鄭貴娟，董夢蓮，董晶萊，朱琦峰

(嘉興學(xué)院 醫(yī)學(xué)院，浙江 嘉興 314001)

?

蘆筍食用部分與廢棄部分總黃酮含量比較

鄭貴娟，董夢蓮，董晶萊，朱琦峰*

(嘉興學(xué)院 醫(yī)學(xué)院，浙江 嘉興 314001)

目的：比較蘆筍食用部分與廢棄部分總黃酮的含量。方法：采用超聲波提取嘉興本地蘆筍食用部分與廢棄部分的總黃酮，并利用L9(34)正交表試驗方案設(shè)計，確定總黃酮的最佳提取工藝，比較蘆筍食用部分與廢棄部分總黃酮含量的差異性。結(jié)果：蘆筍食用部分總黃酮最佳超聲提取工藝條件為:乙醇濃度50%，料液比1∶20，提取溫度70℃，提取時間2.5h；廢棄部分總黃酮最佳超聲提取工藝條件為:乙醇濃度70%，料液比1∶10，提取溫度60℃，提取時間2.5h。結(jié)論：經(jīng)比較，蘆筍食用與廢棄部分中總黃酮的含量沒有顯著性差異。

蘆筍；總黃酮；提取工藝；含量

蘆筍(asparagusofficinalisL.)學(xué)名石刁柏，別名“龍須菜”，屬于百合科天門冬屬多年生宿根草本植物。蘆筍原產(chǎn)于歐洲地中海沿岸，以及小亞細(xì)亞地區(qū)，種植歷史已有2 000多年，在鴉片戰(zhàn)爭后期，傳教士把蘆筍帶入我國。蘆筍是一個質(zhì)地優(yōu)良的保健型蔬菜，在國際市場上有“蔬菜之王”的美稱[1]，被譽為“世界十大名菜之一”。

隨著人民生活水平的提高，人們要求食用藥療保健蔬菜，尤其是無污染、營養(yǎng)豐富、食用價值高且對人體有著醫(yī)療保健作用的綠色天然食品倍受青睞。這些天然食物的生物活性成分及其藥理作用的研究也有望成為新的研究熱點。蘆筍含有多種活性成分并具有抗癌[2]、提高免疫力[3]、降血脂[4]、抗衰老[5]等藥理功能，這為蘆筍的精深加工、活性成分提取及綜合利用提供了廣闊的發(fā)展空間，具有非常良好的市場前景。

蘆筍的食用部分是其中上部的嫩莖，而中下部分因無法食用，通常在蘆筍加工過程中被廢棄，廢棄部分一般占到整株的二分之一。將蘆筍廢棄部分加以合理利用，讓廢棄部分變廢為寶，是亟待研究的課題。本實驗著眼于蘆筍食用與廢棄部分，比較兩部分總黃酮含量的差異，為蘆筍廢棄部分的再利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器與材料

超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；UC-2401型紫外可見光光度計(島津公司)。蘆丁對照品(上海源葉生物科技有限公司)；其他試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

本研究中蘆筍食用部分與廢棄部分總黃酮的提取采用水醇超聲提取，以總黃酮為提取指標(biāo)。

以蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品采用紫外分光光度法進(jìn)行測定[6]。精密稱取7.800mg蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品，溶于30%乙醇中，定容至50mL，準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)蘆丁溶液(0、0.5、1、2、3、4、5、6、7mL)，移入10mL容量瓶，各加入約30%乙醇1mL，再加入5%亞硝酸鈉溶液各0.3mL，搖勻放置5min，加入10%硝酸鋁溶液各0.3mL，搖勻放置6min，加入1mol/L氫氧化鈉溶液2mL，用30%乙醇稀釋至刻度，搖勻放置15min后在510nm處測定吸光度。以質(zhì)量濃度(mg/mL)為橫坐標(biāo), 吸光度(A)為縱坐標(biāo), 得回歸方程為Y=0.1011X+0.007，相關(guān)系數(shù)r=0.999，線性關(guān)系良好。

1.3 超聲提取工藝

稱取蘆筍的食用部分原料5g，分別用各濃度乙醇(0、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%)按照不同料液比(1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30)浸漬24h，在不同超聲溫度(30℃、40℃、50℃、60℃、70℃)下超聲提取不同時間(0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h)后，提取液用0.45μm微孔濾膜濾過，取1mL濾液同蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線項下方法處理，在510nm處測定吸光度。在測定某一因素對蘆筍總黃酮提取的影響時，固定其他因素及水平。

稱取蘆筍的廢棄部分原料10g, 同上述蘆筍食用部分處理后，取0.5mL濾液同蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線項下方法處理，在510nm處測定吸光度。

1.4 正交試驗

在單因素試驗基礎(chǔ)上，以乙醇濃度、料液比、提取溫度、提取時間為影響因素，采用正交試驗確定各因素不同水平對提取蘆筍食用部分與廢棄部分總黃酮含量的影響，采用正交表L9(34)進(jìn)行試驗方案設(shè)計，見表1、表2。

表2 蘆筍廢棄部分總黃酮提取正交試驗因素水平

稱取食用部分與廢棄部分的蘆筍各6g，共18組，按照L9(34)正交表的條件進(jìn)行提取。提取液用0.45μm微孔濾膜濾過，取1mL濾液同蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線項下的方法處理，在510nm處測定吸光度，計算提取率。結(jié)果見表3、表4。

表3 蘆筍食用部分總黃酮提取工藝正交試驗安排及結(jié)果

表4 蘆筍廢棄部分總黃酮提取工藝正交試驗安排及結(jié)果

1.5 驗證最佳提取工藝條件

(1)蘆筍食用部分總黃酮提取工藝。

經(jīng)直觀比較分析表3，以總黃酮的提取率為評定指標(biāo)，在所選因素水平范圍內(nèi)，對于蘆筍食用部分總黃酮含量的影響，各因素的作用為提取溫度(A)>提取時間(B)> 料液比(C)>乙醇濃度(D)。確定理論上最佳提取條件為A3B2C1D1，但該最佳條件不在蘆筍廢棄部分正交試驗的9組中，因而需驗證。

稱取食用部分的蘆筍6g，按照A3B2C1D1條件進(jìn)行5組平行試驗。提取液用0.45μm微孔濾膜濾過，取1mL濾液同蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線項下的方法處理，在510nm處測定吸光度，計算提取率。結(jié)果見表5。

表5 蘆筍食用部分在A3B2C1D1條件下平行試驗

經(jīng)驗證得蘆筍食用部分在A3B2C1D1條件下的提取率低于在正交試驗中的A3B3C2D1時的提取率。確定最佳提取條件A3B3C2D1。

(2)蘆筍廢棄部分總黃酮提取工藝。

經(jīng)直觀比較分析表4，以總黃酮的提取率為評定指標(biāo)，在所選因素水平范圍內(nèi)，對于蘆筍廢棄部分總黃酮含量的影響，各因素的作用為乙醇濃度(D)> 提取溫度(A)> 料液比(C)> 提取時間(B)。確定理論上最佳提取條件為D1A2C1B3，該最佳條件不在蘆筍廢棄部分正交試驗的9組中，因而需驗證。

稱取廢棄部分的蘆筍6g，按照D1A2C1B3條件進(jìn)行5組平行試驗。提取液用0.45μm微孔濾膜濾過，取1mL濾液同蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線項下的方法處理，在510nm處測定吸光度，計算提取率。結(jié)果見表6。

經(jīng)驗證得蘆筍廢棄部分在D1A2C1B3條件下的提取率高于在正交試驗中D1A2C3B2條件下的提取率。確定最佳提取條件D1A2C1B3。

2 蘆筍食用部分與廢棄部分總黃酮含量比較

用SPSS軟件對分別在最佳條件下超聲提取的蘆筍食用與廢棄部分總黃酮含量進(jìn)行獨立樣本T檢驗。結(jié)果見表7、表8。

表6 蘆筍廢棄部分在D1A2C1B3條件下平行試驗

表7 組統(tǒng)計量

從表中得到P>0.05，即兩組數(shù)據(jù)沒有顯著性差異，說明蘆筍食用與廢棄部分總黃酮含量沒有顯著性差異。

3 討論

黃酮類化合物廣泛存在于自然界的植物中，屬植物次生代謝產(chǎn)物，是一類重要的天然有機化合物。許多黃酮類成分對心血管系統(tǒng)有作用，能降低血管脆性及異常通透性，具有抗病毒、抗真菌、抑菌作用[7]，同時具有平喘、止咳、祛痰藥理活性及抗自由基和抗氧化作用[8]。

表8 獨立樣本檢驗

本實驗在最佳超聲提取條件下得到蘆筍食用與廢棄部分中的總黃酮含量，經(jīng)SPSS獨立樣本T檢驗后，得到蘆筍植株兩部分中總黃酮含量沒有顯著性差異，但是本實驗結(jié)果僅為超聲粗提得到的結(jié)果，并不能完全真實說明兩部分中總黃酮的含量差異。故下一步的研究需將蘆筍食用與廢棄部分總黃酮進(jìn)行分離精制，在總黃酮純度較高條件下對比二者的差異，得到更加可靠嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶嶒灁?shù)據(jù)與結(jié)論。

[1] 孫春燕，趙伯濤，郁志芳，等.蘆筍的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].中國野生植物，2004,23(5): 1-4.

[2] 汲晨鋒, 季宇彬, 岳磊.蘆筍皂苷誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡作用及機制初步研究[C].第十屆全國生化與分子藥理學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編, 2007.

[3] 周利亙,王春輝,王君虹，等.蘆筍的活性成分及其生物學(xué)功能[J].安徽農(nóng)學(xué)通報, 2006, 12(2): 23-25.

[4] 馮翠萍，常霞，盧耀環(huán).蘆筍皮對實驗性高脂癥大鼠血脂水平的影響[J]. 山西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版, 2001, 21(3): 265-267.

[5] 苗明三,顧麗亞,方嘵燕，等.蘆筍多糖對衰老模型小鼠的影響[J].中國中藥雜志,2004,29(7):673-675.

[6] 王欣,夏新奎,徐固華.微波輔助萃取諸葛菜中的總黃酮研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(22):6705-6706.

[7] 玄紅專,胡福良.黃酮類化合物抑制微生物活性及其作用機制[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2010,22(1):171-175.

[8] 文開新,王成章,嚴(yán)學(xué)兵,等.黃酮類化合物生物學(xué)活性研究進(jìn)展[J].草業(yè)科學(xué),2010,27(6):115-122.

(責(zé)任編輯：魏 曉)

2014-06-13

浙江省大學(xué)生科技創(chuàng)新活動計劃項目(2013R417011)；浙江省嘉興市科技計劃項目(2012AY1075-10)

鄭貴娟(1993-)，女，浙江省嘉興學(xué)院醫(yī)學(xué)院在讀生，研究方向為藥學(xué)。

朱琦峰(1978-)，男，浙江省嘉興學(xué)院醫(yī)學(xué)院講師，研究方向為天然產(chǎn)物的提取分離。

R284

A

1673-2197(2014)19-0020-03