盧寨娥 蔣競

雌激素治療對絕經(jīng)婦女Th1/Th2平衡的影響

盧寨娥 蔣競

目的 探討雌激素治療對絕經(jīng)婦女輔助性T細胞1（Th1）/輔助性T細胞2（Th2）平衡的影響。方法將研究對象分為生育年齡組、絕經(jīng)組、雌激素治療組共3組，每組各10例，分離、培養(yǎng)所有研究對象外周血T淋巴細胞，ELISA法測培養(yǎng)液上清液IL-4、IFN-γ質(zhì)量濃度，并計算IFN-γ/IL-4比值。結(jié)果絕經(jīng)組IFN-γ水平明顯高于生育年齡組、IL-4水平顯著低于生育年齡組、IFN-γ/IL-4比值顯著高于生育年齡組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0．05或0．01）；雌激素治療組IL-4水平顯著低于生育年齡組、IFN-γ/IL-4比值顯著高于生育年齡組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0．01）；雌激素治療組IFN-γ水平明顯低于絕經(jīng)組、IL-4水平顯著高于絕經(jīng)組、IFN-γ/IL-4比值顯著低于絕經(jīng)組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0．05或0．01）。結(jié)論絕經(jīng)后發(fā)生Th1/Th2平衡變化，出現(xiàn)向Th1漂移現(xiàn)象，而雌激素治療能改善Th1/Th2平衡的偏移。

雌激素 絕經(jīng) Th1/Th2細胞

CD4+輔助性T細胞（Th）按產(chǎn)生細胞因子的種類不同分為兩大類：輔助性T細胞1（Th1）和輔助性T細胞2（Th2），Th1主要分泌IFN-γ、IL-2、TNF等Ⅰ型細胞因子，參與細胞毒性T細胞介導(dǎo)的細胞免疫，在抗細胞內(nèi)感染（如病毒感染、結(jié)核分枝桿菌感染等）中發(fā)揮重要作用；而Th2主要分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10等Ⅱ型細胞因子，其功能在于刺激B細胞增殖及嗜酸性粒細胞活化，促進抗體（IgG1與IgE）產(chǎn)生，參與體液免疫，在抗細胞外感染與致敏原引起的免疫應(yīng)答中起重要作用。目前，我國已步入老齡化社會，相關(guān)老年疾病如骨質(zhì)疏松癥、心血管疾病、感染性疾病、老年癡呆癥、尿失禁等嚴(yán)重影響絕經(jīng)婦女的生活質(zhì)量。隨著2002年 WHI（Women′s Health Initiative）研究問世，有關(guān)激素治療的臨床應(yīng)用與利弊分析再次成為世界關(guān)注的熱點。本研究通過給予手術(shù)絕經(jīng)或自然絕經(jīng)婦女雌激素口服3個月，觀察雌激素治療后Th1、Th2型細胞因子IFN-γ、IL-4水平的變化，了解和明確雌激素治療對絕經(jīng)婦女免疫功能的影響。

1 對象和方法

1.1 對象 選取2009-01—2011-l2本院婦產(chǎn)科門診的女性患者30例，年齡25～35（27±4.57）歲者10例（生育年齡組），具有正常卵巢功能、月經(jīng)規(guī)則；年齡48～60（53±2.48）歲者20例，均因良性疾?。ㄈ缱訉m肌瘤）行手術(shù)切除子宮與雙側(cè)卵巢，其中10例為絕經(jīng)組，10例為雌激素治療組。治療組絕經(jīng)婦女具有激素補充療法適應(yīng)證，無激素補充療法禁忌證，在入組前至少3個月未接受激素補充治療。所有研究對象無免疫系統(tǒng)疾病，1年內(nèi)未使用過對免疫功能有影響的藥物。

1.2 給藥方法 生育年齡組及絕經(jīng)組均口服安慰劑1片/d，連續(xù)服用3個月；雌激素治療組口服戊酸雌二醇片（商品名：補佳樂）1mg/d，連續(xù)服用3個月。

1.3 IL-4和IFN-γ水平測定 所有研究對象用藥3個月后抽取外周靜脈血，分離外周血淋巴細胞，制備T淋巴細胞懸液，取1×106/ml T淋巴細胞置于RPMI 1640中加10%FBS，0.1mM MEM非必須氨基酸，5mM L-谷氨酸鹽，100μg/ml鏈霉素，100IU/ml青霉素，在37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，培養(yǎng)后取上清液，采用ELISA法測定IL-4和IFN-γ水平。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件，計量資料均以表示，組間比較采用方差分析。

2 結(jié)果

3組對象IFN-γ、IL-4水平及IFN-γ/IL-4比值的比較見表1。

表1 3組對象IFN-γ、IL-4水平及IFN-γ/IL-4比值的比較

由表1可見，絕經(jīng)組IFN-γ水平明顯高于生育年齡組、IL-4水平顯著低于生育年齡組、IFN-γ/IL-4比值顯著高于生育年齡組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05或0.01）；雌激素治療組IL-4水平顯著低于生育年齡組、IFN-γ/IL-4比值顯著高于生育年齡組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.01）；雌激素治療組IFN-γ水平明顯低于絕經(jīng)組、IL-4水平顯著高于絕經(jīng)組、IFN-γ/IL-4比值顯著低于絕經(jīng)組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05或0.01）。

3 討論

絕經(jīng)期婦女卵巢功能衰退，體內(nèi)雌激素水平下降，出現(xiàn)免疫老化和免疫功能的重塑[1-3]。正常免疫功能的維持依賴于適度的淋巴細胞凋亡及精確的Th1/Th2平衡。大量研究證實，Th1和Th2是一對重要的調(diào)節(jié)細胞，同時Th1和Th2細胞又互為抑制細胞，Th1細胞分泌的IFN-γ可抑制Th2細胞的分化和功能，Th2細胞分泌的IL-4可抑制Th1細胞的分化和功能。單個細胞表達細胞因子并非隨意性的，IL-4和IL-5常同時表達，IL-4和IFN-γ通常相互排斥。故有時Th1或Th2細胞即指產(chǎn)生IFN-γ或IL-4的細胞[4]。研究發(fā)現(xiàn)，老年人外周血CD4+T細胞產(chǎn)生的IFN-γ高于年輕組，而IL-4降低[5-7]，提示老年個體有Thl極化現(xiàn)象。

相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，性激素可影響Th1/Th2平衡[8]。近年來有研究報道，激素補充治療能夠改善絕經(jīng)婦女Thl/ Th2平衡，影響骨代謝[9-10]。性別和性激素可影響Th1/Th2型細胞因子產(chǎn)物。與女性相比，男性淋巴細胞與植物血凝蛋白共培養(yǎng)后產(chǎn)生高水平的IFN-γ和IL-2，而IL-4和IL-10的水平較低[11]。目前，已有大量證據(jù)表明，女性絕經(jīng)后自發(fā)出現(xiàn)的Th1型細胞因子增加與卵巢功能減退有關(guān)[12]，表明雌激素水平可影響體內(nèi)Th1/Th2平衡，引起Th1/Th2平衡向TH1漂移，可能是引發(fā)衰老機體免疫功能紊亂，削弱了機體對抗細胞外微生物感染的能力的一個重要原因。本研究結(jié)果顯示，絕經(jīng)組婦女IFN-γ水平明顯高于生育年齡組，絕經(jīng)組IFN-γ/IL-4比值顯著高于生育年齡組，提示絕經(jīng)婦女Th1/Th2平衡向Th1漂移，削弱了老年機體對抗細胞外微生物感染的能力；雌激素治療組IFN-γ水平明顯低于絕經(jīng)組、高于生育年齡組，IL-4水平顯著高于絕經(jīng)組、低于生育年齡組，可見雌激素治療可以明顯改善絕經(jīng)婦女Th1/Th2平衡向Th1漂移，從而可能增加了機體對抗細胞外微生物感染的能力。

綜上所述，隨著年齡增長，Th1/Th2平衡向Th1漂移，引起Th1型細胞因子IFN-γ分泌增加，削弱了機體對抗細胞外微生物感染的能力，引發(fā)衰老機體免疫功能紊亂。雌激素治療后可以減少絕經(jīng)婦女Th1型細胞因子IFN-γ的分泌，從而糾正Th1/Th2失衡，促進抗體（IgG1與IgE）產(chǎn)生，參與體液免疫，而Th2型細胞因子IL-4分泌增加，增強機體對抗細胞外微生物感染的能力，干預(yù)免疫衰老，可為激素替代治療提供有利的理論依據(jù)。

[1]郝群,李大金．免疫系統(tǒng)衰老的研究進展[J]．現(xiàn)代免疫學(xué)雜志,2003,23 (1)：60-62．

[2]DeVeale B,Brummel T,Seroude L．Immunity and aging：the enemy within[J]．Aging Cell,2004,3(4)：195-208．

[3]Uciechowski P,Kahmann L,Plumakers B,et al．TH1 and TH2 cellpolarization increases with aging and is modulated by zinc supplementation[J]．Experimental Gerontology,2008,43(5)：493-498．

[4]Openshaw P,Murphy E E,Hosken N A,et al．Heterogeneity of intracellular cytokine synthesis at the single-cell level in polarized T helper 1 and T helper 2 populations[J]．The Journal of Experimental Medicine,1995,182(5)：1357-1367．

[5]SakataKaneko S,Watatsuki Y,Matsunage Y,et al．Altered Thl/Th2 commitment in human CD4+T cells with aging[J]．Clin Exp Immunol,2000,120(2)：267-273．

[6]Green D R,Scott D W．Activation induced apoptosis in lymphocyte [J]．Curr Opin Immunol,1994,6(3)：476-487．

[7]Kamada M,lrahara M,Maegawa M,et al．Transint increase in the levels of T-helped cytokines in postmenopausal women and the effects of hormone replacement therapy[J]．Gynecol Obstet Invest,2001,52(2)：82-88．

[8]González D A,Díaz B B,Rodríguez Pérez Mdel C,et al．Sex hormones and autoimmunity[J]．Immunology Letters,2010,133(3)：6-13．

[9]Xia X,Zhang S,Yu Y,et al．Effects of estrogen replacement therapy on estrogen receptor expression and immunoregulatory cytokine secretion in surgically induced menopausal women[J]．Journal Of Reproductive Immunology,2009,81(1)：89-96．

[10] Pizzo G,Guiglia R,Licata M E,et al．Effects of hormone replacement therapy on plasma pro-inflammatory and anti-inflammatory cytokines and some bone turnover markers in postmenopausal women[J]．Med Sci Monit,2011,17(4)：23-27．

[11] Girón-González J A,Moral F J,Elvira J,et al．Consistent production of a higher TH1：TH2 cytokine ratio by stimulated T cells in men compared with women[J]．Eur J Endocrinol,2000,143(1)：31-36．

[12]Salem M L,Estrogen．A double-edged sword：modulation of Th1-and Th2-Mediated inflammations by differential regulation of TH1/TH2 cytokine production[J]．Curr Drug Targets Inflamm Allergy,2004,3(1)：97-104．

Effects of estrogen therapy on the Th1/Th2balance in postmenopausal women

ObjectiveTo investigate the effects of estrogen therapy on Th1/Th2 balance in postmenopausal women．MethodsThe study included 10 women in child-bearing period,10 postmenopausal women and 10 postmenopausal women with estrogen therapy．The peripheral blood lymphocytes were separated and cultured,the levels of IL-4 and IFN-γ in cultured supernatant were measured by ELISA,and ratio of Th1/Th2(IFN-γ/IL-4)was calculated．ResultsThe IFN-γ level in postmenopausal women was significantly higher,the IL-4 level was lower and the IFN-γ/IL-4 ratio was higher than those in child-bearing period women(P＜0．05 or 0．01)．The IL-4 level in estrogen therapy group was lower and IFN-γ/IL-4 ratio was higher than those in child-bearing period group (both P＜0．01)．The IFN-γ level was lower,the IL-4 level was higher and the IFN-γ/IL-4 ratio in estrogen therapy group was lower than those in postmenopausal group (P＜0．05 or 0．01)．ConclusionThe peripheral blood lymphocytes shift towards Th1in post-menopausal women,and estrogen therapy can regulate the Th1/Th2balance．

Estrogen PostmenopausalTh1/Th2cell

2012-11-06）

（本文編輯：歐陽卿）

浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生科研基金資助項目（2006A106）

315000 寧波市婦女兒童醫(yī)院婦產(chǎn)科