董占軍 韓桂茹 李 桂

(河北省人民醫(yī)院藥學部，河北 石家莊 050051)

制劑與質(zhì)量控制

頸復康顆粒的一板多信息薄層鑒別研究

董占軍 韓桂茹△李 桂

(河北省人民醫(yī)院藥學部，河北 石家莊 050051)

黃柏；葛根；白芍藥；丹參；色譜法；薄層；分析

頸復康顆粒為部頒標準收載的品種，由黃芪、黨參、丹參、白芍藥、生地黃、石決明、威靈仙、葛根、黃柏、川芎、乳香、沒藥、羌活等21味中藥組成。特點是藥味多，每味藥材的劑量低，而且還是提取制劑，影響了薄層鑒別增訂，所以原標準項下僅收載了2味藥材的薄層鑒別(黃柏和芍藥苷)，無定量測定指標[1]。后被收入《中華人民共和國藥典》2010年版一部，薄層鑒別修訂為4項(黃柏、黃芪甲苷、芍藥苷和丹參素鈉)，并收載了葛根素的含量測定[2]。4項鑒別要制備4種供試品溶液，且制備程序繁瑣、復雜，用時約12 h，花費對人體有害的溶劑430 mL。鑒別增訂率僅19%，81%的藥材難以控制投料情況，影響了制劑的可控性。雖查閱到該制劑中小檗堿、芍藥苷、葛根素和芍藥苷含量測定的文獻報道[3-5]，但都未收入質(zhì)量標準。未查閱到頸復康顆粒中多味藥材的快速薄層鑒別研究。針對上述不足，我們對頸復康顆粒進行了一板多信息薄層鑒別研究，獲得3塊薄層板上鑒別9味藥材鑒別結(jié)果，且斑點清晰。鑒別增訂率提升到42.85%，制劑可控性提高。

1 材料與方法

1.1 藥材及試劑 頸復康顆粒(承德頸復康藥業(yè)集團有限公司，國藥準字Z13022204，批號：290695)及處方中21味藥材由市場藥店購置；黃柏對照藥材(批號：121510-200703)，葛根對照藥材(批號：121551-200902)，丹參對照藥材(批號：120923-200006)，白芍對照藥材(批號：120905-200508)，川芎對照藥材(批號：120918-200809)，乳香對照藥材(批號：1209701-200403)，沒藥對照藥材(批號：121250-200503)，羌活對照藥材(批號：120935-200506)，黃芪甲苷對照品(批號：110781-200210)，均購自中國藥品生物制品檢定所。試驗中用到的試劑、試藥均為分析純。

1.2 儀器 超聲波震蕩儀：KH-100B型超聲波清洗器(昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司)；紫外光燈：ZF-2型三用紫外儀(上海市安亭電子儀器廠)。

1.3 方法

1.3.1 黃柏、葛根、白芍藥與丹參的薄層鑒別 取本品3 g，研細，加甲醇5 mL，超聲處理5 min，濾過，濾液作為供試品溶液。另取黃柏對照藥材0.2 g，赤芍藥和丹參對照藥材各0.5 g，葛根對照藥材0.3 g，分別加甲醇4 mL，超聲處理10 min，上清液作為各自的對照藥材溶液。吸取上述5種溶液各5～6 μL，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(12∶2∶1∶0.5)為展開劑，展開，取出，熱風吹干，置紫外光燈(365、254 nm)下檢視和噴以5%的香草醛硫酸溶液-乙醇(1∶6)的混合溶液，105 ℃加熱顯色后，日光下檢視。

1.3.2 川芎、乳香與沒藥的薄層鑒別 取本品5 g，研細，加乙醚20 mL，超聲處理10 min，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取川芎、乳香與沒藥對照藥材各0.3 g，分別加甲醇4 mL，超聲處理10 min，上清液作為對照藥材溶液。吸取對照藥材溶液各3 μL，供試品溶液5～6 μL，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以環(huán)己烷-醋酸乙酯-甲酸(9∶1.5∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365、254 nm)下檢視和噴以5%的香草醛硫酸溶液-乙醇(1∶6)的混合溶液，105 ℃加熱顯色后，日光下檢視。

1.3.3 羌活與黃芪甲苷薄層鑒別 取本品5 g，研細，加60%甲醇25 mL，超聲處理10 min，濾過，濾液揮去甲醇，殘留液加水15 mL，用水飽和的正丁醇25 mL萃取，分取正丁醇層，用0.2%氫氧化鈉溶液15 mL洗滌，正丁醇層蒸干，殘留物加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷，加甲醇制成每mL含0.3 mg的溶液，作為對照品溶液。再取羌活對照藥材0.5 g，加甲醇4 mL，超聲處理10 min，上清液作為對照藥材溶液。吸取對照品溶液5 μL、供試品溶液5～8 μL、對照藥材溶液3 μL，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以氯仿-甲醇-水-甲酸(12∶4∶0.5∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365 nm)下檢視和噴以10%的硫酸乙醇溶液，105 ℃加熱顯色后，紫外光燈(365 nm)下檢視。

2 結(jié) 果

2.1 黃柏、葛根、白芍藥與丹參的薄層鑒別 置紫外光燈(365 nm)下檢視，供試品色譜中，在與黃柏對照藥材色譜相應的位置上，顯2個相同顏色的熒光主斑點(見封3，圖1)；置紫外光燈(254 nm)下檢視，供試品色譜中，在與葛根對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色主斑點(見封3，圖2)；再噴以5%的香草醛硫酸溶液-乙醇(1∶6)的混合溶液，熱風吹至斑點顯色清晰，隨即觀察，供試品色譜中，在與丹參和赤芍藥對照藥材色譜相應的位置上，分別顯相同顏色的主斑點(見封3，圖3)。陰性樣品無干擾，鑒別專屬。

2.2 川芎、乳香與沒藥的薄層鑒別 置紫外光燈(365 nm)下檢視，供試品色譜中，在與川芎對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(見封3，圖4)；置紫外光燈(254 nm)下檢視，在與沒藥對照藥材色譜相應的位置上，顯一個相同顏色主斑點(見封3，圖5)；再噴以5%的香草醛硫酸溶液-乙醇(1∶6)的混合溶液，熱風吹至一個紫紅色斑點呈現(xiàn)，供試品色譜中，在與乳香對照藥材色譜相應的位置上，顯一個相同顏色的斑點(見封3，圖6)，繼續(xù)加熱，顏色斑點增多，且紫紅色斑點漸變?yōu)樘m紫色(見封3，圖7)。陰性樣品無干擾，鑒別專屬。

2.3 羌活與黃芪甲苷薄層鑒別 置紫外光燈(365 nm)下檢視，供試品色譜中，在與羌活對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(見封3，圖8)；再噴以10%的硫酸乙醇溶液，105 ℃加熱至斑點顯色清晰。置紫外光燈(365 nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(見封3，圖9)。陰性樣品無干擾，鑒別專屬。

3 討 論

3.1 實現(xiàn)了一板多信息鑒別，所增訂的9味藥材，在3塊薄層板上完成。樣品和對照藥材的前處理時間約2 h，花費有機試劑110 mL。與原標準相比，在鑒別藥味增加125%的情況下，處理時間與試劑反而節(jié)約了83.3%和74.4%。簡便、快捷、斑點清晰，為薄層鑒別的提速、節(jié)資、降低環(huán)境污染做出了示范。

3.2 本薄層鑒別的特點是：依據(jù)中藥化學成分性質(zhì)，通過薄層展開后，各成分分別被吸附和解吸附在薄層板的不同層次上，在各自的檢視條件，呈現(xiàn)各自不同的熒光和顏色信息斑點，分離良好，呈現(xiàn)了一板多層次多種藥材信息。如第1塊薄層板上，在第1層次上(紫外光365 nm下)檢視小檗堿類的黃綠色熒光斑點；在第2層次上(紫外光254 nm下)檢視葛根的熒光熄滅斑點；在第3層次上，噴霧香草醛硫酸溶液顯色后，日光下檢視丹參的粉紅色斑點和白芍藥的藍紫色斑點。第2塊薄層板上，第1層次上(紫外光365 nm下)檢視川芎的亮蘭色熒光斑點；在第2層次上(紫外光254 nm下)檢視沒藥的熒光熄滅斑點；在第3層次上，噴霧香草醛硫酸溶液顯色后，日光下檢視乳香的顏色斑點。在第3塊薄層板上，在第1層次上(紫外光365 nm下)檢視羌活的純蘭色熒光斑點；噴霧10%硫酸乙醇溶液顯色后，在第2層次上(紫外光365 nm下)檢視黃芪甲苷的橙色熒光斑點。各層次上的斑點清晰，互不干擾。

3.3 乳香和沒藥均為橄欖科植物分泌的樹脂類，具有類似的理化性質(zhì)，與香草醛硫酸乙醇溶液反應，都會形成多種不同的顏色斑點，難以將兩者區(qū)分。本鑒別利用沒藥在紫外光254 nm下專屬的熒光熄滅斑點和乳香與香草醛硫酸乙醇溶液顯色后的紫紅色斑點，將兩者區(qū)分，簡便、快捷、專屬，為首次報道。

3.4 大處方小劑量組方的中藥提取制劑，要提升薄層鑒別的增訂率，提高制劑的可控性，同時使鑒別速度與機械化生產(chǎn)速度相匹配，就必須突破目前一樣、一板、一藥材的鑒別模式，實現(xiàn)薄層鑒別的高效率、多信息、多藥味。對此，本研究提供了一些初探思路，以供同仁參考。

[1] 中華人民共和國藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準(中藥成方制劑)：第 18冊[S].北京，1998：322.

[2] 中華人民共和國藥典委員會.中華人民共和國藥典：2010年版一部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：1138.

[3] 李守拙.頸復康沖劑中小檗堿含量測定方法的探討[J].中草藥，1993，24(2)：75-76.

[4] 李云霞.薄層掃描法測定頸復康沖劑中芍藥甙含量[J].中國中藥雜志，1994，19(11)：674.

[5] 張科衛(wèi)，李偉，崔小兵，等.HPLC法測定胃康靈膠囊中芍藥苷和甘草苷[J].中草藥，2006，37(12)：1821-1822.

(本文編輯：董軍杰)

董占軍(1965—)，男，主任藥師，碩士。從事中藥檢驗及質(zhì)量標準研究。

R282.71；R287

A

1002-2619(2014)01-0107-02

2013-06-03)

△ 通訊作者：河北省食品藥品檢驗院保健食品科，河北 石家莊 050011