李瀟颯等
摘要 [目的] 為了尋找一種代替磷酸緩沖液的提取溶液,滿(mǎn)足盡量保持其活性的要求。[方法] 分別用蒸餾水和磷酸緩沖液,采用研磨法提取藻藍(lán)蛋白并保存。[結(jié)果] 兩者提取效果差別不大。但是,水保存的藻藍(lán)蛋白溶液比磷酸緩沖液保存的藻藍(lán)蛋白溶液易分解。[結(jié)論] 綜合試驗(yàn)條件及藻藍(lán)蛋白穩(wěn)定性影響因素考慮,可確定pH變化為藻藍(lán)蛋白分解的主要原因;蒸餾水可代替磷酸緩沖液用于提取藻藍(lán)蛋白,活性維持時(shí)間不超過(guò)15 d。
關(guān)鍵詞 螺旋藻;藻藍(lán)蛋白;穩(wěn)定性;pH
中圖分類(lèi)號(hào) S932.7 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611(2014)03-00657-01
螺旋藻是地球上最古老的物種之一,屬藍(lán)藻門(mén)顫藻目顫藻科螺旋藻屬,呈絲狀螺旋體。螺旋藻以其均衡的營(yíng)養(yǎng)、保健價(jià)值受到全世界多個(gè)國(guó)際組織的高度評(píng)價(jià),被聯(lián)合國(guó)教科文組織譽(yù)為“明天最理想的食品”[1]。 螺旋藻中含有多種生理活性物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),包括螺旋藻多糖、不飽和脂肪酸、蛋白質(zhì)、生物酶、維生素及礦物質(zhì)[1-2]。其氨基酸含量不僅豐富且均衡,易于人體吸收[1]。螺旋藻中的β2-胡蘿卜素含量豐富,為胡蘿卜的10倍[2]。螺旋藻作為一種豐富且均衡的蛋白質(zhì)補(bǔ)充劑,已被用于飲料、啤酒、口服液、巧克力、速溶沖劑等食品中[3-4]。其營(yíng)養(yǎng)液能提供皮膚所需氨基酸、藻多糖、SOD等多種活性成分,并且具有提高皮膚細(xì)胞免疫力、保持水分、防輻射等功能。螺旋藻為原料的化妝品已被成功研制[3]。螺旋藻富含的β-胡蘿卜素為維生素A的前體,有極好的保護(hù)視力的作用,而且其富含的鐵質(zhì)、γ-次亞麻油酸及磷酸酯等使得它在治療貧血、風(fēng)濕、艾滋病等疾病方面有很好的療效[1,5]。此外,螺旋藻中的藻膽蛋白可作為一種熒光標(biāo)記物用于免疫化學(xué)分析中的雙色或三色標(biāo)記,在臨床應(yīng)用中有廣闊的前景[5]。
藻藍(lán)蛋白是螺旋藻中的特有成分,為水溶性,易于人體吸收,且在藻體中的含量極高,達(dá)藻粉干重的17%左右[6]。藻藍(lán)蛋白具有重要的醫(yī)療價(jià)值,不但可以提高外周造血細(xì)胞功能,促進(jìn)紅細(xì)胞生長(zhǎng)[7],而且具有清除自由基、抗衰老的功能[8]。Reddy等[9]研究表明,藻藍(lán)蛋白可選擇性地抑制炎癥和腫瘤發(fā)生時(shí)高效表達(dá)的相關(guān)酶活性,被證明有抗腫瘤活性。同時(shí),藻藍(lán)蛋白含有大量的易于吸收的氨基酸。它已被添加到食品和飼料中,又可作為天然色素被應(yīng)用于化妝品行業(yè)中[3]。因此,藻藍(lán)蛋白的提取與應(yīng)用也具有廣闊前景。
但是,由于藻藍(lán)蛋白不穩(wěn)定,易分解,其提取、純化成本居高不下,限制了其發(fā)展。影響藻藍(lán)蛋白穩(wěn)定性的因素主要為光照、溫度、酸堿度,在避光、低溫、pH 4~8 之間穩(wěn)定性最高[6,10-14]。為保持其活性,筆者一般采用磷酸緩沖液提取藻藍(lán)蛋白,但由此增加成本。在低溫、避光條件下,筆者研究了用水提取的藻藍(lán)蛋白與磷酸緩沖液提取的藻藍(lán)蛋白穩(wěn)定性的變化情況,旨在研究用蒸餾水代替緩沖液提取藻藍(lán)蛋白的可行性,在降低生產(chǎn)成本的同時(shí)盡可能保持其活性,為工業(yè)生產(chǎn)提供理論依據(jù)。