毛戰(zhàn)勝 楊婧芳(河南省安陽(yáng)市畜牧局 河南安陽(yáng)455000)
雞傳染性法氏囊病是由傳染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的一種急性、高度接觸性的免疫抑制性疾病,1957年由Gosgrove在美國(guó)首次發(fā)現(xiàn),1980年以后該病傳入我國(guó)并大面積暴發(fā)和持續(xù)流行,成為對(duì)養(yǎng)雞業(yè)危害較大的疫病。本文就IBD的診斷及防制研究進(jìn)展作一簡(jiǎn)述。
取發(fā)病雞的法氏囊和脾,經(jīng)研磨后制成懸液,接種到9~12日齡的SPF雞胚絨毛尿囊膜上,受感染的雞胚在3~5天死亡,可見(jiàn)到被接種的胚胎水腫、出血,最后用已知的陽(yáng)性血清在雞胚或雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)物上做中和試驗(yàn)來(lái)鑒定該病毒。
利用血清學(xué)試驗(yàn)診斷IBD方法多,特異性強(qiáng),陽(yáng)性檢出率高,這方面的研究和報(bào)道較多。常用的方法有瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)(AGP)、病毒中和試驗(yàn)(VN)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。
1968年Wagner等首次運(yùn)用AGP試驗(yàn)檢測(cè)傳染性法氏囊病病毒IBDV。該法試驗(yàn)操作簡(jiǎn)單方便,無(wú)需昂貴的儀器,并且能區(qū)分血清Ⅰ型和血清Ⅱ型,但其敏感性較低。VN法是公認(rèn)的衡量體液免疫的最佳方法,準(zhǔn)確性、敏感性相對(duì)較高,且能夠測(cè)定交叉保護(hù)中和抗體的滴度,缺點(diǎn)是耗時(shí)、費(fèi)力,需無(wú)菌操作,難用于生產(chǎn)中大規(guī)模檢測(cè),目前較少有人用這種方法做常規(guī)檢測(cè)。ELISA是目前應(yīng)用最廣的方法,具有操作簡(jiǎn)單、特異性強(qiáng)、敏感性強(qiáng)及重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),是大規(guī)模檢測(cè)抗體或抗原的理想方法。朱紅利用抗IBDV的單克隆抗體建立了夾心阻斷ELISA,用以檢查血清抗體,并與AGP和VN試驗(yàn)進(jìn)行了比較,結(jié)果表明,夾心ELISA的敏感性超過(guò)VN試驗(yàn),更遠(yuǎn)勝于AGP試驗(yàn)。
近年來(lái),隨著一些具有更高敏感性和特異性的分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,許多新的、快速高效的診斷和檢測(cè)IBDV的方法被建立并應(yīng)用于臨床。蘇衛(wèi)等選擇IBDV基因中A片段的3個(gè)各為20bp的片斷,分別合成引物V1、V2和V3,利用PCR直接檢測(cè)IBDV,可快速、特異及敏感地檢測(cè)出實(shí)驗(yàn)室毒株和雞法氏囊內(nèi)存在的微量核酸。姜平等成功地建立了擴(kuò)增IBDV VP2和VP3基因的RT-PCR方法,獲得4個(gè)IBDV野毒株VP2和VP3基因,為IBDV的分子生物學(xué)研究奠定了基礎(chǔ)。王永強(qiáng)等在PCR的基礎(chǔ)上建立的IBDV熒光定量PCR檢測(cè)方法,可敏感地檢測(cè)初始模板中30個(gè)拷貝的病毒核酸,其靈敏度是常規(guī)RF-PCR檢測(cè)方法的100倍。另外,核酸探針技術(shù)是20世紀(jì)80年代發(fā)展起來(lái)的一種分子生物學(xué)診斷技術(shù),20世紀(jì)90年代用于IBD的診斷,具有特異性強(qiáng)、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn),尤其適用于IBD的早期診斷。
疫苗接種是預(yù)防IBD的最重要方法。目前使用的疫苗有兩大類,即活毒疫苗和滅活疫苗。常用的活毒疫苗分為強(qiáng)毒株活苗、中等毒力株活苗及弱毒力株活苗。目前使用較多的是中等毒力株活疫苗,如 S-706、LKT、TAD-Y、BJ836、D-78 和 S-706 等,中等毒力疫苗接種后有可逆性損傷,但不影響法氏囊的發(fā)育,也不會(huì)引起免疫抑制。滅活疫苗多以細(xì)胞培養(yǎng)強(qiáng)毒或發(fā)病的法氏囊和脾組織滅活后制成油乳劑疫苗,對(duì)傳染性法氏囊病有較好的預(yù)防作用。滅活苗目前主要是用于種雞在產(chǎn)蛋前進(jìn)行免疫,提高雛雞母源抗體水平,防止雛雞早期感染。黃建文對(duì)不同IBD疫苗免疫效果進(jìn)行比較,認(rèn)為IBD滅活疫苗是預(yù)防IBD最有效的疫苗。
1986年超強(qiáng)毒株的出現(xiàn)使預(yù)防免疫形勢(shì)發(fā)生了較大的變化,人們開(kāi)始著手研制用于防治雞IBD的新型疫苗,如基因工程脫毒活疫苗、抗原抗體復(fù)活疫苗、重組亞單位疫苗、重組活載體疫苗及高壓力失活疫苗等,目前這些疫苗與傳統(tǒng)疫苗相比還不同程度存在一定的缺陷。
本病一旦發(fā)生沒(méi)有特效藥物進(jìn)行治療。對(duì)于發(fā)病雞場(chǎng)要將病雞隔離,病死雞及時(shí)采取無(wú)害化處理,同時(shí)積極采取相應(yīng)的補(bǔ)救措施,可以減輕經(jīng)濟(jì)損失。
2.2.1 對(duì)癥治療
加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,嚴(yán)格衛(wèi)生消毒,減少應(yīng)激因素。根據(jù)本病的病理過(guò)程,針對(duì)出血和腎功能減退進(jìn)行對(duì)癥治療,如飲用腎腫解毒藥、電解多維和維生素C,在飼料中添加抗生素防止繼發(fā)感染等,以達(dá)到縮短病程和減少死亡的目的。
2.2.2 注射卵黃抗體
溫建新試驗(yàn)和臨床應(yīng)用研究表明,當(dāng)雞群發(fā)生傳染性法氏囊病自然感染時(shí)使用高免卵黃抗體,能中和病毒,療效在90%以上。陸峰的試驗(yàn)認(rèn)為卵黃抗體在治療時(shí)關(guān)鍵要掌握時(shí)機(jī),治療越早,治愈率越高。在其試驗(yàn)中,早期治療組50只雞,治愈率為100%,中期治療組100只,治愈率為95%,后期治療組治愈率僅為80%。
2.2.3 中藥療法
目前應(yīng)用中藥防治雞傳染性法氏囊病成為許多學(xué)者研究的熱點(diǎn)。陳如明等應(yīng)用中藥方劑,進(jìn)行傳染性法氏囊病強(qiáng)毒攻擊試驗(yàn),保護(hù)率為95%。余建國(guó)應(yīng)用黃芪多糖懸液注射3日齡雛雞,傳染性法氏囊病的發(fā)病率和死亡率顯著降低。祝國(guó)強(qiáng)等應(yīng)用黃連解毒湯方劑對(duì)人工致病的傳染性法氏囊病的治愈率為83.3%,臨床治療治愈率為90.2%。據(jù)李華平、趙永福等報(bào)道,中草藥如蒲公英、金銀花、艾葉、大青葉和板藍(lán)根等對(duì)該病治愈率較高。
在養(yǎng)雞業(yè)規(guī)模不斷擴(kuò)大的今天,IBD的危害依然嚴(yán)重,尤其是雞傳染性法氏囊病病毒的變異和超強(qiáng)毒株的出現(xiàn),給從事飼養(yǎng)、繁殖和疫病防治工作者帶來(lái)了更大的難題。因此,需要更深入地研究雞傳染性法氏囊病的診斷和疫病防制工作,從而使雞傳染性法氏囊病得以更有效的控制。
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