張宗美,柴勇,孟霞.辣椒新品種‘艷椒425’中辣椒素及二氫辣椒素含量測定[J].南方農(nóng)業(yè),2014,8(1):54-55
摘 要 以辣椒新品種‘艷椒425’為材料,采用高效液相色譜法測定其辣椒素和二氫辣椒素含量,結(jié)果表明該品種辣椒素含量平均值為2433.9 mg/kg,二氫辣椒素含量平均值為1145.4 mg/kg,均高于對照‘朝天148’,為辛辣味較重的加工型辣椒,適宜在重慶及西南地區(qū)推廣種植。
關(guān)鍵詞 辣椒;艷椒425;高效液相色譜法;辣椒素;二氫辣椒素
中圖分類號:S641.3;TS207.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號: 1673-890X(2014)01-054-02
辣椒又稱辣子,屬茄科辣椒屬植物,具有抗癌、消炎鎮(zhèn)痛、調(diào)節(jié)體溫等作用,是人們餐桌上不可缺少的調(diào)味品和菜肴[1-2]。評價(jià)辣椒品質(zhì),除評價(jià)辣椒果實(shí)中的營養(yǎng)成分,果實(shí)色澤以及外形以外,更重要的是辛辣程度,因而辣椒素的測定已經(jīng)成為辣椒品質(zhì)鑒定、品種選育的主要指標(biāo)之一。辣椒中的主要呈辣物質(zhì)是辣椒堿,它包括5種物質(zhì),即辣椒素、二氫辣椒素、降二氫辣椒素、高辣椒素和高二氫辣椒素,其中辣椒素和二氫辣椒素占辣椒堿總量的90%,二者的含量越高表明辣味越強(qiáng)[3]。本文采用高效液相色譜法對辣椒新品種‘艷椒425’中辣椒素和二氫辣椒素的含量進(jìn)行測定分析[4-5],為選育加工型辣椒新品種提供科學(xué)依據(jù)。
1材料與方法
1.1儀器和試劑
1.1.1 儀器
(1)高效液相色譜儀,沃特斯公司生產(chǎn),帶熒光檢測器;(2)天平,感量為0.0001 g;(3)超聲波提取器,WH-600型,40 kHz,濟(jì)寧萬和超聲電子設(shè)備有限公司生產(chǎn);(4)高速粉碎機(jī),Pulverisette14,德國FRTSCH分析儀器公司生產(chǎn);(5)電子恒溫不銹鋼水浴鍋,HHS-4S型,上??德穬x器設(shè)備有限公司生產(chǎn);(6)0.45 μm有機(jī)溶劑過濾膜。
1.1.2 試劑
(1)甲醇,HPLC級;(2)四氫呋喃,分析純;(3)水,HPLC級;(4)甲醇-四氫呋喃溶液(1+1),取200 mL甲醇和200 mL四氫呋喃混合均勻備用;(5)無水硫酸鈉,分析純,用前400℃烘干30 min,磨碎;(6)辣椒素標(biāo)準(zhǔn)品,購于中國食品藥品檢定研究院,純度大于95%;(7)二氫辣椒素標(biāo)準(zhǔn)品,購于中國食品藥品檢定研究院,純度大于90%;(8)測試樣品為干制樣品‘艷椒425’,對照樣品為干制樣品辣椒‘朝天148’,由重慶市農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所辣椒室提供。
1.2方法
1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液制備
稱取25 mg辣椒素(純度95%)和25 mg二氫辣椒素(純度90%),放入經(jīng)甲醇洗滌過的燒杯中,加入少量甲醇溶解,然后將溶液轉(zhuǎn)入25 mL容量瓶中,用甲醇定容,作為標(biāo)準(zhǔn)貯備液。再分別量取辣椒素、二氫辣椒素標(biāo)準(zhǔn)貯備液各l mL置入10 mL容量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻作為標(biāo)準(zhǔn)溶液。
1.2.2 樣品溶液提取
將干制樣品用電動磨碎機(jī)磨碎,稱取0.2000 g于100 mL錐形三角瓶中,加入25 mL甲醇-四氫呋喃(1+1)溶液,在60℃水浴條件下,用超聲波提取器提取30 min,過濾后收集濾液。將濾渣連同濾紙重新用25 mL甲醇-四氫呋喃溶液經(jīng)超聲波提取器再提取10 min后,再重復(fù)1次。把3次過濾收集的濾液合并,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在70℃下濃縮,甲醇定容至25 mL,在75℃恒溫水浴下濃縮至30 mL左右,轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶,用甲醇-四氫呋喃溶液定容。經(jīng)0.45 μm有機(jī)相濾膜過濾后進(jìn)行色譜分析,記錄色譜圖。
1.2.3 色譜條件
(1)色譜柱C18150 mm×4.6 mm,粒徑5 μm;(2)流動相甲醇-水(80∶20),用前過0.45 μm濾膜,脫氣;(3)流速0.6 mL/min;(4)熒光檢測器激發(fā)波長229 nm,發(fā)射波長320 nm;(5)進(jìn)樣量10 μL。
2結(jié)果與分析
2.1回歸方程、線性范圍和檢出限
將辣椒素、二氫辣椒素標(biāo)準(zhǔn)儲備液分別用甲醇稀釋成質(zhì)量濃度為0.2, 1.0, 10.0, 20.0, 40.0, 80.0, 160.0 mg/mL系列標(biāo)準(zhǔn)工作液,按上述色譜條件測定。以辣椒素、二氫辣椒素質(zhì)量濃度為縱坐標(biāo),相應(yīng)的峰面積積分值為橫坐標(biāo),求得線性回歸方程(見表1)。
2.2準(zhǔn)確性試驗(yàn)
2.2.1 精密度
取適量配制好的混合對照品溶液,用0.45 μm濾膜微過濾后測定分析,連續(xù)進(jìn)樣6次,辣椒素和二氫辣椒素2種對照品分析結(jié)果相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD分別為0.46%和0.80%,表明儀器精密度良好,符合測定要求。
2.2.2 重復(fù)性
取同一供試樣品溶液,平行測定3次,考察高效液相色譜儀測定的重復(fù)性,辣椒素和二氫辣椒素的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.57%和0.86%,符合實(shí)驗(yàn)要求。
2.2.3 回收率
取辣椒樣品,分別做2.00, 20.0, 80.0, 200.0, 800.0 mg/kg水平的添加實(shí)驗(yàn),用上述方法測定辣椒素、二氫辣椒素含量,可見添加回收率為87.60%~100.02%。
2.3樣品含量測定
按照材料與方法,樣品溶液各10 μL,重復(fù)3次,測定峰面積,由線性方程計(jì)算辣椒素及二氫辣椒素的含量(見表2)。
從表2可以看出,‘艷椒425’中辣椒素含量平均值為2433.9 mg/kg、二氫辣椒素含量的平均值為1145.4 mg/kg,均高于對照‘朝天148’ 辣椒素含量平均值1970.0 mg/kg和二氫辣椒素含量平均值和734.9 mg/kg。
3小結(jié)
根據(jù)以上高效液相色譜法測定分析結(jié)果可知,辣椒新品種‘艷椒425’中的辣椒素和二氫辣椒素含量高,屬于辛辣味較重的加工型辣椒,較適宜在重慶及西南地區(qū)推廣種植。而對該品種中辣紅素、干物質(zhì)和脂肪等分析的測定還需進(jìn)一步研究。
參考文獻(xiàn)
[1]紀(jì)敏慧,李國偉,郭飛燕,等.海南黃燈籠辣椒中辣椒堿的含量測定[J].中國調(diào)味品,2011,36(8):98-101.
[2]Hideki N,Motamed E M,Yasutake S,et al.Capsaicin pretreatment attenuates LPS-induced hypothermia through TRPV1-independent mechanisms in chicken [J].Life Sciences,2008,82(23/24):1191-1195.
[3]王旭,王富華,鐘紅艦,等.高效液相色譜法測定食品中的辣椒素、二氫辣椒素[J].食品科學(xué),2008,29(7):378-381.
[4]徐愛平,王富華,王曉容,等.高效液相色譜法-熒光法測定辣椒素和二氫辣椒素[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2005,24(6):592-595.
[5]NY/T 1381-2007,辣椒素的測定 高效液相色譜法[S].
(責(zé)任編輯:敬廷桃)