張三軍

（河南省駐馬店市動物疫病預(yù)防控制中心，河南駐馬店 463000）

一例豬瘟與副豬嗜血桿菌混合感染的診治分析

張三軍

（河南省駐馬店市動物疫病預(yù)防控制中心，河南駐馬店 463000）

本文根據(jù)河南省駐馬店市某養(yǎng)殖場發(fā)病豬群的發(fā)病情況、臨床癥狀、剖檢癥狀、細(xì)菌分離鑒定及病原學(xué)RT-PCR檢測等結(jié)果，確診該豬群發(fā)生了豬瘟與副豬嗜血桿菌的混合感染，并提出了相關(guān)的治療措施，還就目前養(yǎng)殖場易發(fā)的混合感染疾病進(jìn)行了討論分析。

豬瘟；副豬嗜血桿菌；臨床癥狀；細(xì)菌分離；病原學(xué)RT-PCR檢測

2014年3月10日，河南省駐馬店市驛城區(qū)某養(yǎng)殖戶帶病豬前來就診。據(jù)了解，該養(yǎng)殖場自繁自養(yǎng)母豬18頭、育肥豬200多頭，2月24日從市場購買體重約20kg的仔豬100頭。本養(yǎng)殖場豬瘟免疫情況為：母豬跟窩免疫，商品豬28、70日齡時(shí)各免疫一次，外購仔豬免疫情況不詳。外購的仔豬從進(jìn)場第5天起，有個(gè)別出現(xiàn)發(fā)病癥狀；至第14天出現(xiàn)癥狀的病豬已達(dá)70多頭，死亡5頭，其中有6頭發(fā)病豬走路左右搖擺、共濟(jì)失調(diào)。具體診斷情況如下。

1 臨床癥狀

病豬發(fā)燒，體溫達(dá)40℃以上，厭食，消瘦，被毛直立；咳嗽，氣喘，呈腹式呼吸，死前倒地不起，有明顯的呼吸困難癥狀；糞便呈黑色黏稠或干燥小球狀；發(fā)病后期個(gè)別豬皮膚有出血點(diǎn)，有的四肢末端、耳尖、會陰發(fā)紺（圖1、2）。畜主開始懷疑弓形體感染，于是使用磺胺間甲氧嘧啶、土霉素、氨基比林，連續(xù)用藥3天卻不見好轉(zhuǎn)，然后換用青霉素、地塞米松、氨基比林進(jìn)行治療，在飲水中添加人工鹽，效果也不理想。

圖1 四肢末端發(fā)紺

圖2 耳尖發(fā)紺

2 剖檢變化

圖3 胸腔、腹腔有纖維素性滲出物

對病豬進(jìn)行臨床剖檢，可見心、肺及腹腔臟器表面覆有一層白色纖維素性滲出物（圖3）；心、肺與胸腔粘連，心包液減少，肺臟有深紅褐色斑駁狀出血、萎縮；腹股溝淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)邊緣出血；腎臟呈灰黃色，有少量出血點(diǎn)；回盲口處有潰瘍灶，盲腸腔表面有麩皮樣覆蓋物；切開腫脹關(guān)節(jié)，有大量黏稠灰白色液體流出。

3 細(xì)菌分離鑒定

3.1 涂片染色鏡檢

對發(fā)病豬的肺臟和脾臟進(jìn)行采樣涂片，然后分別進(jìn)行革蘭氏和美藍(lán)染色。革蘭氏染色鏡檢發(fā)現(xiàn)有大量革蘭氏陰性細(xì)小桿菌，呈多種形態(tài)，從單個(gè)的球桿菌到長的、細(xì)長的以至細(xì)絲狀的菌體。美藍(lán)染色鏡檢多見兩極濃染的小桿菌，且有莢膜。

3.2 分離培養(yǎng)

無菌采集發(fā)病豬新鮮的肺臟、關(guān)節(jié)液、心血等病料，劃線接種于TSA固體培養(yǎng)基，置于5%的CO2培養(yǎng)箱，于37℃培養(yǎng)24～48小時(shí)后觀察結(jié)果，可見圓形、光滑、濕潤、無色透明、針尖大小的菌落。挑取上述單個(gè)菌落逐步純化培養(yǎng)，并進(jìn)行涂片，革蘭氏染色后在顯微鏡下觀察，細(xì)菌形態(tài)與組織觸片鏡檢中看到的一致。

3.3 生化試驗(yàn)

取以上分離菌進(jìn)行生化試驗(yàn)，結(jié)果表明氧化酶試驗(yàn)陰性，脲酶試驗(yàn)陰性，接觸酶試驗(yàn)陽性，硝酸鹽還原試驗(yàn)陽性，吲哚試驗(yàn)陰性；發(fā)酵葡萄糖、蔗糖、果糖、半乳糖、核糖和麥芽糖等碳水化合物，不發(fā)酵阿拉伯糖、乳糖、鼠李糖、甘露醇、木糖。該結(jié)果符合副豬嗜血桿菌的生化特性。

4 病原學(xué)RT-PCR檢測

采集病豬扁桃體、脾臟1份，4頭病豬的血清4份，采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法進(jìn)行病原檢測，結(jié)果顯示病豬扁桃體、脾臟和3份病豬血清為豬瘟病毒核酸陽性；只有1份病豬血清沒有擴(kuò)增出相應(yīng)片段，為豬瘟病毒核酸陰性。（表1）

5 診斷結(jié)果

根據(jù)臨床癥狀、剖檢變化、細(xì)菌分離鑒定、病原學(xué)RT-PCR檢測，可以確診為豬瘟與副豬嗜血桿菌的混合感染。

表1 豬瘟病毒實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測結(jié)果

6 采取的控制措施

6.1 緊急接種

對全群緊急接種豬瘟細(xì)胞活疫苗，假定健康豬每頭接種10頭份，發(fā)病豬每頭接種20～30頭份?？墒褂冒准?xì)胞介素-2稀釋豬瘟細(xì)胞活疫苗，免疫效果較好。

6.2 配合用藥

為了控制副豬嗜血桿菌病的流行，在飼料中添加頭孢噻呋和黃芪多糖，飲水中添加電解多維。給出現(xiàn)癥狀的豬只注射豬瘟疫苗的當(dāng)天不使用藥物，第二天可使用頭孢噻呋、白細(xì)胞介素、黃芪多糖等，體溫超過40.5℃時(shí)配合使用柴胡注射液。

6.3 加強(qiáng)管理

改善飼養(yǎng)管理，減少各種應(yīng)激，做好豬場、豬舍的隔離、衛(wèi)生、消毒工作，對病死豬進(jìn)行嚴(yán)格的無害化處理，防止病原的散播。

通過采取以上一系列措施，該豬場雖然遭受了一些損失，但是該次疫情得到了有效控制。

7 討論與分析

該豬場此次疫情的發(fā)生，與從外地引進(jìn)仔豬有著直接的關(guān)系。所以豬場最好自繁自養(yǎng)，盡量不從外地引進(jìn)豬只；必須引進(jìn)時(shí)，引進(jìn)前豬場要做好豬瘟抗體的檢測，對抗體不達(dá)標(biāo)的豬只要及時(shí)補(bǔ)免。

對于散養(yǎng)戶或規(guī)?；B(yǎng)殖場而言，豬瘟都是必須進(jìn)行疫苗防疫的疾病，可是該病仍有零散發(fā)生，其原因就是種豬帶毒，所以豬場除了要做好本場豬瘟疫苗的免疫，同時(shí)還要注意種豬豬瘟病毒的凈化，這才是控制該病的根本所在。根據(jù)我國國情，在豬瘟污染的豬場，實(shí)施以凈化種公、母豬為主的豬瘟綜合防治技術(shù)措施是切實(shí)可行的。具體做法是：一旦確認(rèn)豬場存在豬瘟，立即實(shí)施凈化，以全場所有種公、母豬逐頭活體采扁桃體，進(jìn)行豬瘟熒光抗體試驗(yàn)法檢查。值得注意的是，若判斷一頭豬是否感染了豬瘟，一定要檢查抗原而不是抗體，因?yàn)榭贵w的高低不能說明該豬此時(shí)帶毒。豬場只要檢查出豬瘟抗原陽性（帶毒）的豬，一律立即淘汰。每6個(gè)月檢查一次，一般檢查3次左右，便可徹底解決該場豬瘟流行的問題。

副豬嗜血桿菌是豬只的早期定居菌，應(yīng)激因素是其致病的主要誘因，多發(fā)于春冬氣候多變季節(jié)，如長途運(yùn)輸、飼料更換、斷奶、飼養(yǎng)密度過大、圈舍潮濕等，特別是豬只發(fā)生藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒Ⅱ型等病毒病時(shí)，豬只抵抗力降低，繼發(fā)副豬嗜血桿菌病更常見。迄今發(fā)現(xiàn)的副豬嗜血桿菌血清型較多，各血清型間缺乏有效的交叉免疫保護(hù)，所以做好豬瘟、藍(lán)耳病、豬偽狂犬、圓環(huán)病毒病、口蹄疫的基礎(chǔ)免疫是控制副豬嗜血桿菌病的有效途徑。目前對我國養(yǎng)豬業(yè)危害較大的副豬嗜血桿菌主要血清型是4、5、13型，因此使用的疫苗最好是包含以上血清型的多價(jià)苗，這種多價(jià)苗保護(hù)率較高。

另外，由于副豬嗜血桿菌對培養(yǎng)條件的要求相當(dāng)嚴(yán)格，因此進(jìn)行副豬嗜血桿菌的實(shí)驗(yàn)室分離、鑒定時(shí)，應(yīng)注意病料要采自具有典型臨床癥狀且未用抗生素治療的豬只，細(xì)菌的分離、培養(yǎng)所需的樣本采集工作也應(yīng)在發(fā)病后24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行。

因當(dāng)前豬場病情復(fù)雜，副豬嗜血桿菌又多繼發(fā)于其他病原之后，臨床癥狀較多，很容易與其他疾病發(fā)生誤診，所以要重視該病與豬鏈球菌、傳染性胸膜肺炎、藍(lán)耳病、支原體肺炎等病的鑒定區(qū)別。

S858.28

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1673-4645(2014)08-0055-03

2014-03-31