張娜，張蕓香，郭晉平

(1.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 林學(xué)院，山西 太谷 030801；2.山西省林業(yè)科學(xué)研究院，山西 太原 030012)

腋芽增生是指莖尖或初代培養(yǎng)的芽在適宜的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)，不斷發(fā)生腋芽，腋芽又不斷萌發(fā)形成叢生苗，通過(guò)一代又一代地誘導(dǎo)腋芽發(fā)育，獲得大量再生植株的技術(shù)[1]。腋芽增生過(guò)程中不經(jīng)歷脫分化階段而直接從芽發(fā)育成新芽，再生植株能夠最大限度地保持母本的優(yōu)良性狀，已成為木本植物無(wú)性系快速繁殖中運(yùn)用最為廣泛的組培技術(shù)途徑。腋芽誘導(dǎo)是實(shí)現(xiàn)腋芽增生的首要和關(guān)鍵步驟，解決好腋芽增生技術(shù)體系中腋芽誘導(dǎo)環(huán)節(jié)的技術(shù)問(wèn)題，是發(fā)揮腋芽增生方法的優(yōu)勢(shì)、實(shí)現(xiàn)無(wú)性系高效快繁的關(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題。

文冠果優(yōu)良品種和類(lèi)型的選育是目前林業(yè)生產(chǎn)中亟待解決的問(wèn)題，在優(yōu)良無(wú)性系選育中，實(shí)現(xiàn)無(wú)性系高效組培快繁是技術(shù)瓶頸，而文冠果屬于組織培養(yǎng)繁殖困難的樹(shù)種。文冠果組織培養(yǎng)體系的建立方面已開(kāi)展了大量的探索和實(shí)驗(yàn)工作，文冠果莖段外植體組織培養(yǎng)技術(shù)方面也有許多試驗(yàn)研究[2～6]，但迄今為止，尚無(wú)文冠果莖段外植體腋芽誘導(dǎo)關(guān)鍵影響因素的明確研究結(jié)果，組培技術(shù)體系尚不完善。

以文冠果幼嫩莖段作為外植體，對(duì)滅菌劑種類(lèi)及滅菌時(shí)間、外植體采集時(shí)間、基本培養(yǎng)基類(lèi)型、BA濃度、糖源種類(lèi)和濃度等文冠果腋芽誘導(dǎo)的可能影響因素進(jìn)行了試驗(yàn)研究，旨在掌握腋芽誘導(dǎo)的關(guān)鍵影響因素和作用規(guī)律，建立文冠果莖段外植體高效腋芽誘導(dǎo)技術(shù)體系，為突破文冠果大規(guī)模組培快繁關(guān)鍵技術(shù)難題，實(shí)現(xiàn)文冠果優(yōu)良品種繁育的突破提供理論依據(jù)與技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)材料采自課題組在山西農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院苗圃栽培的6年生文冠果實(shí)驗(yàn)林，選擇植株生長(zhǎng)健康的幼嫩莖段作為試驗(yàn)所用的外植體材料。

將大田采回的莖段洗凈后，在超凈工作臺(tái)上操作，先用75%的酒精滅菌10～30 s，無(wú)菌水沖洗3次，再用實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的2種滅菌劑進(jìn)行不同時(shí)間的滅菌處理，無(wú)菌水沖洗5～6次，切成1.5 cm左右的莖段，每個(gè)莖段至少帶1個(gè)腋芽，準(zhǔn)備接種。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和培養(yǎng)條件

本研究分6個(gè)分項(xiàng)實(shí)驗(yàn)，分別解決文冠果莖段增生組培腋芽誘導(dǎo)中的滅菌劑類(lèi)型和滅菌時(shí)間、外植體采集時(shí)期、基本培養(yǎng)基類(lèi)型、培養(yǎng)基BA濃度、培養(yǎng)基糖源類(lèi)型和濃度、培養(yǎng)環(huán)境光照條件共6個(gè)關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)的選擇和組合優(yōu)化。

試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，每處理均為30瓶，每瓶接種1個(gè)外植體，重復(fù)3次，接種培養(yǎng)時(shí)間4 w。

試驗(yàn)的培養(yǎng)過(guò)程在全自動(dòng)恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，溫度為25±2℃；除培養(yǎng)環(huán)境光照條件實(shí)驗(yàn)外，光照強(qiáng)度均為2500～3000 lx，光照時(shí)間為14～16 h·d-1；除培養(yǎng)基類(lèi)型選擇試驗(yàn)采用多種培養(yǎng)基外，其余試驗(yàn)均采用MS培養(yǎng)基；除培養(yǎng)基糖源類(lèi)型和濃度試驗(yàn)外，培養(yǎng)基糖源均為蔗糖，濃度為30 g·L-1；所有培養(yǎng)基均添加瓊脂4.5 g·L-1，培養(yǎng)基調(diào)至pH 5.8～5.9。

1.3 滅菌劑及滅菌時(shí)間

試驗(yàn)設(shè)計(jì)2種滅菌劑，分別為2%次氯酸鈉(NaClO)和0.1%氯化汞(HgCl2)。對(duì)2種滅菌劑均分別設(shè)計(jì)4個(gè)滅菌時(shí)間梯度，用2%NaClO滅菌時(shí)，滅菌時(shí)間梯度分別為5、8、10、12 min；用0.1%HgCl2滅菌時(shí)，滅菌時(shí)間梯度分別為2、3、4和5 min。采用4～5月采集的幼嫩莖段，經(jīng)各項(xiàng)處理后進(jìn)行接種培養(yǎng)，4 w后對(duì)文冠果莖段外植體的污染率、死亡率和成活率進(jìn)行觀察統(tǒng)計(jì)。

1.4 外植體采集時(shí)間

為分析外植體采集時(shí)間和枝條木質(zhì)化程度對(duì)莖段外植體組培滅菌效果的影響，設(shè)計(jì)4～9月中共6個(gè)外植體采集時(shí)間，選在每月中旬晴朗的中午，選擇當(dāng)年生枝條采集文冠果莖段。由于采集時(shí)間、枝條木質(zhì)化程度不同，不同的采集時(shí)間代表了不同的外植體木質(zhì)化程度。不同時(shí)期采集的外植體及時(shí)經(jīng)處理后接種培養(yǎng)，4 w后統(tǒng)計(jì)外植體的污染率、死亡率和成活率。

1.5 基本培養(yǎng)基

供選擇試驗(yàn)的基本培養(yǎng)基為MS、B5和WPM，按試驗(yàn)設(shè)計(jì)確定的試驗(yàn)材料準(zhǔn)備和培養(yǎng)條件，接種至3種培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，4 w后觀察腋芽生長(zhǎng)情況，統(tǒng)計(jì)腋芽誘導(dǎo)率。

1.6 培養(yǎng)基BA濃度

采用上述篩選的最佳基本培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基,并添加0.2 mg·L-1NAA，再添加不同濃度的BA，設(shè)計(jì)BA濃度梯度為0.5、1.0、3.0和5.0 mg·L-1，接種培養(yǎng)4 w后，觀察文冠果腋芽生長(zhǎng)情況，統(tǒng)計(jì)腋芽誘導(dǎo)率。

1.7 培養(yǎng)基糖源類(lèi)型及濃度

采用上述篩選出的最佳基本培養(yǎng)基及激素組合作為該試驗(yàn)的基本培養(yǎng)基，設(shè)計(jì)培養(yǎng)基糖源種類(lèi)為蔗糖、葡萄糖和果糖3個(gè)，并分別設(shè)計(jì)3個(gè)濃度梯度：10、30、50 g·L-1。接種培養(yǎng)4 w后，觀察文冠果腋芽生長(zhǎng)情況，統(tǒng)計(jì)腋芽誘導(dǎo)率。

1.8 培養(yǎng)環(huán)境的光照

采用上述篩選出的最佳基本培養(yǎng)基及激素組合作為該試驗(yàn)的基本培養(yǎng)基，添加蔗糖30 g·L-1，瓊脂4.5 g·L-1，分別進(jìn)行光照培養(yǎng)和黑暗培養(yǎng)。4 w后，觀察文冠果腋芽生長(zhǎng)情況，統(tǒng)計(jì)腋芽誘導(dǎo)率。

1.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

將試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)采用SPSS17.0進(jìn)行方差分析，并用Duncan多重比較方法對(duì)各處理間的均值進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。具體指標(biāo)計(jì)算如下：

污染率=污染的外植體數(shù)/接種的外植體總數(shù)×100%

死亡率=死亡的外植體數(shù)/接種的外植總體數(shù)×100%

成活率=100%-污染率-死亡率

腋芽誘導(dǎo)率=[誘導(dǎo)出腋芽的外植體總數(shù)/(接種的外植體總數(shù)-污染的外植體數(shù))]×100%

2 結(jié)果與分析

2.1 滅菌劑及滅菌時(shí)間對(duì)文冠果莖段外植體滅菌效果的影響

對(duì)滅菌劑和滅菌時(shí)間的方差分析表明，滅菌劑及滅菌時(shí)間對(duì)外植體的污染率、死亡率和成活率的影響極顯著。

由表1可見(jiàn)，采用2%NaClO作為滅菌劑，當(dāng)滅菌時(shí)間為5 min時(shí)，污染率高達(dá)92.43%，雖然死亡率很低，但成活率僅為5.42%；隨著滅菌時(shí)間延長(zhǎng)，污染率有所降低，但死亡率也相應(yīng)升高；當(dāng)滅菌時(shí)間為10 min時(shí)，污染率和死亡率分別為64.85%和15.38%，成活率最高，僅為19.77%；當(dāng)滅菌時(shí)間繼續(xù)延長(zhǎng)至12 min時(shí)，污染率降低為42.21%，但死亡率卻高達(dá)42.22%，其成活率也僅為15.57%。采用0.1% HgCl2作為滅菌劑，當(dāng)滅菌時(shí)間為2 min時(shí)，污染率高達(dá)77.87%，成活率僅達(dá)14.31%；隨著滅菌時(shí)間的延長(zhǎng)，污染率逐漸降低，死亡率逐漸升高；當(dāng)滅菌時(shí)間為4 min時(shí)，污染率和死亡率均較低，成活率最高，達(dá)74.38%；當(dāng)滅菌時(shí)間繼續(xù)延長(zhǎng)為5 min時(shí)，污染率達(dá)最低，為12.16%，但死亡率很高，達(dá)45.66%，成活率僅為42.18%；如圖1-A為外植體莖段死亡，主要是由于滅菌時(shí)間過(guò)長(zhǎng)所致。

可見(jiàn)，2%NaClO無(wú)論濃度如何，都不是文冠果莖段外植體的適宜滅菌劑，而0.1% HgCl2滅菌4 min是文冠果莖段外植體組培的適宜滅菌處理方式。

表1 滅菌劑及滅菌時(shí)間對(duì)莖段外植體滅菌效果的影響

注：每個(gè)值代表標(biāo)準(zhǔn)值±標(biāo)準(zhǔn)誤。所有數(shù)據(jù)在P=0.05水平采用鄧肯多重比較法進(jìn)行比較；同一列中相同字母之間表示差異不顯著，不同字母之間表示差異顯著。表2～表6同。

Note: Each value represents the mean ± standard error. Data within a column followed by the same letter in superscript are not significantly different by Duncan's multiple-range test (P<0.05). The same as in table 2～table 6.

2.2 外植體采集時(shí)期對(duì)文冠果莖段外植體滅菌效果的影響

對(duì)外植體采集時(shí)間的方差分析表明，不同采集時(shí)期對(duì)外植體污染率和成活率的影響極顯著，對(duì)外植體的死亡率影響不顯著。4～5月采集外植體進(jìn)行組培，污染率較低，分別為10.01%和14.92%，成活率最高，分別為80.06%和74.77%；6月采集外植體進(jìn)行組培，污染率逐漸升高，成活率逐漸降低；至7～8月采集外植體，污染率達(dá)到最高，而成活率達(dá)到最低，分別為15.60%和12.07%；到9月采集外植體，污染率又有所降低，成活率有所升高，分別為42.68%和47.24%，如表2所示。

表2外植體采集時(shí)期對(duì)莖段外植體滅菌效果的影響

Table2 Effect of collection period on disinfection of stem segment explants

采集時(shí)期Collectionperiod污染率Pollutionrate/%死亡率Mortalityrate/%成活率Survivalrate/%4月10.01±1.93 c9.93±1.73 a80.06±1.54 a5月14.92±0.89 c10.31±1.93 a74.77±1.92 a6月42.40±3.39 b10.35±0.21 a46.09±3.78 b7月72.20±2.31 a12.19±0.93 a15.60±3.10 c8月77.88±1.08 a9.04±1.49 a12.07±1.54 c9月42.68±2.03 b11.23±1.06 a47.24±2.44 b

2.3 基本培養(yǎng)基類(lèi)型對(duì)文冠果莖段組培腋芽誘導(dǎo)的影響

對(duì)基本培養(yǎng)基類(lèi)型的腋芽誘導(dǎo)效果的方差分析表明，基本培養(yǎng)基類(lèi)型對(duì)文冠果腋芽誘導(dǎo)率影響顯著。由表3可見(jiàn)，在供試驗(yàn)的3種基本培養(yǎng)基中，MS基本培養(yǎng)基腋芽誘導(dǎo)率最高，達(dá)88.77%，腋芽萌發(fā)時(shí)間也較早，在第6～8 d即開(kāi)始萌發(fā)(圖1-B)，之后葉片伸展較快，植株長(zhǎng)勢(shì)良好，如圖1-C。B5和WPM培養(yǎng)基腋芽誘導(dǎo)率略低，且腋芽萌發(fā)時(shí)間較晚，均在8～10 d開(kāi)始萌發(fā)。在B5培養(yǎng)基上進(jìn)行外植體培養(yǎng)，葉片伸展較快，但植株長(zhǎng)勢(shì)細(xì)弱(圖1-D)；在WPM培養(yǎng)基中培養(yǎng)，植株長(zhǎng)勢(shì)良好，但葉片伸展較慢(圖1-E)。

表3基本培養(yǎng)基類(lèi)型對(duì)腋芽誘導(dǎo)的影響

Table3 Effect of basal medium on induction of axillary bud

基本培養(yǎng)基Basalmedium腋芽誘導(dǎo)率Inductionfrequency/%腋芽萌發(fā)期Germinationstage/d腋芽生長(zhǎng)表現(xiàn)Growth situation MS88.77±2.92 a6～8良好,葉片伸展較快B579.60±1.59 b8～10細(xì)弱,葉片伸展較快WPM77.55±2.12 b8～10良好,葉片伸展較慢

2.4 培養(yǎng)基BA濃度對(duì)文冠果腋芽誘導(dǎo)的影響

對(duì)培養(yǎng)基BA濃度的腋芽誘導(dǎo)效果的方差分析表明，培養(yǎng)基BA濃度對(duì)文冠果腋芽誘導(dǎo)率影響顯著。由表4可見(jiàn)，當(dāng)BA濃度為0.5 mg·L-1時(shí)，腋芽誘導(dǎo)率達(dá)83.36%，腋芽在培養(yǎng)5～7 d后萌發(fā)，且生長(zhǎng)較慢；將BA濃度提高到1.0 mg·L-1時(shí)，腋芽誘導(dǎo)率達(dá)92.25%，腋芽培養(yǎng)4～5 d后開(kāi)始萌發(fā)，且腋芽生長(zhǎng)較快；繼續(xù)提高BA濃度到3.0 mg·L-1時(shí)，腋芽誘導(dǎo)率略有下降，腋芽培養(yǎng)4～5 d后萌發(fā)，腋芽生長(zhǎng)較快，但出現(xiàn)輕微玻璃化現(xiàn)象(圖1-F)；當(dāng)BA濃度為5.0 mg·L-1時(shí)，腋芽誘導(dǎo)率最低，且玻璃化現(xiàn)象嚴(yán)重。

2.5 糖源類(lèi)型及濃度對(duì)文冠果腋芽誘導(dǎo)的影響

對(duì)糖源類(lèi)型及濃度的腋芽誘導(dǎo)效果的方差分析表明，糖源類(lèi)型及濃度對(duì)文冠果腋芽誘導(dǎo)率的影響極顯著。培養(yǎng)基中3種糖源的3個(gè)糖含量梯度指標(biāo)中均以30 g·L-1為最佳，腋芽誘導(dǎo)率達(dá)最高。

由表5可見(jiàn)，在3種糖源中，在3個(gè)相同濃度下，添加蔗糖的培養(yǎng)基腋芽誘導(dǎo)率均顯著高于添加其它2種糖源的培養(yǎng)基，而添加葡萄糖和果糖的培養(yǎng)基，腋芽誘導(dǎo)率差異不顯著。

表4培養(yǎng)基BA濃度對(duì)腋芽誘導(dǎo)的影響

Table4 Effect of different concentrations of BA on induction of axillary bud

BA/mg·L-1腋芽誘導(dǎo)率Inductionfrequency/%腋芽萌發(fā)期Germinationstage/d腋芽生長(zhǎng)表現(xiàn)Growth situation0.583.36±1.81 b5 ～ 7 較慢1.092.25±0.97 a4 ～ 5較快3.081.94±3.67 b4 ～ 5較快,伴有輕微玻璃化現(xiàn)象5.068.94±2.29 c4 ～ 5較快,玻璃化現(xiàn)象嚴(yán)重

表5糖源類(lèi)型及濃度對(duì)腋芽誘導(dǎo)率的影響

Table5 Effect of different types and concentrations of sugar on the frequency of auxiliary bud induction

糖源Type of sugar濃度Concentration/g·L-1腋芽誘導(dǎo)率Induction frequency/%蔗糖1083.36±1.73 b3092.26±2.93 a5072.34±2.05 c葡萄糖10 71.09±2.27 c30 80.99±3.28 b50 68.01±2.30 c果糖10 67.75±1.29 c30 80.99±3.28 b50 63.27±2.41 c

2.6 光照培養(yǎng)環(huán)境對(duì)文冠果腋芽誘導(dǎo)的影響

對(duì)光照培養(yǎng)環(huán)境的腋芽誘導(dǎo)效果的方差分析表明，光照培養(yǎng)和黑暗培養(yǎng)對(duì)文冠果腋芽誘導(dǎo)率影響不顯著，但不同光照培養(yǎng)環(huán)境下腋芽生長(zhǎng)狀況存在差異。由表6可見(jiàn)，光照培養(yǎng)條件下，腋芽4～5 d開(kāi)始萌發(fā)，生長(zhǎng)較快，葉片呈綠色；在黑暗培養(yǎng)條件下，腋芽萌發(fā)較晚，在6～8 d開(kāi)始萌發(fā)，生長(zhǎng)較慢，葉片呈淡綠色甚至白色(圖1-G)，出現(xiàn)白化或黃化苗(圖1-H)，說(shuō)明光照培養(yǎng)環(huán)境有利于莖段外植體腋芽誘導(dǎo)及生長(zhǎng)。

表6光照培養(yǎng)環(huán)境對(duì)腋芽誘導(dǎo)的影響

Table6 Effect of light condition on induction of axillary bud

光照環(huán)境Lightcondition腋芽誘導(dǎo)率Inductionfrequency/%腋芽萌發(fā)期Germinationstage/d腋芽生長(zhǎng)表現(xiàn)Growth situation 光照培養(yǎng)93.36±3.13 a4 ～ 5 良好,生長(zhǎng)較快黑暗培養(yǎng)90.83±1.57 a6 ～ 8 生長(zhǎng)較慢,出現(xiàn)白化或黃化苗

圖1 文冠果幼嫩莖段外植體的腋芽誘導(dǎo)生長(zhǎng)情況Fig.1 Axillary bud induction using young stem segments as explants of Xanthoceras sorbifolia注：A，莖段死亡；B，培養(yǎng)6 d時(shí)，腋芽開(kāi)始萌發(fā)；C，在MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)30 d后的腋芽生長(zhǎng)情況；D，在B5培養(yǎng)基上培養(yǎng)30 d后的腋芽生長(zhǎng)情況；E，在WPM培養(yǎng)基上培養(yǎng)30 d的腋芽生長(zhǎng)情況；F，在添加3.0 mg·L-1 BA和0.2 mg·L-1 NAA的MS培養(yǎng)基上觀察到腋芽有輕微玻璃化現(xiàn)象；G & H，黑暗培養(yǎng)環(huán)境下，觀察到腋芽呈淡綠白色或淡黃白色。Note:A，Stem segment died; B，Axillary bud began to sprout when cultured for 6 d; C，Axillary bud cultured on MS medium for 30 d; D，Axillary bud cultured on B5 medium for 30 d; E，Axillary bud cultured on WPM medium for 30 d; F，The slight hyperhydric buds observed on MS medium supplemented with 3.0 mg·L-1 BA and 0.2 mg·L-1 NAA; G &H，The light white or light yellow buds observed when cultured on dark condition.

3 結(jié)論與討論

有效控制外植體污染是植物組織培養(yǎng)成功的先決條件。植物組織培養(yǎng)中常用的滅菌劑有漂白粉、次氯酸鈉(2%～10%)、氯化汞(0.1%～1%)和酒精(70%～75%)等[7]。適宜的滅菌劑既要有良好的滅菌效果，又要對(duì)外植體的損傷較小，還要易清洗，殘留少。因此，需要針對(duì)樹(shù)種、外植體類(lèi)型和取材時(shí)期等正確選擇滅菌劑類(lèi)型和處理時(shí)間。本研究選用了兩種滅菌劑，并分別設(shè)置了4個(gè)時(shí)間梯度進(jìn)行篩選研究。結(jié)果表明，2%NaClO無(wú)論濃度如何，都不是文冠果莖段外植體的適宜滅菌劑，而0.1% HgCl2滅菌處理4 min是文冠果莖段外植體組培的適宜滅菌處理方式。Raha and Roy[8]在對(duì)止瀉木莖段外植體進(jìn)行滅菌時(shí)，也采用0.1% HgCl2作為滅菌劑。HgCl2是重金屬，對(duì)環(huán)境危害大，對(duì)人畜的毒性極強(qiáng)，用時(shí)需慎重，使用后必須做好回收工作。

植物采集時(shí)期對(duì)外植體的滅菌效果也不盡相同。結(jié)果表明，4～5月采集的外植體易于滅菌，污染率較低，成活率最高，可能是由于4～5月是文冠果自然萌發(fā)的季節(jié)，腋芽處于萌動(dòng)狀態(tài)，并且經(jīng)過(guò)一個(gè)寒冷的冬季，外界環(huán)境中的各種病菌和病蟲(chóng)害較少，易于滅菌。而7～8月正值雨季，空氣相對(duì)濕度大，加之高溫導(dǎo)致文冠果病害嚴(yán)重，致使外植體滅菌非常困難，此時(shí)期的污染率很高。在三倍體毛白楊的腋芽誘導(dǎo)試驗(yàn)研究中也發(fā)現(xiàn)，5月份采集的外植體滅菌效果最好[9]。蘋(píng)果在3～6月采集的成活率可達(dá)60%，而7～11月采集時(shí)，其成活率降到10%[1]。

基本培養(yǎng)基的選擇直接影響植物組織培養(yǎng)的效果。結(jié)果表明，在MS基本培養(yǎng)基中，文冠果腋芽誘導(dǎo)率最高，達(dá)88.77%，而且腋芽在6～8 d即開(kāi)始萌發(fā)，葉片伸展較快，植株長(zhǎng)勢(shì)良好。而B(niǎo)5和WPM培養(yǎng)基的腋芽誘導(dǎo)率略低，且腋芽均在8～10 d萌發(fā)?？赡苁怯捎贛S基本培養(yǎng)基中的無(wú)機(jī)鹽含量高，尤其是硝酸鹽、銨離子和鉀離子含量豐富，易于文冠果腋芽誘導(dǎo)及生長(zhǎng)[7]。Jiménez等[10]試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，MS培養(yǎng)基是瓜多竹腋芽誘導(dǎo)的最佳基本培養(yǎng)基。

基本培養(yǎng)基需要配合使用適當(dāng)?shù)闹参锷L(zhǎng)調(diào)節(jié)劑才能誘導(dǎo)細(xì)胞分裂的啟動(dòng)、培養(yǎng)物形態(tài)建成、芽和根的分化與發(fā)育等[11]。本試驗(yàn)對(duì)不同濃度的BA與0.2 mg·L-1NAA組合進(jìn)行研究，結(jié)果表明，當(dāng)BA濃度為1.0 mg·L-1時(shí)，腋芽誘導(dǎo)率最高，是文冠果腋芽誘導(dǎo)的最佳濃度。Yan等[12]對(duì)山藥進(jìn)行腋芽誘導(dǎo)研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基中添加1.0 mg·L-1BA與NAA組合是山藥腋芽誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基。

在植物組織培養(yǎng)中，糖類(lèi)既為培養(yǎng)物提供能量，也是培養(yǎng)物滲透環(huán)境的主要調(diào)節(jié)者。蔗糖作為碳源和滲壓劑的比例約為3∶1～3∶2，即約有1/4～2/5的蔗糖用于保持培養(yǎng)基的滲透壓[13]。本研究表明，當(dāng)蔗糖濃度為30 g·L-1時(shí)，是文冠果腋芽誘導(dǎo)的最佳濃度。

參 考 文 獻(xiàn)

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