徐 漢，呂姍珊，徐世軍，周年華，唐桂英，陳 成，楊 超，譙志文

（1.湖北省人民醫(yī)院，湖北 武漢430060；2.成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川 成都611137；3.重慶希爾安藥業(yè)有限公司，重慶401121）

皮膚瘙癢是一種常見的皮膚病，可由多種原因引起，瘙癢發(fā)作時令人難以忍受[1]。臨床中多種疾病會出現(xiàn)使人難以忍受的癢感，如濕疹、蕁麻疹、夏季皮炎等，會對患者的情緒產(chǎn)生嚴(yán)重影響，從而導(dǎo)致患者整體生理功能的紊亂。金蟬止癢膠囊運用傳統(tǒng)中醫(yī)理論，以金銀花、梔子、黃芩、苦參、黃柏、龍膽、白芷、白鮮皮、蛇床子、蟬蛻、連翹、地膚子、地黃、青蒿、廣藿香、甘草等中藥組方，具有良好的清熱解毒、燥濕止癢作用。本研究中通過建立經(jīng)典的癢覺動物模型，探討金蟬止癢膠囊的止癢療效，為臨床應(yīng)用提供基礎(chǔ)的藥理試驗數(shù)據(jù)。

1 藥物、試劑與動物

金蟬止癢膠囊（重慶希爾安藥業(yè)有限公司，批號為120223）；消風(fēng)止癢顆粒（煙臺大洋制藥有限公司，批號為120434）；馬來酸氯苯那敏片（太極集團(tuán)西南藥業(yè)股份有限公司，批號為120308）；2′4－二異氰酸甲苯酯（Gracia Cheical Technology Co.Ltd.，批號為201203096）；右旋糖酐－40（山東齊都藥業(yè)有限公司，批號為1D11121307）；4－氨基吡啶（Gracia Chemical Technology Co.Ltd.Chengdu，批號為201205120）。KM小鼠，SPF級，雌雄各半，體重（20±2）g，由四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物研究所提供，實驗動物合格證號為SCXK（川）2008－24，飼養(yǎng)于晝夜間隔12h，自由進(jìn)食進(jìn)水的SPF級動物中心。

2 方法與結(jié)果

2.1 給藥量的確定

金蟬止癢膠囊成人日用量為18粒（相當(dāng)于原生藥量92.3g/d），成人體重按照60kg計算。根據(jù)體表面積法換算，得到小鼠千克體重用量：高劑量組為27.69g/kg，中劑量組為13.845g/kg，低劑量組為6.9225g/kg。其他陽性對照藥物劑量均采用相同計算方法獲得小鼠千克體重用量。

2.2 對2′4二異氰酸甲苯酯致小鼠耳廓瘙癢的影響

將60只KM小鼠，稱重后隨機(jī)分成6組，即空白對照組，消風(fēng)止癢顆粒組（5.4g/kg），馬來酸氯苯那敏片組（1.8mg/kg），金蟬止癢膠囊高、中、低劑量組，每組10只。除空白對照組灌胃給予等體積的0.9%氯化鈉溶液外，其余各組灌胃給予相應(yīng)的藥物，給藥20mL/kg1次/天，連續(xù)5d，分組及給藥劑量見表1。末次給藥后30min，小鼠耳廓涂抹1%2′4二異氰酸甲苯酯（石蠟油作溶劑）30μL，從涂抹完到致敏開始計時，至小鼠開始出現(xiàn)抓蹭耳廓為致癢潛伏期，并記錄10min內(nèi)小鼠抓蹭的次數(shù)。結(jié)果見表1?？梢?，與空白對照組比較，金蟬止癢膠囊高、中、低劑量組瘙癢潛伏期均顯著延長（P＜0.05），10min內(nèi)瘙癢次數(shù)均顯著減少（P＜0.01），提示金蟬止癢膠囊對2′4－二異氰酸甲苯酯致小鼠耳廓瘙癢有較好的抑制作用。

表1 金蟬止癢膠囊對2′4－二異氰酸甲苯酯致小鼠耳廓瘙癢的影響（）

表1 金蟬止癢膠囊對2′4－二異氰酸甲苯酯致小鼠耳廓瘙癢的影響（）

注：與空白對照組比較，*P＜0.05，＃P＜0.01。

瘙癢反應(yīng)組別 n 劑量（g/kg）空白對照組消風(fēng)止癢顆粒組馬來酸氯苯那敏片組金蟬止癢膠囊高劑量組金蟬止癢膠囊中劑量組金蟬止癢膠囊低劑量組10 10 10 10 10 10等體積5.4 0.001 8 27.69 13.845 6.922 5瘙癢潛伏期（s）23.0 ± 12.7 164.9 ± 148.2＃114.6 ± 59.6*58.3 ± 46.3*70.9 ± 68.34*71.9 ± 53.4*搔癢次數(shù)29.9 ± 8.0 12.1 ± 8.3＃10.2 ± 6.2＃15.6 ± 9.5＃16.4 ± 12.0＃12.3 ± 9.1＃

2.3 對右旋糖酐致小鼠皮膚瘙癢的影響

取健康雄性KM小鼠70只，適應(yīng)性喂養(yǎng)3d后，按體重隨機(jī)分為7組，即空白對照組，模型對照組，消風(fēng)止癢顆粒組（5.4g/kg），馬來酸氯苯那敏片組（1.8mg/kg），金蟬止癢膠囊高、中、低劑量組，每組10只。除空白對照組和模型對照組灌胃給予等體積的0.9%氯化鈉溶液外，其余各組灌胃給予相應(yīng)的藥物，給藥20mL/kg，1次/天，連續(xù)7d，分組及給藥劑量見表2。末次給藥30min后，各組小鼠尾靜脈注射0.16%右旋糖酐溶液每10g體重0.1mL（空白對照組僅靜脈注射0.9%氯化鈉溶液）。以小鼠前爪搔抓頭部、后爪搔抓軀干、嘴咬全身各部位作為瘙癢反應(yīng)指標(biāo)。觀察記錄30min內(nèi)小鼠搔癢次數(shù)及瘙癢持續(xù)總時間。結(jié)果見表2?？梢?，與空白對照組比較，模型對照組搔癢次數(shù)顯著增多，瘙癢持續(xù)時間顯著延長（P＜0.01）；與模型對照組比較，金蟬止癢膠囊高劑量組搔癢次數(shù)顯著減少，瘙癢持續(xù)時間顯著縮短（P＜0.05）；雖然金蟬止癢膠囊中劑量組和低劑量組與模型對照組比較無明顯差異（P＞0.05），但搔癢次數(shù)有減少趨勢，瘙癢持續(xù)時間有縮短趨勢。提示金蟬止癢膠囊對右旋糖酐所致小鼠皮膚瘙癢模型具有拮抗作用。

2.4 對4－氨基吡啶致小鼠皮膚瘙癢的影響

取KM小鼠60只，稱重后隨機(jī)分成6組，即空白對照組，消風(fēng)止癢顆粒組（5.4g/kg），馬來酸氯苯那敏片組（1.8mg/kg），金蟬止癢膠囊高、中、低劑量組，每組10只。除空白對照組灌胃給予等體積的0.9%氯化鈉溶液外，其余各組灌胃給予相應(yīng)的藥物，給藥體積20mL/kg，1次/天，連續(xù)5d，分組及給藥劑量見表3。試驗前進(jìn)行小鼠背部剃毛處理，試驗當(dāng)天灌胃給藥30min后，于剃毛處皮下注射4－氨基吡啶1mg/kg。記錄10min內(nèi)小鼠舔體反應(yīng)次數(shù)及出現(xiàn)舔體反應(yīng)的時間（即瘙癢潛伏期），記錄各組數(shù)據(jù)。結(jié)果見表3?？梢姡c空白對照組比較，金蟬止癢膠囊高、中、低劑量組的瘙癢潛伏期均顯著延長（P＜0.05），但對搔癢次數(shù)無明顯影響（P＞0.05），但有一定減少的趨勢。

表2 金蟬止癢膠囊對右旋糖酐致小鼠皮膚瘙癢的影響（）

表2 金蟬止癢膠囊對右旋糖酐致小鼠皮膚瘙癢的影響（）

注：與模型對照組比較，*P＜0.05，＃P＜0.01。

瘙癢反應(yīng)組別n劑量（g/kg）空白對照組模型對照組消風(fēng)止癢顆粒組馬來酸氯苯那敏片組金蟬止癢膠囊高劑量組金蟬止癢膠囊中劑量組金蟬止癢膠囊低劑量組持續(xù)時間（s）2.00 ± 2.49＃325.30 ± 159.35 196.30 ± 113.65*113.40 ± 92.85＃202.50 ± 117.46*236.80 ± 157.18 262.50 ± 113.62 10 10 10 10 10 10 10等體積等體積5.4 0.001 8 27.69 13.845 6.9225次數(shù)（次）0.90 ± 1.10＃28.00 ± 9.60 19.50 ± 9.24*11.90 ± 5.90＃18.10 ± 9.68*22.30 ± 10.91 26.00 ± 8.93

表3 金蟬止癢膠囊對4－氨基吡啶致小鼠皮膚瘙癢的影響（n＝10）

表3 金蟬止癢膠囊對4－氨基吡啶致小鼠皮膚瘙癢的影響（n＝10）

注：與空白對照組比較，*P＜0.05，＃P＜0.01。

瘙癢反應(yīng)組別 劑量（g/kg）空白對照組消風(fēng)止癢顆粒組馬來酸氯苯那敏片組金蟬止癢膠囊高劑量組金蟬止癢膠囊中劑量組金蟬止癢膠囊低劑量組次數(shù)（次）34.90 ± 8.6 19.90 ± 7.0＃19.50 ± 10.7＃32.30 ± 10.8 29.10 ± 12.0 28.80 ± 9.6等體積5.4 0.0018 27.69 13.845 6.922 5潛伏期（s）9.50 ± 3.0 22.40 ± 7.1＃29.90 ± 10.1＃18.60 ± 6.3*22.70 ± 10.1＃19.40 ± 7.2*

3 討論

臨床實踐中，多種疾病可見皮膚瘙癢表現(xiàn)，如變態(tài)反應(yīng)性疾病、肝臟疾病、腎臟疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病等[2]。此種反應(yīng)對患者身心造成嚴(yán)重的不適，甚至?xí)绊懼饕∽兊闹委?。因此在臨床工作中，治療由疾病引起的瘙癢癥狀是非常有意義的。瘙癢的發(fā)生機(jī)制尚未完全明了，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)大致將瘙癢分為組胺性和非組胺性瘙癢，對組胺性瘙癢應(yīng)用抗組織胺藥物的作用顯著，而對于其他原因?qū)е碌酿W，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)并沒有相關(guān)的特異性治療藥物[3－4]，此問題亟待解決。中醫(yī)中藥歷史悠久，應(yīng)用中醫(yī)方劑配伍理論，發(fā)揮中藥多靶點、多途徑的治療特點，治療皮膚瘙癢是解決此類疾病的可行方案[4]。

動物試驗成功與否的基礎(chǔ)在于疾病模型的選擇，因瘙癢的病理生理機(jī)制尚不十分清楚，故至今不存在經(jīng)典、公認(rèn)的皮膚瘙癢模型[5]。為了全面、多角度地分析金蟬止癢膠囊的止癢療效，本試驗中選用了3種不同的造模方法，分別是2′4－二異氰酸甲苯酯致小鼠耳廓瘙癢試驗、右旋糖酐致小鼠皮膚瘙癢試驗[6]、4－氨基吡啶致小鼠皮膚瘙癢試驗。2′4－二異氰酸甲苯酯導(dǎo)致的小鼠耳廓瘙癢為化學(xué)物質(zhì)損傷皮膚、刺激神經(jīng)末梢導(dǎo)致的皮膚瘙癢；右旋糖酐本身為大分子物質(zhì)，具有抗原性，進(jìn)入體內(nèi)后與蛋白質(zhì)結(jié)合形成完全性抗原，引發(fā)抗原抗體反應(yīng)，從而發(fā)生變態(tài)反應(yīng)，導(dǎo)致皮膚瘙癢，臨床給予鐵制劑時多發(fā)生患者皮膚瘙癢即緣于此；4－氨基吡啶導(dǎo)致的小鼠皮膚瘙癢同樣為經(jīng)典的致癢模型其發(fā)生機(jī)制主要通過激活內(nèi)源性組織胺引發(fā)皮膚瘙癢[7]?；谝陨?個經(jīng)典致癢模型，探討金蟬止癢膠囊對皮膚瘙癢的療效，試驗結(jié)果能夠顯示出其療效，并對其作用機(jī)制進(jìn)行推測。

本試驗結(jié)果顯示，各劑量金蟬止癢膠囊均能夠延長2′4－二異氰酸甲苯酯和4－氨基吡啶致小鼠皮膚瘙癢的潛伏期（P＜0.05），并可明顯減少2′4－二異氰酸甲苯酯導(dǎo)致的皮膚瘙癢過程中小鼠的搔抓次數(shù)（P＜0.01）；高劑量金蟬止癢膠囊能夠顯著減少右旋糖酐致小鼠皮膚瘙癢的持續(xù)時間和小鼠單位時間內(nèi)的搔抓次數(shù)（P＜0.05）?？梢姡鹣s止癢膠囊具有良好的止癢效果，對由化學(xué)刺激和變態(tài)反應(yīng)性病變引起的瘙癢療效顯著，對抑制由內(nèi)源性組織胺激活引起的瘙癢具有劑量依賴性[8]。金蟬止癢膠囊可能通過幾種不同作用途徑發(fā)揮抗癢作用，除傳統(tǒng)的抗組織胺作用外，還可能有免疫抑制、抗炎等機(jī)制，從而減少刺激局部產(chǎn)生癢覺的物質(zhì)，最終抑制皮膚瘙癢的發(fā)生。當(dāng)然，不排除金蟬止癢膠囊通過直接調(diào)節(jié)感覺神經(jīng)傳導(dǎo)發(fā)揮作用的可能，需要進(jìn)一步試驗論證其發(fā)揮抗癢作用的具體機(jī)制。

綜上所述，皮膚瘙癢為臨床常見癥狀，困擾眾多患者，臨床上治療該類疾患的藥物有限，以抗組織胺和激素為主，雖然療效確切肯定，但仍不能夠滿足臨床需要，并且有確切的數(shù)據(jù)顯示此類方法治療皮膚瘙癢，患者會出現(xiàn)嗜睡、皮膚改變及皮膚血管的變化[9]。本試驗中，通過對金蟬止癢膠囊止癢作用的探討，發(fā)現(xiàn)該藥物具有良好的止癢作用；通過試驗數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)，該藥物可能通過多種途徑發(fā)揮作用，加之中藥低毒、不良反應(yīng)少的優(yōu)勢，其很可能成為治療慢性長期皮膚瘙癢的理想治療藥物。為進(jìn)一步了解該藥物的特性，有必要對其作用機(jī)制作進(jìn)一步探討，為其臨床應(yīng)用提供翔實可靠的藥理學(xué)依據(jù)。

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