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食物過敏原致敏性評估方法研究進展

2014-04-08 21:22:11楊安樹高金燕陳紅兵
食品科學(xué) 2014年7期
關(guān)鍵詞:致敏性過敏原特異性

高 琳,楊安樹,高金燕,陳紅兵,

(1.南昌大學(xué) 食品科學(xué)與技術(shù)國家重點實驗室,江西 南昌 330047;2.南昌大學(xué)中德聯(lián)合研究院,江西 南昌 330047;3.南昌大學(xué)生命科學(xué)與食品工程學(xué)院,江西 南昌 330047)

食物過敏(食物超敏反應(yīng))是由食物引起機體免疫系統(tǒng)的異常反應(yīng)。更確切地說,是由食物中的過敏原所引起的變態(tài)反應(yīng)。食物過敏已成為一個全球性公共衛(wèi)生問題。據(jù)報道顯示,成年人的過敏反應(yīng)發(fā)生率約3%~4%,兒童發(fā)生率高達(dá)6%[1]。目前,已確定的過敏性食物有180種以上,據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織報告表明,90%以上食物過敏原存在于牛奶、雞蛋、魚、甲殼類水產(chǎn)品、花生、大豆、堅果類及小麥八大類食物中[2]。食物過敏反應(yīng)對機體的危害很大,可影響呼吸系統(tǒng)、胃腸系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、皮膚、肌肉和骨骼等,甚至可能產(chǎn)生過敏性休克危及生命。目前,國內(nèi)外的研究著重于食物過敏原的致敏性檢測,而關(guān)于食物過敏原致敏性強弱的評價及其判斷標(biāo)準(zhǔn)研究較少。鑒于每個個體對過敏原免疫應(yīng)答的靈敏度不同,食物過敏原的致敏性評價具有重要的意義。

食物過敏反應(yīng)的物質(zhì)基礎(chǔ)包括食物過敏原和特異性IgE。根據(jù)評價對象不同,食物過敏原的致敏性評價方法分為血清學(xué)方法和細(xì)胞學(xué)方法兩大類。血清學(xué)方法主要是根據(jù)蛋白與陽性血清中IgE的結(jié)合能力大小,對其致敏性進行評價。細(xì)胞學(xué)方法則是根據(jù)蛋白刺激免疫細(xì)胞產(chǎn)生炎癥介質(zhì)的情況對其致敏性進行評價的。根據(jù)評價方法進行場所的不同,又可以分為體內(nèi)法、體外法和生物信息學(xué)比對法。體內(nèi)法包括雙盲安慰劑對照的食物激發(fā)實驗(double-blind placebo-controlled food challenges,DBPCFC)、皮膚實驗(skin testing,ST)和動物模型,體外實驗包括過敏原吸附實驗、免疫印跡法(immunoblotting)、酶聯(lián)免疫吸附實驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、組胺釋放實驗和模擬腸胃消化等。

1 體內(nèi)法

體內(nèi)法是使用極微量的食物過敏原刺激機體,然后根據(jù)機體有無過敏反應(yīng)的癥狀或檢測機體內(nèi)IgE的水平來評價食物過敏原的致敏性。

1.1 雙盲安慰劑對照的食物激發(fā)實驗

雙盲安慰劑對照的食物激發(fā)實驗(double-blind,placebo-controlled food challenge,DBPCFC)是使用可疑食物刺激患者,再根據(jù)患者的癥狀確定該食物是否具有致敏性。該法被認(rèn)為是診斷食物過敏的金標(biāo)準(zhǔn),同時也可用于測定致敏性食物的閾值[3]。在缺乏過敏反應(yīng)的情況下,僅根據(jù)血清學(xué)方法檢測IgE的結(jié)果來決定排除飲食是不充分的[4],而使用DBPCFC確定食物過敏原可以有效停止多數(shù)兒童不必要的飲食排除[5]。DBPCFC一般需要在醫(yī)院或門診部進行,要求有能夠處理嚴(yán)重過敏反應(yīng)的醫(yī)護人員和設(shè)備,由經(jīng)驗豐富的護理人員進行操作檢測[6]。實驗中最關(guān)鍵的是控制雙盲、實驗劑量和安慰劑??刂齐p盲要求盡可能消除被檢食物與安慰劑的差別,即媒介物能掩蓋被檢食物的味道、質(zhì)地及氣味,這樣就限制了實驗劑量,但可以盡量減少受試者的主觀因素對實驗結(jié)果的影響[7-8]。對多數(shù)食物、患者和臨床情況,每隔20 min,分別使用3、10、30、100、300、1 000、3 000 mg的攻擊劑比較合適[9]。對于液態(tài)和糊狀食物,使用劑量不能超過250 mL;對于固態(tài)食物,使用劑量不得超過125 g[10]。Vlieg-Boerstra等[10]驗證了幾種分別適用于幼兒、大齡兒童以及成人DBPCFC實驗的含有不同食物過敏原的食譜,有助于該檢測方法的推廣應(yīng)用。Gushken等[11]將DBPCFC實驗應(yīng)用于兒童牛乳過敏的臨床診斷,并認(rèn)為,當(dāng)實驗的執(zhí)行參數(shù)設(shè)置適當(dāng)且有醫(yī)師監(jiān)護時,此法是可行且安全的。

DBPCFC評價食物過敏原的致敏性,主要是根據(jù)激發(fā)劑量與過敏反應(yīng)的強弱程度來評價過敏原的致敏性。產(chǎn)生過敏反應(yīng)需要的激發(fā)劑量小、過敏反應(yīng)強烈,則過敏原的致敏性強,反之則致敏性弱。由于DBPCFC的實驗結(jié)果受多種因素的影響,該方法還需要進一步標(biāo)準(zhǔn)化。口試期間由于使用藥物或短期特異性口服耐受導(dǎo)致的臨床耐受現(xiàn)象,會造成DBPCFC實驗結(jié)果呈假陰性;口試期間未能做到嚴(yán)格的飲食控制,其他孩子和訪客提供被試者可疑食物,或患有異位性濕疹的小孩在飲食排除時沒有排除與濕疹癥狀相關(guān)的食物,都會造成假陽性結(jié)果[12]。van der Zee等[13]發(fā)現(xiàn),隨著年齡及特異性IgE水平的增加,不患異位性皮炎的人接受DBPCFC實驗的靈敏度越高(激發(fā)劑量越低)。由于DBPCFC實驗具有一定風(fēng)險,且目前我國醫(yī)患關(guān)系緊張,DBPCFC實驗在我國極少使用。

1.2 皮膚實驗

皮膚實驗是借助抗原、抗體在皮膚內(nèi)或皮膚上的反應(yīng)進行免疫學(xué)檢測。皮膚實驗有兩種,一種是皮膚點刺實驗(skin prick testing,SPT),另一種是皮內(nèi)實驗(intradermal testing,IDST)。SPT靈敏度與臨床結(jié)果高度一致,且特異性好,但不如皮內(nèi)實驗靈敏[14]。SPT一般選擇前臂內(nèi)側(cè)或后背上健康完整的皮膚,研究表明,后背比前臂內(nèi)側(cè)更適宜于進行SPT[15]。不是所有患者都適合進行SPT,如嚴(yán)重的蕁麻疹患者[16]。Kamdar等[17]研究嗜酸性粒細(xì)胞性食管炎患者時,發(fā)現(xiàn)SPT對氣源性致敏原的預(yù)測比對食物過敏原的預(yù)測更準(zhǔn)確。SPT實驗要結(jié)合血清學(xué)實驗分析,以確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。SPT陰性結(jié)果對排除食物過敏反應(yīng)有較好的準(zhǔn)確性(可信度大于95%),而陽性結(jié)果可能與臨床過敏反應(yīng)相關(guān)。值得一提的是,使用新鮮食物進行該實驗的結(jié)果可信度一般超過90%,甚至可以達(dá)到100%,高于使用市售提取物進行該實驗的結(jié)果可信度[18]。IDST不如SPT應(yīng)用廣泛,主要是由于IDST對受試者存在較大的安全隱患[19]。Peters等[20]研究發(fā)現(xiàn),SPT的臨界值受樣品、統(tǒng)計方法、實驗設(shè)備、過敏原等因素的影響。因此,不能推廣到其他臨床情況,但使用標(biāo)準(zhǔn)化的SPT能夠克服這些局限。STP的標(biāo)準(zhǔn)化包括改善患者的健康狀況和護理條件,減少導(dǎo)致結(jié)果可變的因素,從而使結(jié)果有可比性[21]。Mehl等[22]對牛乳和雞蛋過敏患者研究表明,SPT與血清IgE的結(jié)果一致性很低。因此,這兩種方法不能替換使用,對于SPT或血清學(xué)檢測呈陰性結(jié)果的受試者,應(yīng)該使用其中另一種方法驗證。SPT受試者皮膚上的風(fēng)團大小,能夠反映過敏原的致敏性強弱,風(fēng)團數(shù)量多、直徑大則致敏性強,反之則致敏性弱。

1.3 動物模型

該法的目標(biāo)是提供一個模型,在與其他相關(guān)數(shù)據(jù)聯(lián)用時可以提供有用且可靠的信息,來幫助做出合理的評價[23]。但目前還沒有一種動物能夠滿足理想動物模型的所有要求[3]。常用的動物模型有鼠、狗和豬,在選擇時需要明確操作特點、局限性和不同環(huán)境下的可靠性。常用的鼠的品種有BALB/c近交系小鼠和棕色挪威鼠。鼠模型的優(yōu)點是體積小、繁殖周期短,與人的免疫機制很相似,有豐富的相關(guān)免疫學(xué)信息;其缺點是過敏反應(yīng)復(fù)雜,很難找到可靠的反應(yīng)標(biāo)志物來反映蛋白的潛在致敏性[24]。因此需要檢測相關(guān)的血清學(xué)指標(biāo)。Gizzarelli等[25]通過給BALB/c小鼠口服轉(zhuǎn)基因大豆提取物,檢測小鼠體內(nèi)細(xì)胞因子和IgE的變化,證明BALB/c小鼠在食物過敏原評估中能夠提供一些有價值的信息,但是BALB/c小鼠血液量少,不便于大規(guī)模的分析。棕色挪威鼠通過口服免疫可以產(chǎn)生很高的IgE水平,但是容易受環(huán)境、年齡以及亞臨床感染的影響,甚至可能產(chǎn)生口服耐受。以狗和豬建立動物模型不太常見,主要局限原因是體積較大,飼養(yǎng)不便且管理費用昂貴[26]。狗實驗?zāi)P蛢?yōu)點是內(nèi)臟的解剖生理學(xué)和營養(yǎng)學(xué)求與人類相似,可以做胃腸道的內(nèi)鏡分析,IgE的反應(yīng)水平高,血液量多方便分析。豬的生理特征可以模擬新生嬰兒,因此豬實驗?zāi)P椭饕糜谘芯筐つさ拿庖吡Γ且环N有發(fā)展前景的動物模型[27]。

動物模型模擬人體的過敏反應(yīng),根據(jù)動物體內(nèi)的特異性抗體和細(xì)胞因子的變化情況或過敏反應(yīng)臨床癥狀的強弱,來評價食物過敏原的致敏性強弱。Stagg等[28]在第51屆毒理學(xué)協(xié)會年會上報告,已經(jīng)有證據(jù)表明動物實驗的結(jié)果與人體的免疫反應(yīng)不一致,并且在動物中也只是局部反應(yīng)。盡管如此,動物模型在評價食物過敏原的致敏性方面,仍有很大的參考價值。

2 體外法

利用體外檢測方法來評價食物過敏原的潛在致敏性,比體內(nèi)實驗檢測更安全可行。在目前的研究和實踐中,體外檢測方法主要從血清學(xué)和細(xì)胞學(xué)的角度來評價食物過敏原的潛在致敏性。

2.1 血清學(xué)方法

過敏患者的血清中含有能與過敏原特異性結(jié)合的IgE抗體,可以根據(jù)被檢蛋白與人血清中IgE的結(jié)合能力評價該蛋白的潛在致敏性。為了克 服對人血清的依賴,一些依賴鼠、兔子等動物的抗血清的免疫分析方法逐漸發(fā)展起來。目前常用的血清學(xué)方法主 要包括放射過敏原吸附抑制實驗 (radio-allergosorbe nt test inhibition,RAST抑制實驗)、酶標(biāo)記過敏原吸附抑制實驗(enzyme allergosorbent test inhibition,EAST抑制實驗)、免疫印跡法(immunoblotting)和酶聯(lián)免疫吸附實驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)。

2.1.1 RAST和EAST抑制實驗

RAST和EAST是目前國際上研究過敏反應(yīng)使用較廣泛的方法,其靈敏度和準(zhǔn)確性高,同時解決了不同食物過敏原間交叉反應(yīng)的問題。因此,它們是評價過敏原總致敏性的關(guān)鍵技術(shù)。但由于RAST和EAST抑制實驗嚴(yán)重依賴人血清,而血清難以保證一致, RAST與EAST難以標(biāo)準(zhǔn)化;而且RAST實驗過程中的放射性危害嚴(yán)重,有損工作人員的健康。因此,在2001年修訂的FAO/WHO推薦的檢測食物過敏原的方法中,并沒有推薦上述兩種方法。目前,國外大醫(yī)院和主要過敏原生產(chǎn)企業(yè)基本都使用原法瑪西亞公司開發(fā)的UniCAP系統(tǒng)進行RAST抑制實驗,該系統(tǒng)還可以進行熒光酶聯(lián)免疫分析。

2.1.2 免疫印跡法(immunoblotting)

免疫印跡法是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學(xué)分析技術(shù)相結(jié)合的雜交技術(shù),此法具有分析容量大、敏感度高、特異性強等優(yōu)點,但是操作復(fù)雜費時,常與ELISA聯(lián)用檢測過敏食物的致敏性。

2.1.3 酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)

ELISA是20世紀(jì)90年代末期發(fā)展起來的一門新技術(shù),該法靈敏度高、特異性好且操作方便。但ELISA僅能確定抗原與抗體特異性結(jié)合,并不能判定食物過敏原致敏性的強弱,還需要聯(lián)合其他方法進一步檢測才能確定食物過敏原的致敏性。根據(jù)操作不同,ELISA主要分為雙抗體夾心法、間接法、捕獲法和競爭法,其中應(yīng)用最廣泛的是雙抗夾心ELISA和競爭ELISA。ELISA不僅可以進行定性分析,還可進行定量分析。Patrick等[29]使用間接ELISA定量檢測了白酒中的酪蛋白,并通過免疫印跡法進行了驗證。近年來,ELISA技術(shù)發(fā)展較快,其靈敏度和特異性都有所提高。競爭ELISA也可用于定量檢測食物過敏原。Ma Xi等[30]使用單抗進行競爭ELISA,能夠很靈敏地檢測出大豆球蛋白,檢測限為0.3 ng/mL,IC50值為1.7 ng/mL,線性范圍為0.3~11.2 ng/mL。ELISA反應(yīng)中,IC50值越小,食物過敏原的致敏性越強,反之越弱。同時檢測多種食物過敏原時,可能發(fā)生交叉反應(yīng)從而影響結(jié)果的準(zhǔn)確性,但是,夾心ELISA可以克服食物過敏原間的交叉反應(yīng)。如,Redl等[31]使用夾心ELISA檢測食物中的芝麻過敏原時發(fā)現(xiàn),芝麻過敏原不與其他19種過敏食物發(fā)生交叉反應(yīng)。另外,Ecker等[32]使用夾心ELISA檢測食物中的羽扇豆過敏原,也得到類似的結(jié)論。

2.2 細(xì)胞學(xué)方法

食物過敏反應(yīng)中,免疫細(xì)胞會發(fā)生一系列的變化,其中包括細(xì)胞因子的釋放和T細(xì)胞增殖等,可以通過檢測免疫 細(xì)胞的一系列變化來評價食物過敏原的致敏性。一般而言,細(xì)胞因子釋放量越多,T細(xì)胞增殖劇烈,食物過敏原的致敏性越強,反之致敏性較弱。

2.2.1 組胺釋放實驗(histamine releasing test,HRT)

IgE介導(dǎo)的過敏反應(yīng)會引起體內(nèi)組胺的大量釋放,組胺的釋放量可以用熒光RAST測定。但是由于組胺測定必須在抽血后一天之內(nèi)完成,并且過敏患者的血清來源不足,以及該實驗易受環(huán)境和操作條件的影響,該法在實際應(yīng)用中受到很大限制。

Church等[33]研究發(fā)現(xiàn),肥大細(xì)胞的組胺釋放實驗受細(xì)胞分散方式的影響,酶促分散的細(xì)胞釋放的組胺量多于機械力分散的細(xì)胞的組胺釋放量。鼠RBL-2H3細(xì)胞株是常用于肥大細(xì)胞介質(zhì)釋放實驗的模型[34],研究表明RBL-2H3細(xì)胞株進行細(xì)胞介質(zhì)釋放實驗,結(jié)果與人的嗜堿性粒細(xì)胞結(jié)果吻合,使用該細(xì)胞株可以減少患者反復(fù)抽血的痛苦,也更便于開展研究[35]。

2.2.2 嗜堿性粒細(xì)胞活性測試與脫顆粒實驗

嗜堿性粒細(xì)胞的活性和脫顆粒的量與過敏原的致敏性密切相關(guān),過敏原的致敏性越強,則嗜堿性粒細(xì)胞的活性越強,脫顆粒的量越大。CD63與CD203c常被用作過敏原與IgE交聯(lián)引發(fā)嗜堿性細(xì)胞激活的標(biāo)記,研究表明,通過試劑盒檢測CD63與CD203c可以有效診斷兒童雞蛋過敏和牛乳過敏[36-37]。de Weck等[38]認(rèn)為,嗜堿性粒細(xì)胞的活性測試能夠可靠地用于診斷過敏患者。使用嗜堿性粒細(xì)胞活性測試技術(shù)檢測食物過敏原特異性好、靈敏度高,而且對接受抗組胺藥物治療的患者的檢測結(jié)果仍然可靠[39],是傳統(tǒng)定量測定IgE水平和皮膚實驗的補充。目前的挑戰(zhàn)是如何將該法進行標(biāo)準(zhǔn)化,使其成為檢測食物過敏原致敏性的主流方法[40],并應(yīng)用于食物過敏原致敏性評價中。

2.2.3 T細(xì)胞反應(yīng)分析

IgE介導(dǎo)的食物過敏反應(yīng)的一個重要階段是T細(xì)胞增殖和細(xì)胞因子(IL-10、IL-13、IFN-γ和TNF-α)的產(chǎn)生。過敏患者的外周血單核細(xì)胞中含有少量的特異性T細(xì)胞,可用作T細(xì)胞克隆的來源,通過測定T細(xì)胞的增殖情況及細(xì)胞因子釋放的情況,可以研究蛋白的潛在致敏性的強弱及確認(rèn)T細(xì)胞的表位。Flinterman等[41]研究表明,T細(xì)胞受花生提取物刺激時會產(chǎn)生Th1和Th2兩類細(xì)胞因子,但是再次受到花生過敏原刺激時,過敏個體僅會加強Th2應(yīng)答。因此,T細(xì)胞的反應(yīng)情況可用于評價食物過敏原的致敏性。該法與動物實驗聯(lián)用可以解釋決定蛋白致敏性的結(jié)構(gòu),但是T細(xì)胞反應(yīng)分析操作困難、耗時,研究中較少使用。

2.3 其他體外評價技術(shù)

2.3.1 消化穩(wěn)定性

消化穩(wěn)定性是指蛋白質(zhì)在人體或模擬人體的胃腸消化體系中的降解程度。許多重要的食物過敏原對胃蛋白酶的消化穩(wěn)定較好。雖然胃蛋白酶消化的預(yù)測價值存在爭論,但是有研究表明,標(biāo)準(zhǔn)化的條件(pH 1.2或pH 2.0),通過固定胃蛋白酶的活性比例來檢測蛋白可以較準(zhǔn)確地評估蛋白的致敏性,部分高度穩(wěn)定的蛋白不會引起食物過敏[42]。因此,一般情況下可以認(rèn)為,過敏原的消化穩(wěn)定性越好,其致敏性越強,反之致敏性越弱。

2.3.2 生物傳感器

生物傳感器是近十幾年興起的一 種檢測食物過敏原的新技術(shù)。生物傳感器將傳統(tǒng)的免疫測試結(jié)果通過傳感器轉(zhuǎn)換為可選擇的半定量和定量信息,還能實時監(jiān)測到表面的抗原抗體反應(yīng),根據(jù)過敏原與特異性抗體反應(yīng)的程度,可以評價食物過敏原的致敏性強弱。生物傳感器技術(shù)具有方便、省時、精度高、便于計算機收集和處理數(shù)據(jù)等優(yōu)點,又不會或很少損傷樣品和造成污染,易于推廣普及[43]。但是,生物傳感器檢測食物過敏原時,食物中的基質(zhì)可能使檢測結(jié)果呈假陽性。因此,還需要進一步的研究以解決此難題[44]。近些年,隨著材料科學(xué)、微電子學(xué)和光電子學(xué)的快速發(fā)展,生物傳感器也得到了較好發(fā)展。單抗、RNA、DNA和納米材料在生物傳感器中的應(yīng)用,提高了生物傳感器的靈敏度和特異性[45]。目前,市場上已有可檢測牛奶、雞蛋、花生、榛子、芝麻和貝類中過敏原的生物傳感器[46]。Pollet等[47]使用納米磁珠增強光纖等離子共振體生物傳感器的信號,并以Ara h 1為實例進行檢測驗證,結(jié)果顯示其動態(tài)線性范圍為0.1~2 μg/mL,比ELISA的靈敏度更高、動態(tài)線性范圍更廣。

3 生物信息學(xué)比對法

食物過敏性安全評估越來越多地使用生物信息學(xué)工具來評價未知蛋白的致敏性。生物信息學(xué)比對法一般用于轉(zhuǎn)基因食物中過敏原的致敏性評價。生物信息學(xué)方法不是預(yù)測分析,它不能判斷一種蛋白是否會成為過敏原,但可以判斷該蛋白是否是與已知過敏原或者是否能與已知過敏原發(fā)生交叉反應(yīng)[48]。蛋白質(zhì)中氨基酸序列的同源性包括線性序列和構(gòu)象序列的同源性[49]。常用的致敏性蛋白數(shù)據(jù)庫主要是Allergen Online,其他可用的數(shù)據(jù)庫大多不如該數(shù)據(jù)庫更新頻繁或者沒有列出明確的篩選條件[42]。當(dāng)待查詢的序列信息在數(shù)據(jù)庫中無相關(guān)數(shù)據(jù)時,該法的使用就受到了限制。此法常用的比對程序為FAST與BLAST。一個蛋白與已知過敏原總體序列有大于70%的相似度可發(fā)生交叉反應(yīng),低于50%則不會發(fā)生IgE交叉反應(yīng)[42],且在軟件中使用80個氨基酸滑動窗口檢測時,有35%的序列相同或者至少有6個連續(xù)的氨基酸相同,則認(rèn)為該蛋白有相似的致敏性[3]。當(dāng)生物信息學(xué)檢測結(jié)果的相似性超過上述標(biāo)準(zhǔn)時,并不能證明該蛋白一定具有潛在的致敏性,還需要更嚴(yán)格的血清學(xué)方法或其他方法的驗證[48]。在檢測可能的IgE表位(如短的連續(xù)氨基酸序列)時,容易產(chǎn)生假陽性結(jié)果。因此,不推薦該項檢測作為常規(guī)檢測項目[48,50]。

此外,“基于調(diào)整的過濾長度檢測過敏原多肽(DFLAP)”是近幾年發(fā)展起來的評估蛋白致敏性的新算法。DFLAP評估蛋白的致敏性的靈敏度高,特異性好,EVALLER為基于此算法的網(wǎng)絡(luò)服務(wù)器[51]。Zou Zehong等[52]用EVALLER分析鑒定出5種過敏原基因。Goodman等[53]使用生物信息學(xué)方法與胃蛋白酶消化相結(jié)合的方法,研究牛乳堿性蛋白(MBP),結(jié)果顯示MBP中的蛋白幾乎不會增加牛乳過敏癥患者的過敏風(fēng)險或與其他過敏原交叉反應(yīng)的幾率。通過生物信息學(xué)方法預(yù)測后,仍需要進一步用血清學(xué)或細(xì)胞學(xué)的方法檢測目標(biāo)蛋白是否能夠結(jié)合特異性IgE,從而評價其致敏性。

4 結(jié) 語

目前還沒有關(guān)于食物過敏原致敏性強弱評價的標(biāo)準(zhǔn)。如果制定了標(biāo)準(zhǔn)化的評價流程,利用現(xiàn)有的技術(shù),可以用于評價食物過敏原致敏性強弱。不同評價技術(shù)各有其優(yōu)缺點,通常需要同時使用多種方法才能有效評價一種過敏原的致敏性。DBPCFC和SPT能很直觀地反映食物過敏原的致敏性強弱,但是會給受試者帶來痛苦,而且容易產(chǎn)生假陽性結(jié)果。因此,需要進一步研究以將這兩種方法標(biāo)準(zhǔn)化,并在實驗過程中嚴(yán)格控制被試者的飲食。動物模型能夠提供極具參考價值的信息,但是動物實驗的結(jié)果是否與人體過敏反應(yīng)一致還有待研究。因此需要建立一種與人體過敏反應(yīng)極為相似的動物模型。血清學(xué)方法安全可行,但是檢測結(jié)果不夠直觀,僅能反映免疫球蛋白與過敏原的結(jié)合能力,并不能真實反映過敏原的致敏性,需要結(jié)合其他方法進一步分析。細(xì)胞學(xué)方法結(jié)果可靠,但是分析操作復(fù)雜、耗時,有待于標(biāo)準(zhǔn)化使其成為檢測過敏原致敏性強弱的主流方法。生物傳感器技術(shù)靈敏度高特異性好,但是實際推廣應(yīng)用還有待時日。生物信息學(xué)方法多用于轉(zhuǎn)基因食物的致敏性分析,對過敏原數(shù)據(jù)庫的依賴較大,需要建立實時更新的過敏原數(shù)據(jù)庫。近年來發(fā)展起來的檢測過敏原的新技術(shù),如過敏原芯片技術(shù)、實時定量PCR技術(shù)等,能用于檢測食物過敏原的存在性,但不能評價過敏原的致敏性強弱,要將這些技術(shù)應(yīng)用于食物過敏原的致敏性評價,還需要進一步的研究和完善。綜上所述,還需要更進一步地研究,以建立快速、高效、精準(zhǔn)的食物過敏原致敏性的評估方法。

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