楊 明，賈晶媛，李丹丹，齊永志

Sysmex XE-2100全自動血液分析儀的性能驗(yàn)證

楊 明，賈晶媛，李丹丹，齊永志

目的：通過對Sysmex XE-2100全自動血液分析儀進(jìn)行性能驗(yàn)證，了解和掌握該儀器的精密度、正確度、線性、攜帶污染率、功能靈敏度、可稀釋范圍、參考區(qū)間及手動與自動進(jìn)樣模式結(jié)果比對的性能。方法：以國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會、臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會制定的評價方案為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評價試驗(yàn)。結(jié)果：全血細(xì)胞計數(shù)精密度、正確度、線性良好，攜帶污染率低，功能靈敏度符合要求，可稀釋范圍回收率良好，參考區(qū)間適用。2種進(jìn)樣模式相關(guān)性好，與手工法白細(xì)胞分類結(jié)果比較，中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜酸性細(xì)胞的γ值均達(dá)0.9以上。異常細(xì)胞檢測能力總有效性為95.4%。結(jié)論：Sysmex XE-2100全自動血液細(xì)胞分析儀各方面性能良好、測定準(zhǔn)確可靠，可快速、有效地完成大批量標(biāo)本的篩檢。

全自動血液分析儀；性能驗(yàn)證；精密度；攜帶污染率

0 引言

醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的專用準(zhǔn)則ISO15189《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的專用要求》要求申請認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對設(shè)備、檢測系統(tǒng)或方法的主要分析性能進(jìn)行驗(yàn)證，證實(shí)其能夠達(dá)到臨床檢測所要求的標(biāo)準(zhǔn)[1]。本實(shí)驗(yàn)室參考國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會、美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會的相關(guān)性能評價文件，以一般健康人群或一般住院人群的EDTA-K2抗凝血為研究對象[2]，對Sysmex XE-2100血液分析儀進(jìn)行性能評價實(shí)驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

儀器為日本SYSMEX公司生產(chǎn)的XE-2100血液分析儀。所用試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品均為該儀器的配套產(chǎn)品。

1.2 樣本

樣本EDTA-K2抗凝靜脈血來自我院正常體檢人群和部分住院患者血常規(guī)標(biāo)本，標(biāo)本采集操作按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第三版進(jìn)行[3]。

1.3 方法

（1）批內(nèi)精密度實(shí)驗(yàn)。使用配套質(zhì)控品進(jìn)行精密度實(shí)驗(yàn)，將2份不同濃度的檢測標(biāo)本隨機(jī)插入患者標(biāo)本中檢測，同一批次連續(xù)測定20次。

（2）日間精密度實(shí)驗(yàn)。每天檢測2個濃度的質(zhì)控品1次，連續(xù)檢測20 d。通常以1/3 TEa為可接受限。

（3）正確度評估。根據(jù)衛(wèi)生部臨檢中心室間質(zhì)評結(jié)果，用本實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)結(jié)果與相應(yīng)的靶值計算相對偏倚，即：相對偏倚＝（測定值－均值）/均值× 100%；同時，計算10個樣本的平均偏倚，作為該項(xiàng)目的正確度數(shù)據(jù)，平均偏倚2=（偏倚均值/2）2+偏倚標(biāo)準(zhǔn)差，平均偏倚2＜＜1/2最大允許誤差為合格。

（4）線性范圍驗(yàn)證。選取高濃度樣本，應(yīng)盡可能接近廠家聲明的可報告范圍高限，分別按100%、80%、60%、40%、20%和0%的比例進(jìn)行稀釋，其中0%為空白管。每個濃度樣本重復(fù)檢測4次，記錄分析結(jié)果。計算回歸方程y=bx+a，如滿足斜率b在

0.95～1.05之間和R2＞0.95，則線性驗(yàn)證合格。

（5）攜帶污染率。取高濃度標(biāo)本連續(xù)測定3次，測定值分別為H1、H2、H3；再取低濃度標(biāo)本連續(xù)測定3次，測定值分別為L1、L2、L3。攜帶污染率=（L1-L3）/（H3-L3）×100%，攜帶污染率＜1%為合格。

（6）功能靈敏度。將標(biāo)本稀釋至試劑說明書提供的功能靈敏度處，即WBC：0.41×109/L，RBC：0.23× 1012/L，HGB：6.93 g/L，PLT：9.28×109/L；連續(xù)檢測10次，計算均值和變異系數(shù)CV。檢測項(xiàng)目的功能靈敏度處CV＜20%。判斷標(biāo)準(zhǔn)：CV接近且小于20%的濃度即為該項(xiàng)目的功能靈敏度。

（7）可稀釋范圍。選取線性范圍驗(yàn)證的上限水平的標(biāo)本作為稀釋度驗(yàn)證的驗(yàn)證材料，將樣本進(jìn)行5倍稀釋，每個樣本重復(fù)檢測3次。將實(shí)測濃度與稀釋后的預(yù)期濃度相比較，計算回收率（R）。80%≤R≤120%，屬可接受稀釋倍數(shù)，進(jìn)行該項(xiàng)驗(yàn)證時需驗(yàn)證所需最高稀釋倍數(shù)。

（8）生物參考區(qū)間驗(yàn)證。選擇體檢合格的健康男性和女性各20份樣本對參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證，95%以上個體的檢測結(jié)果在現(xiàn)行生物參考區(qū)間內(nèi)為合格。

（9）比對試驗(yàn)。此項(xiàng)驗(yàn)證是針對XE-2100手動和自動進(jìn)樣2種模式的比較，選擇40份患者標(biāo)本，按照美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會EP9-A 文件進(jìn)行操作。

（10）與顯微鏡人工白細(xì)胞分類比較。主要比較二者的可測定范圍及相關(guān)性，并計算相關(guān)系數(shù)。

（11）評估異常白細(xì)胞檢測能力。評估異常白細(xì)胞檢測能力包括以下幾個指標(biāo)：敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值及總有效率。敏感度（%）=[真陽性（/真陽性+假陰性）]×100%；特異度（%）=[真陰性（/假陽性+真陰性）]×100%；陽性預(yù)測值（%）=[真陽性（/真陽性+假陽性）]×100%；陰性預(yù)測值（%）=[真陰性（/真陰性+假陰性）]×100%；總有效率（%）=[真陽性+真陰性/N]×100%。

2 結(jié)果

（1）各項(xiàng)目精密度結(jié)果及判定標(biāo)準(zhǔn)見表1～2，各項(xiàng)目不精密度均在CLIA′88允許范圍之內(nèi)。

（2）正確度評估見表3。

（3）線性范圍驗(yàn)證見表4、如圖1～5所示。

（4）攜帶污染率見表5。

（5）功能靈敏度見表6。

（6）比對試驗(yàn)見表7。

（7）與顯微鏡人工分類比較，結(jié)果為：中性粒細(xì)胞（N）、淋巴細(xì)胞（L）、單核細(xì)胞（M）和嗜酸性粒細(xì)胞（E）的分類相關(guān)性較好，而嗜堿性粒細(xì)胞（B）的分類相關(guān)性較差，見表8。

（8）異常白細(xì)胞檢測能力，見表9。

表1 各項(xiàng)目批內(nèi)精密度結(jié)果

表2 各項(xiàng)目日間精密度結(jié)果

表3 各項(xiàng)目正確度結(jié)果

表4 各項(xiàng)目線性范圍結(jié)果

圖1 WBC回歸分析圖

圖2 RBC回歸分析圖

圖3 HGB回歸分析圖

圖4 HCT回歸分析圖

圖5 PLT回歸分析圖

表5 各項(xiàng)目攜帶污染率結(jié)果

表6 各項(xiàng)目功能靈敏度結(jié)果

表7 各項(xiàng)目自動和手動進(jìn)樣模式比對結(jié)果

表8 XE-2100與顯微鏡人工分類結(jié)果比較（n=100）

表9 XE-2100與顯微鏡人工異常白細(xì)胞分類結(jié)果比較（n=500）

該儀器檢測靈敏度為100%，特異度為94.3%；陽性預(yù)測值為77.1%，陰性預(yù)測值為100%，白細(xì)胞可疑報警系統(tǒng)總有效率為95.2%。

3 討論

Sysmex XE-2100血液分析儀為五分類全自動血液分析儀，除采用傳統(tǒng)的電阻抗法和射頻法外，還用流式細(xì)胞技術(shù)，結(jié)合特殊化學(xué)試劑及熒光染料進(jìn)行外周血5種白細(xì)胞的分類，并可分析出原始和幼稚粒細(xì)胞、有核紅細(xì)胞。每小時可分析150個標(biāo)本，具有靈活的7種檢測模式。分析儀通過化學(xué)染色方法對幼稚成分的標(biāo)本進(jìn)行自動化檢測：在白細(xì)胞中，幼稚成分根據(jù)形態(tài)學(xué)的不同包括原始細(xì)胞、核左移細(xì)胞、幼稚粒細(xì)胞、異常/異型淋巴等。

3.1 性能評價

（1）精密度。精密度是指在規(guī)定的條件下，各獨(dú)立的檢測結(jié)果之間的一致程度。檢測系統(tǒng)精密度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)可選擇已檢測過的臨床樣品、質(zhì)控品、校準(zhǔn)品作為樣品，包括批內(nèi)和日間精密度實(shí)驗(yàn)[4]。批內(nèi)和日間精密度實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果表明，該儀器精密度高，各參數(shù)的精密度均＜4%。

（2）正確度。按照衛(wèi)生部臨檢中心室間質(zhì)評結(jié)果進(jìn)行正確度評估，計算得出各主要參數(shù)平均偏倚均

小于CLIA′88允許誤差，所得結(jié)論為合格。

（3）線性范圍驗(yàn)證。線性范圍驗(yàn)證良好，計算主要參數(shù)的回歸方程，其斜率均在0.95～1.05之間，相關(guān)系數(shù)均達(dá)到了0.999。Lisa Meintker等[5]比較Sysmex XE-2100和Sapphire、Siemens Advia 120、Beckman Coulter DxH 800 3種全自動血液細(xì)胞分析儀的全血細(xì)胞計數(shù)和白細(xì)胞分類情況，與上述3種全自動血液細(xì)胞分析儀相比，Sysmex XE-2100在紅細(xì)胞計數(shù)和血紅蛋白方面相關(guān)性最好。

（4）攜帶污染率。攜帶污染率是一種很重要的指標(biāo)，尤其是對于來源廣泛的樣本，如急診、重癥監(jiān)護(hù)等。計算本儀器的白細(xì)胞計數(shù)、紅細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白含量、紅細(xì)胞壓積、血小板計數(shù)的攜帶污染率均＜1%，其中紅細(xì)胞計數(shù)和血紅蛋白含量的攜帶污染率近似為0，以上數(shù)據(jù)說明高白細(xì)胞計數(shù)或高血小板計數(shù)樣本不會污染其他樣本。

（5）靈敏度。根據(jù)試劑說明書所提供的靈敏度規(guī)定及判定標(biāo)準(zhǔn)，評估該儀器及試劑的功能靈敏度符合要求。

（6）可稀釋范圍?？上♂尫秶?倍稀釋標(biāo)本后回收率良好，均符合規(guī)定的可稀釋范圍。

3.2 參考范圍驗(yàn)證

Sysmex XE-2100為日本原裝進(jìn)口儀器，與儀器配套的參考范圍不一定適用于我國人群，因此對于參考區(qū)間的驗(yàn)證十分必要。我們采用了中國合格評定國家認(rèn)可委員會實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可有關(guān)參考范圍的驗(yàn)證方法，結(jié)果95%以上個體的檢測結(jié)果均處于現(xiàn)行生物參考區(qū)間內(nèi)。

3.3 2種進(jìn)樣方式比較

手動進(jìn)樣與自動進(jìn)樣結(jié)果相比，相關(guān)性良好，各參數(shù)的相對偏差均小于CLIA′88允許誤差的1/2。這不僅說明儀器的性能穩(wěn)定，也從側(cè)面反映了在本研究中無論是手動還是自動進(jìn)樣均符合操作規(guī)范。

3.4 白細(xì)胞五分類、顯微鏡人工鏡檢結(jié)果和異常白細(xì)胞報警系統(tǒng)分析

無論是安全性還是準(zhǔn)確性方面，XE-2100在五分類計數(shù)方面均有了長足的進(jìn)步。其陰性預(yù)測值可達(dá)98%以上。與手工法分類白細(xì)胞結(jié)果相比：中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜酸性細(xì)胞的相關(guān)性均達(dá)0.9以上。不足的是，嗜堿性粒細(xì)胞的相關(guān)性較差（0.4850），與既往關(guān)于本儀器驗(yàn)證的結(jié)論一致[6-7]。評估異常白細(xì)胞檢測能力，該儀器檢測靈敏度為100%。這與既往澳大利亞學(xué)者得出的結(jié)論相一致，即無論白細(xì)胞計數(shù)正常還是增高情況下，Sysmex XE-2100檢測幼稚白細(xì)胞的靈敏度均保持在較高水平[8]，特異度為94.3%，陽性預(yù)測值為77.1%，陰性預(yù)測值為100%。韓國學(xué)者[9]比較Sysmex XE-2100、UnicelDxH 800和ADVIA2120i 3種全自動血液分析儀外周血手工涂片率結(jié)果，證實(shí)Sysmex XE-2100手工涂片復(fù)檢率與上述2種血液分析儀有較好一致性，3種分析儀的假陰性率均高于國際共識組指南推薦的數(shù)據(jù)。因此，根據(jù)該儀器檢測幼稚白細(xì)胞的高靈敏度、外周血手工涂片率的高假陰性率，同時結(jié)合我院門診與住院患者病種特點(diǎn)，參照國際血液學(xué)推薦的41條標(biāo)準(zhǔn)，我們制定了本實(shí)驗(yàn)室的異常白細(xì)胞預(yù)警規(guī)則，本實(shí)驗(yàn)室研究結(jié)果可疑白細(xì)胞報警系統(tǒng)的總有效率為95.2%，Ruzicka等[8]有關(guān)該儀器發(fā)現(xiàn)異常白細(xì)胞的總有效率為83%。

綜合以上有關(guān)準(zhǔn)確性、線性、攜帶污染率等儀器分析性能評估，不難得出：具備白細(xì)胞分類技術(shù)的Sysmex XE-2100全自動血液分析儀具有性能良好、簡便快捷、陰性預(yù)測值高的特點(diǎn)，可完成大批量標(biāo)本的篩檢。

[1]ISO 15189 醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則[S].北京：中國合格評定國家認(rèn)可委員會，2008：1 236.

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（收稿：2013-05-19 修回：2013-07-29）

Performance Verification of Sysmex XE-2100 Automated Hematology Analyzer

YANG Ming,JIA Jing-yuan,LI Dan-dan,QI Yong-zhi
（Department of Clinical Laboratory,Navy General Hospital,Beijing 100048,China）

Objective To learn the precision,correctness,linearity,residual contamination rate,function sensitivity,dilution range,reference interval,andmanualorautomatic samplingmodeofSysmex XE-2100 Automated Hematology Analyzerby per-formance verification.Methods The verificationwasperformed on the basesof the evaluation procedures from InternationalCom- mittee for Standardization in Hematology and American Clinical Laboratory Standards Institute.Results When used for complete blood count,the analyzer behaved well in precision,correctness,linearity,residual contamination avoidance,function sensitivity, dilution range and reference interval,and therewas a high correlation between the two samplingmodes;when used formanual leukocyte differential count,the analyzer hadγvalues ofneutrophilic granulocyte,achroacyte and eosinophile granulocytemore than 0.9,and the total effective rate for abnormal cell detection 95.4%.Conclusion Sysmex XE-2100 Automated Hematology Analyzer iseffective,accurate and reliable,and can beused formass samples screening.[Chinese Medical Equipment Jour-nal，2013，35（3）：85-88]

automated hematology analyzer;performance verification;precision;residual contamination rate

R318.6；TH776

A

1003-8868（2014）03-0085-04

10.7687/J.ISSN1003-8868.2014.03.085

楊 明（1972—），女，主管技師，主要從事血液學(xué)、止血與血栓方面的研究工作，E-mail：yming1972@163.com。

100048北京，海軍總醫(yī)院檢驗(yàn)科（楊 明，賈晶媛，李丹丹，齊永志）