徐長(zhǎng)斌 黎毅 胡玖和

【摘 要】目的：驗(yàn)證某國(guó)產(chǎn)總蛋白測(cè)定試劑盒在貝克曼AU680全自動(dòng)生化分析儀上的性能指標(biāo)是否滿足臨床相關(guān)法規(guī)和產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的要求。方法：參考WS/T420-2013文件制定性能驗(yàn)證方案，對(duì)精密度（批內(nèi)精密度和批間精密度）、正確度、線性范圍和參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果：批內(nèi)精密度為0.37%，批間精密度為0.81%，正確度相對(duì)偏差為0.88%，線性范圍為0～100.00g/L（r=0.9994），參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果顯示所選擇樣本均在參考值范圍之內(nèi)。結(jié)論：所驗(yàn)證國(guó)產(chǎn)總蛋白測(cè)定試劑盒性能指標(biāo)能夠滿足臨床相關(guān)法規(guī)和產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的要求，驗(yàn)證通過(guò)。

【關(guān)鍵詞】總蛋白;精密度;正確度;線性范圍;參考區(qū)間

【中圖分類(lèi)號(hào)】R318.6【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1005-0019（2020）06--01

血清總蛋白（Total Protein，TP）是指所有循環(huán)蛋白的總和，它是血液的主要成分，在機(jī)體中具有重要的生理功能。血清蛋白具有維持血液正常膠體滲透壓和PH、運(yùn)輸多種代謝物、調(diào)節(jié)被運(yùn)輸物質(zhì)的生理作用、免疫作用以及營(yíng)養(yǎng)作用等多種功能。疾病時(shí)體內(nèi)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、種類(lèi)、含量、分布和功能均會(huì)發(fā)生變化，因此測(cè)定總蛋白對(duì)于涉及肝臟、腎臟或骨髓的各種疾病以及其它代謝和營(yíng)養(yǎng)失調(diào)疾病的診斷和治療具有重要價(jià)值[1]。

近年來(lái)國(guó)內(nèi)市場(chǎng)出現(xiàn)了多個(gè)廠家生產(chǎn)的國(guó)產(chǎn)總蛋白測(cè)定試劑盒，然而所用國(guó)產(chǎn)試劑盒在各實(shí)驗(yàn)室全自動(dòng)生化分析儀上的性能指標(biāo)是否符合臨床相關(guān)法規(guī)和產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的要求有待進(jìn)一步驗(yàn)證。依據(jù)WS/T 420-2013（臨床實(shí)驗(yàn)室對(duì)商品定量試劑盒分析性能的驗(yàn)證）文件的要求，臨床實(shí)驗(yàn)室在使用新的體外診斷試劑盒之前，應(yīng)對(duì)所選購(gòu)的商品定量試劑盒進(jìn)行檢查，以保證所選用的試劑盒達(dá)到臨床實(shí)驗(yàn)室要求的臨床性能、分析性能、經(jīng)濟(jì)性能等各方面的要求;其中，分析性能是這些要求中重要的一個(gè)方面，包括精密度、正確度、線性范圍和參考區(qū)間等指標(biāo)[2-4]。本文試驗(yàn)主要對(duì)某國(guó)產(chǎn)總蛋白測(cè)定試劑盒在貝克曼AU680全自動(dòng)生化分析儀上的各項(xiàng)分析性能指標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證，觀察其是否符合臨床相關(guān)法規(guī)和產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的要求。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑 儀器：貝克曼AU680全自動(dòng)生化分析儀;試劑：某國(guó)產(chǎn)總蛋白測(cè)定試劑盒與配套校準(zhǔn)品。

1.2 方法

1.2.1 精密度 批內(nèi)精密度驗(yàn)證方案為使用一個(gè)濃度水平的質(zhì)控品，采用同一試劑連續(xù)測(cè)定20次，計(jì)算測(cè)定結(jié)果變異系數(shù)CV，結(jié)果應(yīng)符合試劑說(shuō)明書(shū)的規(guī)定（CV≤4%）。批間精密度驗(yàn)證方案為取一個(gè)濃度水平的質(zhì)控品，每天測(cè)定四次，每次檢測(cè)之間間隔2小時(shí)，連續(xù)檢測(cè)5天，一共收集20個(gè)數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算，計(jì)算CV，結(jié)果應(yīng)符合試劑說(shuō)明書(shū)的規(guī)定（CV≤6%）。

1.2.2 正確度 定值血清質(zhì)控試驗(yàn)，取一個(gè)濃度水平定值質(zhì)控品連續(xù)監(jiān)測(cè)三次，計(jì)算均值與靶值的相對(duì)偏差（T%），結(jié)果應(yīng)符合試劑說(shuō)明書(shū)的規(guī)定（T%≤10%）。

1.2.3 線性范圍 取高濃度的總蛋白血清樣本，接近試劑盒線性范圍上限， 用生理鹽水按0、 1/8 、1/4 、1/2及原倍稀釋成5個(gè)稀釋濃度（Xi），每個(gè)濃度測(cè)定三次取平均值（i），除去離群值做補(bǔ)充試驗(yàn)后，以稀釋濃度（Xi）為自變量，以檢測(cè)結(jié)果均值（i）為因變量求出線性回歸方程，計(jì)算相關(guān)系數(shù)（r）。判斷線性是否達(dá)到試劑說(shuō)明書(shū)的要求（r≥0.9900）。

1.2.4 參考范圍 采集體檢正常人樣本20份，和常規(guī)方法一樣進(jìn)行測(cè)定，檢測(cè)結(jié)果在參考區(qū)間（參考范圍：60-85g/L）之外的樣本應(yīng)不超過(guò)2例。

2 驗(yàn)證數(shù)據(jù)及結(jié)果

2.1 精密度 所選濃度水平質(zhì)控樣本的批內(nèi)CV值0.37%，小于4.0%;批間CV值0.81%，小于6.0%，符合說(shuō)明書(shū)規(guī)定，驗(yàn)證通過(guò)，結(jié)果如表1所示。

2.2 正確度 定值血清質(zhì)控品測(cè)定均值與靶值的相對(duì)偏差為0.88%，小于10.0%，驗(yàn)證通過(guò)，結(jié)果如表2所示。

2.3 線性范圍 以理論值（xi）作為自變量，以測(cè)定值（yi）作為因變量，得到線性回歸方程y =0.9977x+0.2798，相關(guān)系數(shù)r=0.9994>0.9900。相關(guān)系數(shù)符合試劑說(shuō)明書(shū)規(guī)定，驗(yàn)證通過(guò)，結(jié)果如表3所示。

2.4 參考范圍

所選擇20個(gè)樣本檢測(cè)結(jié)果如表4所示，超出參考區(qū)間的樣本數(shù)為1例，驗(yàn)證通過(guò)。

3 討論

精密度，指在常規(guī)檢測(cè)條件下對(duì)同一待測(cè)物進(jìn)行檢測(cè)所獲得結(jié)果的接近程度。精密度是衡量體外診斷試劑批內(nèi)和批間變異的重要指標(biāo)，通常包括批內(nèi)和批間精密度。本文實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示批內(nèi)CV值為0.37%，符合廠家聲明批內(nèi)CV≤4.0%，批間CV值為0.81%，符合廠家聲明批間CV≤6.0%。正確度，指多次測(cè)量結(jié)果的均值與真值之間的一致程度。正確度是檢驗(yàn)科為臨床醫(yī)生與患者提供準(zhǔn)確可靠檢驗(yàn)結(jié)果的前提條件。本文實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示正確度相對(duì)偏差為0.88%，符合廠家聲明的相對(duì)偏差≤10.0%的要求。線性范圍，是指系統(tǒng)最終的輸出值與被分析物的濃度或活性成比例的范圍。線性范圍的測(cè)量即測(cè)定濃度曲線接近直線的程度，它反映整個(gè)系統(tǒng)的輸出特性。本文實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示線性范圍0-100g/L（r=0.9994），符合說(shuō)明書(shū)上的1.4-100g/L（r≥0.9900）線性范圍要求。

綜上所述，該國(guó)產(chǎn)總蛋白測(cè)定試劑盒在檢驗(yàn)科貝克曼AU680全自動(dòng)生化分析儀上的精密度、正確度、線性范圍、參考區(qū)間性能指標(biāo)均符合臨床相關(guān)法規(guī)和產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的相關(guān)要求。說(shuō)明該國(guó)產(chǎn)總蛋白檢測(cè)試劑盒，在檢驗(yàn)科貝克曼AU680全自動(dòng)生化分析儀上具有可靠的性能狀態(tài)，能為臨床醫(yī)生與患者提供準(zhǔn)確可靠的總蛋白測(cè)定結(jié)果，更好的為臨床服務(wù)。

參考文獻(xiàn)

張紅東，海向軍.生化檢驗(yàn)指標(biāo)在病毒性肝病患者診斷中的臨床意義[J].甘肅科技縱橫，2019，（1）：86-87，96

劉新剛，曹科，沈丹，等.普門(mén)PA-900特定蛋白分析儀檢測(cè)超敏C-反應(yīng)蛋白性能驗(yàn)證[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2018，（17）：2632-2634

鄧朝暉，宋穎博，白著曉，等.羅氏8000模塊分析系統(tǒng)檢測(cè)總蛋白的分析性能評(píng)價(jià)[J].兵團(tuán)醫(yī)學(xué)，2014，（3）：10-12

李月海，宛長(zhǎng)宏.飛測(cè)Ⅱ型免疫熒光檢測(cè)儀檢測(cè)C-反應(yīng)蛋白性能驗(yàn)證[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2017，（7）：1003-1005