郭明衛(wèi),陳麗敏

(1、沙河市人民醫(yī)院檢驗科，河北 沙河054100；2、邢臺縣中心醫(yī)院檢驗科，河北 邢臺054000)

生物參考區(qū)間是解釋分析檢驗結果的依據和程度[1]，由于臨產孕婦體內一系列的生理性變化，其凝血四項指標凝血酶原時間(PT)、部分凝血酶原時間(KPTT)、凝血酶時間(TT)和纖維蛋白原測定(Fg)是否能沿用正常人生物參考區(qū)間有待驗證。根據ISO15189：2003《醫(yī)學實驗室-質量和能力的專用要求》，實驗室必須建立自己的生物參考區(qū)間并定期評審，以確保依據的生物參考區(qū)間的有效性。我們結合ISO15189條款要求和已有的推薦方法[2]，驗證并探討該人群生物參考區(qū)間，以保證生物參考區(qū)間的可靠選用。

1 材料與方法

1.1 標本來源 我院產科正常臨產孕婦，年齡23～37歲，平均為25歲，排除高血壓、血友病及其他能影響血凝指標的疾病，且肝功能、腎功能無異常，尿蛋白陰性。

1.2 標本采集 抽取臨產孕婦靜脈血1.8ml加入含0.2ml(0.109mmol/L)枸櫞酸鈉的真空采血管（湖南安信醫(yī)用高分子材料有限公司生產）中顛倒混勻8～10次，3000r/min離心10min，選擇無溶血、無脂血抗凝血漿檢測，2h內完成測試。

1.3 儀器與試劑 北京普利生儀器有限公司生產的C2000-A全自動血凝儀及配套試劑，方法為磁珠法，試劑在有效期內使用，操作過程嚴格按照實驗室SOP文件的有關要求進行。

1.4 方法

1.4.1 驗證項目的確定 本文選擇臨產孕婦PT、KPTT、TT和Fg，參照NCCLSC28-42推薦方法進行驗證。

1.4.2 對生物參考區(qū)間的驗證 收集40名臨產孕婦標本，在經過性能評價驗證可靠的檢測系統(tǒng)上檢測，檢測結果95%（38名）內落在現用的參考區(qū)間內，判定現用生物參考區(qū)間有效。若試驗數據有3名或3名以上的檢測結果落在參考現用的生物參考區(qū)間外，先檢查檢測系統(tǒng)性能、檢測程序是否正確，之后考慮該項目是否具有人群生物特性，再進一步調查。重新收集120名健康參考個體，進行測定，檢測結果先做離群點的判斷，數據中的疑似離群點的判斷：將疑似離群點和其相鄰點的差值（D）和全距（R）相除，D/R 應≤1/3,＞1/3 考慮為離群點。若有2個或以上疑似離群點，將最小的疑似離群點如上處理，若＞1/3則所有點都刪去，若≦1/3則保留所有數據，若有離群點被刪除后應立即將其他數據補上[2]。

1.4.3 檢測系統(tǒng)/方法準備 參考區(qū)間驗證前需掌握檢測系統(tǒng)的性能和使用的檢測方法，對檢測系統(tǒng)/方法分析性能進行有效驗證和評價，確保實驗室檢測系統(tǒng)性能的關鍵指標如不精密度和不準確度的評價方法和可接受標準，確保檢測系統(tǒng)/方法準確穩(wěn)定。檢測系統(tǒng)采用配套的質控，并且在檢測系統(tǒng)在控的狀態(tài)下檢測試驗標本，記錄試驗數據，保證驗證項目結果的可靠。

2 結果

2.1 臨產孕婦PT、KPTT和TT生物參考區(qū)間驗證結果 40名臨產孕婦PT、KPTT和TT各測定值均落在現用的生物參考區(qū)間范圍內，說明該三項生物參考區(qū)間均適用于臨產孕婦，均通過驗證。

2.2 臨產孕婦Fg生物參考區(qū)間驗證結果 40名臨產孕婦Fg測定結果有19名超出現用的生物參考區(qū)間范圍，提示現用的生物參考區(qū)間不適用于臨產孕婦。按上述驗證方法，所得該組人群Fg的參考區(qū)間為2.44～5.32g/L，與周光泉等報道基本一致[3]。

3 討論

血凝四項檢驗項目已成為產前檢查的常規(guī)檢驗項目。本文顯示，現用PT、KPTT和TT生物參考區(qū)間也適用于臨產孕婦。

Fg生物參考區(qū)間不適用于臨產孕婦，重新確立該組人群的生物參考區(qū)間2.44～5.32g/L。其原因為：(1)Fg概況：人血漿Fg是由于肝細胞合成分泌的一種糖蛋白，是血漿中分子量最大、含量最高的凝血因子。除了作為凝血因子直接參與凝血過程外，纖維蛋白還可介導血小板凝集反應。近年來，大量研究證明，血漿Fg水平的變化與應激、動脈血栓形成及彌散性血管內凝血（DIC）等病理關系密切。

(2)臨產孕婦血漿凝血因子均有不同程度的增高，而作為體內分子量最大的一種凝血糖蛋白Fg含量顯著增高，導致該組人群體內凝血過程處于動態(tài)平衡的高凝狀態(tài)，一方面可以預防或緩解分娩時大量失血，另一方面伴隨妊娠高凝狀態(tài)的同時存在抗凝、纖溶功能降低，增加了孕婦發(fā)生DIC等病理情況發(fā)生的可能。妊娠是一個正常生理過程，妊娠期血漿Fg升高、于妊娠末期平均值可達4.5 g/L，是正常妊娠的特點[4]。

眾所周知，生物參考區(qū)間是判斷健康與否的標準，實驗室必須保證給臨床提供一個正確的生物參考區(qū)間，否則會導致誤診。但限于一般實驗室現行條件，自行制定生物參考區(qū)間存在客觀難度，因而對實驗室的生物參考區(qū)間進行驗證是必要的也是可行的。當生物參考區(qū)間出現偏離時，應當重新確立，確保生物參考區(qū)間的準確性。

本文驗證表明，現用的PT、KPTT和TT的生物參考區(qū)間適用于臨產孕婦；由于臨產孕婦與正常人的差異，現用的Fg的生物參考區(qū)間不適用于臨產孕婦，經過重新確立，臨產孕婦的生物參考區(qū)間為2.44～5.32g/L。

[1]陳桂山.臨床生化檢驗項目生物參考區(qū)間適用性驗證[J].中華檢驗醫(yī)學雜志，2008,31(2):170-174.

[2]陳桂山,楊有業(yè)，梁錦勝，等.臨床醫(yī)學生物實驗室生物參考區(qū)間的建立[J].檢驗醫(yī)學，2008,23（4）:421-424.

[3]周光泉,劉堂兵.晚期妊娠婦女纖維蛋白原水平觀察[J].實驗與檢驗醫(yī)學，2011,29(12):657-658.

[4]樂杰.婦產科學[M].第7版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2008:36.