)基礎(chǔ)

狼毒大戟為大戟科大戟屬(Euphorbia)植物狼毒大戟Euphorbia fischerianaSteud.的干燥塊根,為常用的峻下逐水藥,主治水腫,淋巴結(jié)、皮膚、骨、副睪等結(jié)核等。同時(shí)也表現(xiàn)出對(duì)皮膚、口腔及胃腸道黏膜強(qiáng)烈的刺激性和致炎、促發(fā)致癌的毒性作用。這些毒性嚴(yán)重制約其臨床的用藥安全,也為新藥創(chuàng)制帶來(lái)了困難?，F(xiàn)代研究表明狼毒大戟具有雙重生理活性,雖然毒性強(qiáng)烈,然而在抗菌、抗病毒、抗結(jié)核、抗腫瘤以及免疫等方面表現(xiàn)較好的藥理活性[1-2]。近期研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)狼毒大戟中含有特有化學(xué)成分[3]。因此對(duì)狼毒大戟進(jìn)行化學(xué)成分的研究,闡明其毒性物質(zhì),對(duì)該藥材的臨床安全有效的使用和深入研究開發(fā)具有十分重要的意義。

1 試藥與儀器

1.1 試藥 狼毒大戟藥材2008年10月采于黑龍江齊齊哈爾市龍江縣龍興鎮(zhèn),經(jīng)齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院郭麗娜教授鑒定為大戟科大戟屬植物狼毒大戟(Euphorbia fischerianaSteud.)的塊根。藥材標(biāo)本(No.NJUTCM-20081028)存放于南京中醫(yī)藥大學(xué)標(biāo)本館。

1.2 儀器 Bruker Avance AV500/300型核磁共振儀(TMS為內(nèi)標(biāo));Waters Q-Tof micro YA019型質(zhì)譜儀; WRS-1B型數(shù)字熔點(diǎn)測(cè)定儀(溫度未校正);薄層層析及柱層析硅膠均為青島海洋化工廠生產(chǎn);試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 提取和分離 稱取狼毒大戟藥材14.2 kg,加6倍量95%乙醇在室溫下冷浸72 h,期間每隔12 h攪拌一次,傾倒出藥液,過(guò)濾得到澄清冷浸藥液。將藥液減壓濃縮至不含乙醇,得到狼毒大戟乙醇提取物浸膏。重復(fù)上述步驟冷浸5次,合并濃縮液浸膏。加水混懸后,依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取,重復(fù)4次,分別合并萃取液并經(jīng)減壓濃縮,得到乙酸乙酯部分浸膏(915.9 g)、正丁醇部分浸膏(220.6 g)。取乙酸乙酯部分浸膏800.0 g,進(jìn)行硅膠分離,以石油醚-乙酸乙酯-甲醇系統(tǒng)[(100∶0∶0)～(0∶50∶50)]進(jìn)行梯度洗脫,共得到20個(gè)流份Fr.1～Fr.20。流份Fr.3(石油醚∶乙酸乙酯=2∶1)經(jīng)反復(fù)硅膠分離得到化合物5(50 mg)。流份Fr.8(石油醚∶乙酸乙酯=1∶1)反復(fù)硅膠柱分離、重結(jié)晶得到化合物1(40 mg)、化合物2 (60 mg)。流份Fr.14(石油醚∶乙酸乙酯=1∶4)反復(fù)硅膠柱分離、重結(jié)晶得到化合物3(120 mg)。流份Fr.18(乙酸乙酯∶甲醇=5∶1)反復(fù)硅膠柱分離、重結(jié)晶得到化合物4(20 mg)、化合物6(20 mg)。取正丁醇部分浸膏160.0 g,進(jìn)行硅膠分離,以乙酸乙酯-甲醇系統(tǒng)[(100∶0)～(50∶50)]進(jìn)行梯度洗脫,共得到8個(gè)流份Fr.1～Fr.8,流份Fr.4(乙酸乙酯∶甲醇=4∶1)重結(jié)晶得到化合物7(900 mg)。

2.2 結(jié)構(gòu)鑒定

2.2.1 化合物1 白色針晶(EtOAc)。1H-NMR (CDCl3,500 MHz)δ:14.26(1H,s,4-OH),5.91(1H, s,H-5),3.84(3H,s,6-OCH3),2.61(3H,s,1-COCH3),2.05(3H,s,CH3-3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]報(bào)道一致,故鑒定化合物1為狼毒乙素。

2.2.2 化合物2 黃色粉末(MeOH)。ESI-MSm/z: 183[M+H]+。1H-NMR(DMSO-d6,500 MHz)顯示有10個(gè)氫,其中兩個(gè)酚羥基質(zhì)子信號(hào)δ:13.80(1H,s,2-OH與C=O形成分子內(nèi)氫鍵),10.59(1H,s,4-OH),兩個(gè)與苯環(huán)質(zhì)子信號(hào)δ:5.97(1H,d,J=2.2Hz,H-3),5.87 (1H,d,J=2.2Hz,H-5),其余為2.51(3H,s,1-COCH3),3.82(3H,s,6-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5]報(bào)道一致,故鑒定化合物2為2,4-羥基-6-甲氧基苯乙酮(2,4-dihydroxy-6-methoxy-1-acetophenone)。

2.2.3 化合物3 淺黃色針晶(EtOAc)。紫外燈下顯藍(lán)色熒光。ESI-MS m/z:191[M-H]-。1H-NMR(CDCl3, 300 MHz)δ:7.61(1H,d,J=9.3 Hz,H-4),6.91(1H, s,H-8),6.85(1H,s,H-5),6.27(1H,d,J=9.5 Hz,H-3),6.18(1H,s,7-OH),3.95(3H,s,CH3O-),13C-NMR (CDCl3,125 MHz)δ:161.30(C-2),150.28(C-7), 149.75(C-9),144.05(C-6),143.26(C-4),113.40(C-10),111.49(C-3),107.54(C-5),103.20(C-8),56.43 (CH3O)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]報(bào)道一致,故鑒定化合物3為東莨菪亭(scopoletin)。

2.2.4 化合物4 白色結(jié)晶型粉末(MeOH)。1H-NMR(DMSO-d6,500 MHz)δ:7.96(1H,d,J= 10.0 Hz,H-2),7.30(1H,s,H-8),7.16(1H,s,H-5), 6.32(1H,d,J=9.5Hz,H-8),5.29(1H,d,J=3.5Hz, H-1'),3.82(3H,s,CH3O-),13C-NMR(DMSO-d6, 125 MHz)δ:160.62(C-2),150.08(C-2),149.08(C-9),146.15(C-6),144.31(C-4),113.44(C-3),112.40 (C-10),109.91(C-5),103.19(C-8),99.80(C-1'), 77.27(C-3'),76.90(C-5'),73.21(C-2'),69.77 (C-4'),60.81(C-6'),56.20(CH3O-)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]報(bào)道一致,故鑒定化合物4為東莨菪苷(scopolin)。

2.2.5 化合物5 白色針晶(Pet/EtOAc),熔點(diǎn)(mp) 67～68℃,溴酚藍(lán)反應(yīng)顯黃色。1H-NMR(CDCl3,500 MHz)δ:10.48(1H,br.s,COOH),2.35(2H,t,J= 6.6 Hz,H-2),1.63(2H,m,H-3),1.26(40H,m,H-4-23),0.88(3H,t,J=7.0 Hz,H-24)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]報(bào)道一致,故鑒定化合物5為二十四烷酸(tetracosanoic acid)。

2.2.6 化合物6 白色針晶。ESI-MSm/z:197 [M-H]-,1H-NMR(CDCl3,500 MHz):7.57(1H,s,H-2),4.17(3H,s,CH3O-)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]對(duì)照基本一致,故鑒定化合物6為丁香酸(syringic acid)。

2.2.7 化合物7 白色方晶(MeOH),熔點(diǎn)170～172℃。Molisch反應(yīng)呈陽(yáng)性。經(jīng)與蔗糖對(duì)照品薄層比較,Rf值及顯色行為一致,與蔗糖對(duì)照品混合后,熔點(diǎn)不下降,故鑒定化合物7為蔗糖(sucrose)。

3 討論

筆者在本研究共分離得到7種化合物,通過(guò)結(jié)構(gòu)鑒定和文獻(xiàn)檢索,其中東莨菪苷(化合物4)、二十四烷酸(化合物5),丁香酸(化合物6),正丁醇部位得到蔗糖(化合物7)首次從狼毒大戟分離得到。

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DOI 10.3870/yydb.2014.10.016

R282.71

A

1004-0781(2014)10-1319-02

2013-09-25

2014-02-13

李青松(1971-),男,江蘇昆山人,副主任中藥師,學(xué)士,研究方向:醫(yī)院藥學(xué)。電話:(0)13862624371,E-mail:liqinsong99@126.com。