馬云云，張 雷，石炳娟

（1.濰坊市食品藥品檢驗(yàn)所，山東濰坊261041；2.山東省食品藥品檢驗(yàn)所，山東濟(jì)南250100）

HS－GC法檢查制劑中的乙醇含量

馬云云1，張 雷2，石炳娟1

（1.濰坊市食品藥品檢驗(yàn)所，山東濰坊261041；2.山東省食品藥品檢驗(yàn)所，山東濟(jì)南250100）

目的建立頂空－氣相色譜儀檢查中成藥制劑的乙醇含量檢測方法。方法取適量試樣加入頂空瓶中，用頂空自動進(jìn)樣器注入帶FID檢測器的氣相色譜儀進(jìn)行檢測，外標(biāo)法定量。結(jié)果乙醇在10%～30%濃度范圍內(nèi)與峰面積的線性關(guān)系良好，r＝0.999 79，同一濃度6份試樣的峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.85%，加標(biāo)回收率為100%±2%。結(jié)論該法操作簡便、清潔高效、結(jié)果可靠。

頂空－氣相色譜；乙醇含量；制劑

酒劑、搽劑、酊劑、流浸膏劑等用乙醇提取或溶解而制成的液體制劑，應(yīng)檢查乙醇量。目前化驗(yàn)室中進(jìn)行乙醇含量檢查是向GC中直接注入多倍稀釋后的試樣水溶液［1］，這樣可能會損壞強(qiáng)極性的毛細(xì)柱［2，3］，沒有凈化步驟可能會污染進(jìn)樣口的襯管，供試品若比較黏滯還會損壞進(jìn)樣針，尤其是使用自動進(jìn)樣器，可能會導(dǎo)致微量注射器推桿彎折。為避免直接進(jìn)樣的弊端，更方便地檢查乙醇含量，參照殘留溶劑的檢測方法，建立HS－GC測定乙醇含量的方法。

1 儀器與試藥

Turbomatrix 16位頂空自動進(jìn)樣器（PE公司，美國），GC2010型氣相色譜儀，配有FID檢測器，（30 m×0.32 mm，0.25μm）的鍵合交聯(lián)聚乙二醇為固定液DB－WAX毛細(xì)管柱（日本島津公司），以N2為載氣；QL型純凈空氣泵（濟(jì)南應(yīng)用化工科技有限公司）；H2純度99.99%（濰坊市氧氣廠）。無水乙醇（分析純，萊陽精細(xì)化工公司）；試驗(yàn)用水為超純水（電阻18.25 MΩ·cm－1）。

2 方法與結(jié)果

2.1 頂空及色譜條件 HS進(jìn)樣口壓力為88 kPa，樣品在55℃加熱7 min，進(jìn)樣針與傳輸線均為60℃，加壓1 min，進(jìn)樣量為0.06 mL，抽樣0.5 min，循環(huán)9 min；GC柱流速設(shè)為2 mL·min－1，柱溫在60℃保持8 min，進(jìn)樣口溫度為200℃，分流比設(shè)為30∶1，開啟載氣節(jié)省，檢測器溫度為250℃，H2：Air設(shè)為35∶450，尾吹為3 mL·min－1（頂空加熱可與色譜分析時(shí)間重疊，即除第一針樣耗時(shí)17 min外，其后的試樣皆耗時(shí)9 min）。

2.2 溶液的制配

2.2.1 供試品溶液制備 制劑可直接作為供試品溶液，如果濃度過高可稀釋后再上機(jī)檢測，每次取5 mL移入頂空瓶中。應(yīng)用本法檢測骨友靈搽劑和藿香正氣水兩種中藥制劑，二者的氣相色譜圖如圖1所示，乙醇峰形尖銳對稱，理論塔板數(shù)分別達(dá)到

43 335和49 434，拖尾因子分別為0.862和0.878，均可滿足檢測要求。

圖1 氣相色譜圖 A.骨友靈搽劑；B.藿香正氣水

2.2.2 對照品溶液制備 取適量無水乙醇，再加水補(bǔ)足至5 mL移入頂空瓶中，作為標(biāo)準(zhǔn)溶液，依次放置于頂空進(jìn)樣盤上，編制序列依次進(jìn)樣檢測。標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖如圖2所示，乙醇峰保留時(shí)間為4.190 min。

圖2 20%的乙醇水溶液氣相色譜圖

2.3 線性關(guān)系的考察 以外標(biāo)法進(jìn)行定量計(jì)算。配置10%、15%、20%、25%、30%五個(gè)濃度進(jìn)行檢測并擬合，得到的曲線相關(guān)系數(shù)為0.999 79，表明在此濃度范圍內(nèi)濃度與響應(yīng)值之間具有穩(wěn)定良好的正相關(guān)性，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y＝18 504 718X＋395 336。

2.4 精密度及試樣含量 取6份10%的乙醇水溶液各5 mL分別進(jìn)樣，得到6個(gè)峰面積的RSD為1.85%，精密度符合要求，表明方法的重復(fù)性良好。再取6份同樣的試樣得到的檢測結(jié)果的RSD為1.92%，表明實(shí)驗(yàn)方法的中間精密度良好。

2.5 加標(biāo)回收率試驗(yàn) 取3份藿香正氣水各1 mL，編為1＃、2＃、3＃，分別向3份供試品中加入0.2、0.5、1.0 mL無水乙醇，再加水補(bǔ)足至5 mL，稀釋了5倍。3份供試品溶液中的乙醇加標(biāo)水平分別為29.9%、51.5%、68.0%。每份加標(biāo)水平各檢3個(gè)平行樣，結(jié)果如表1所示。

表1 藿香正氣水加標(biāo)回收率

不同加標(biāo)量的回收率均在100%±2%內(nèi)，表明方法準(zhǔn)確度良好。

2.6 樣品測定 骨友靈搽劑取2份各5 mL至頂空瓶中，分別檢測3次。藿香正氣水也取2份各2.5 mL至頂空瓶，再各加入2.5 mL H2O，也分別檢測3次，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示，兩種中藥制劑的檢測濃度均符合藥典規(guī)定，且它們的兩份平行樣的RSD都低于2.0%，表明本法檢測試樣的精密度符合質(zhì)控要求。4份供試品毎間隔1 h進(jìn)樣，共3次的峰面積的RSD均小于2%，表明樣品溶液在2 h內(nèi)穩(wěn)定。

表2 兩種中藥制劑的檢測濃度及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差

取骨友靈搽劑2 mL，用水稀釋至10 mL，再取1 mL用水稀釋至100 mL，作為供試品溶液。配制0.02%、0.03%、0.04%、0.05%、0.06%的乙醇水溶液，分別取1μL注入氣相色譜儀測定，以外標(biāo)法計(jì)算，該檢品的乙醇含量為24.0%。

3 討論

3.1 方法優(yōu)點(diǎn) 通過頂空的方式將供試品中可揮發(fā)成分以氣相注入GC中，比向GC中直接注入液相供試品更潔凈，降低了對襯管的污染和色譜柱的損耗，也縮短了GC分析時(shí)間。

采用外標(biāo)法定量，與內(nèi)標(biāo)法相比外標(biāo)法不需內(nèi)標(biāo)物而只需配置對照品，曲線線性范圍內(nèi)可方便地計(jì)算各種濃度的試樣，在實(shí)際工作中各種制劑的乙醇含量范圍從16%～80%，低于30%的試樣可直接取樣檢測，高于30%的稀釋2～3倍即可檢測。

3.2 結(jié)論 建立中藥制劑的頂空氣相色譜法檢查乙醇含量的方法，此法操作簡便、準(zhǔn)確可靠、清潔高效，可用于控制中藥制劑的質(zhì)量。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版（一部）［S］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄54.

［2］丁俊凱，李柏林.毛細(xì)管氣相色譜柱的保養(yǎng)與維護(hù)［J］.刑事技術(shù)，2001，4：37～40.

［3］蔣雷，蔣玉梅，宋非.GC法測定辣椒堿中環(huán)己烷、乙醇、乙酸乙酯殘留量［J］.齊魯藥事，2012，31（6）：347－348.

Determination of alcohol in tincture by HS－GC

MA Yun-yun1，ZHANG Lei2，SHI Bing-juan1
（1．Weifang Institute for Food and Drug Control，Weifang 261041，China；2．Shandong Institute for Food and Drug Control，Jinan 250100，China）

ObjectiveTo establish a monitoring method for the determination of alcohol in Chinese medicine tincture by HS－GC.MethodsAppropriate amount sample was infunded into headspace bottle and then injected into gas chromatograph with FID detecteor by headspace automatic sampler.Quantitation was tested by external standard method.ResultsThe linear range of alcohol was 10%～30%，r＝0.999 79.The RSD of 6 same samples was 1.85%and the recovery rate was 100%±2%.ConclusionThe method was convenient，cleaning，high performance and reliable.

HS－GC；Alcohol content；Tincture

R927.11

A

2095－5375（2014）01－0019－003

馬云云，女，研究方向：色譜分析，E－mail：mayunyun2010＠163.com