唐麗娜等

摘要[目的]簡便快捷地測定糕點(diǎn)中的防腐劑富馬酸二甲酯。[方法]建立了一種使用島津超高效液相色譜儀LC30A和三重四級桿質(zhì)譜儀API 4000聯(lián)用測定食品中富馬酸二甲酯含量的分析方法。[結(jié)果]試驗表明，富馬酸二甲酯標(biāo)液的線性關(guān)系為y=0.972 7x+0.001 2，線性相關(guān)系數(shù)為0.999 4。采取加標(biāo)的方式進(jìn)行方法驗證，對同一富馬酸二甲酯濃度的加標(biāo)樣品進(jìn)行6次精密度試驗，富馬酸二甲酯的回收率范圍為98.4%～101.5%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為1.2%，方法檢出限為0.01 mg/L。[結(jié)論]該方法準(zhǔn)確、快速、操作簡便，可用于糕點(diǎn)中富馬酸二甲酯的定量分析。

關(guān)鍵詞 富馬酸二甲酯；超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀；糕點(diǎn)；多反應(yīng)監(jiān)測

中圖分類號S609.9文獻(xiàn)標(biāo)識碼A文章編號0517-6611（2014）21-07178-02

Determination of Dimethyl Fumarate in Cake by Ultra High Performance Liquid ChromatographyTandem Mass

TANG Lina， FENG Xiaping et al （Huizhou Quality and Measuring Supervision Testing Institute， Huizhou， Guangdong 516003）

Abstract[Objective] To rapidly and easily determine dimethyl fumarate in cake. [Method] UHPLC LC30A and API 4000 triple quadrupole mass spectrometer was established for determination of dimethyl fumarate content. [Result] The results showed that a linear relationship dimethyl fumarate was y=0.972 7x+0.001 2， the linear correlation coefficient of 0.999 4. Six times precision experiments were conducted on the same concentration of dimethyl fumarate. The range of recovery rate is 98.4%-101.5%， RSD is 1.2%， detection limit is 0.01 mg/L. [Conclusion] The method is accurate， rapid and simple， which can be used in quantitative analysis of dimethyl fumarate.

Key words Dimethyl fumarate； Ultra high performance liquid chromatographytandem mass； Cake； MRM

隨著我國經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，食品安全越來越受到人們的重視，同時對食品的防腐保鮮提出了更高的要求。近年來，富馬酸二甲酯作為一種新型防腐劑受到了廣泛關(guān)注[1]。富馬酸二甲酯（簡稱DMF）是美國20世紀(jì)80年代開發(fā)的一種新型防霉劑，具有低毒、高效、抑菌作用時間長和抗菌性受pH影響不大的特點(diǎn)，能有效抑制30多種霉菌、酵母菌和細(xì)菌，特別對肉毒梭菌和黃曲霉菌有很好的抑制效果，廣泛應(yīng)用于食品、水果、魚、蔬菜、飼料等的生產(chǎn)、儲存和運(yùn)輸中[2-3]。

近年來，歐盟多次通報了多起消費(fèi)者因接觸富馬酸二甲酯而受傷的案例，使其受到全世界的廣泛關(guān)注。有研究表明，富馬酸二甲酯易水解生成甲醇，對人體腸道、內(nèi)臟產(chǎn)生腐蝕性損害，如果長期食用還會對肝、腎有較大的副作用，尤其對兒童的成長發(fā)育會造成很大的危害[4]。因此，國內(nèi)相關(guān)檢驗檢疫部門也對相關(guān)企業(yè)加強(qiáng)了檢驗和監(jiān)管，避免不合格產(chǎn)品帶來的危害。2000年，廣東省衛(wèi)生廳明文規(guī)定嚴(yán)禁在各種食品中使用富馬酸二甲酯作為防腐保鮮劑[5]。目前，測定富馬酸二甲酯的常見方法有氣相色譜法[6-7]、紫外分光光度法[8]、薄層色譜法[9]、高效液相色譜法[5，10]、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[11]等。這些方法雖然能基本滿足殘留限量檢測的要求，但是有時很難排除基體干擾的影響，難以精確定量，且低濃度檢測效果不佳。因此，開發(fā)一種檢出限低、操作簡單、快速、準(zhǔn)確的分析檢測方法尤為重要，目前文獻(xiàn)中尚無超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定DMF含量的報道。

筆者采用超高效液相色譜儀分離，三重四級桿質(zhì)譜儀的高選擇性、高靈敏性進(jìn)行定性定量分析，成功建立了測定糕點(diǎn)中富馬酸二甲酯含量的分析檢測方法。該方法具有檢出限低、測定周期短、操作簡單等優(yōu)點(diǎn)。同時，充分考察了此方法的線性范圍、重復(fù)性和檢測上限，為將來的食品檢測方法的建立提供技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1材料主要儀器：島津超高效液相色譜儀LC30A，日本島津公司；三重四級桿質(zhì)譜儀API 4000，配有電噴霧離子源（ESI）及Analvsit 1.6數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，美國應(yīng)用生物系統(tǒng)公司（ABI）；電子分析天平；超聲波發(fā)生器；離心機(jī)。主要試劑： 富馬酸二甲酯標(biāo)準(zhǔn)品（純度>99%）；甲醇為色譜純；乙酸鈉為分析純。

1.2試驗條件超高效液相色譜條件：2.5方法的回收率和精密度 準(zhǔn)確稱取不含富馬酸二甲酯的基質(zhì)樣品6份，每份5.0 g，分別加入富馬酸二甲酯濃度為0.2 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照上述樣品處理方法制備后進(jìn)行測定，將所得結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析，結(jié)果得6份糕點(diǎn)樣品的回收率分別為98.6%、99.7%、101.5%、100.2%、99.1%、98.4%，平均回收率99.6%。可以看出，6次測定結(jié)果的回收率都在98.4%～101.5%，相對偏差為1.2%，可以滿足富馬酸二甲酯的檢測要求。

2.6實際樣品的測定按照上述方法對糕點(diǎn)樣品進(jìn)行檢測。對多個批次的糕點(diǎn)樣品進(jìn)行測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，某陽性樣品的檢出含量為0.5 mg/kg。圖4為某陽性糕點(diǎn)樣品的MRM色譜圖。

圖4某陽性糕點(diǎn)樣品的MRM色譜3 結(jié)論

該研究建立了一種使用島津超高效液相色譜儀LC30A和三重四級桿質(zhì)譜儀API 4000聯(lián)用測定糕點(diǎn)中富馬酸二甲酯含量的分析方法。該方法具有樣品前處理簡單、檢出限低、快速、準(zhǔn)確度高等特點(diǎn)，方法線性范圍寬，相關(guān)系數(shù)為0999 4。6次基質(zhì)加標(biāo)試驗，回收率范圍為98.4%～1015%，相對偏差小于1.2%，說明儀器精密度良好，靈敏度高。與常規(guī)高效液相色譜法測定富馬酸二甲酯方法相比，此方法檢出限低，檢出限為0.01 mg/L，說明該方法足以滿足糕點(diǎn)中富馬酸二甲酯的檢測需求。

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