王喜民 孫 文 吳 晶

（吉林省食品藥品認(rèn)證和培訓(xùn)中心，吉林 長(zhǎng)春 130021）

利心丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究

王喜民 孫 文 吳 晶

（吉林省食品藥品認(rèn)證和培訓(xùn)中心，吉林 長(zhǎng)春 130021）

目的 建立利心丸的質(zhì)量控制方法。方法 用薄層色譜法對(duì)利心丸中的防己、牡丹皮進(jìn)行了定性鑒別；用HPLC法對(duì)該藥品中的丹皮酚含量進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果 薄層色譜鑒別斑點(diǎn)清晰，分離效果好，易于觀察識(shí)別；HPLC法測(cè)定牡丹皮中丹皮酚的含量的精密度與重現(xiàn)性良好，丹皮酚的進(jìn)樣量在0.102～0.510 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.99999），平均加樣回收率為99.1%，RSD=0.8%。結(jié)論 該方法可有效控制利心丸的產(chǎn)品質(zhì)量。

利心丸；丹皮酚；高效液相色譜法

1 薄層色譜鑒別

1.1 儀器與試藥

利心丸（批號(hào)：060301、060302、060303）；對(duì)照品與對(duì)照藥材均來源于中國藥品生物制品檢定所。

1.2 方法與結(jié)果

1.2.1 防己的鑒別

稱取本品20 g，加硅藻土適量，研細(xì)，加濃氨試液1～2mL濕潤(rùn)，加三氯甲烷50 mL，超聲處理（功率300 W，頻率50 kHz）15 min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)尤燃淄? mL使溶解，作為供試品溶液。另取粉防己堿與防己諾林堿對(duì)照品，加三氯甲烷制成每1 mL各含1 mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液。再取除防己的全部樣品成分，同法制成陰性對(duì)照溶液。用定量毛細(xì)管吸取對(duì)照品混合溶液5 μL、供試品溶液與陰性對(duì)照溶液各10 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板（規(guī)格10 cm× 10 cm，厚度0.3 mm）上，以三氯甲烷-丙酮-甲醇（6∶1∶1）為展開劑，上行展開，取出，晾干噴以稀碘化鉍鉀試液。結(jié)果顯示：在混合對(duì)照品色譜所顯斑點(diǎn)的位置上，供試品色譜均顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性則無。見圖1。

圖1 防己的薄層色譜圖（a、粉防己堿，b、防己諾林堿；1、2、3批號(hào)：060301、060302、060303；4、粉防己堿與防己諾林堿混合對(duì)照品；5、陰性對(duì)照）

1.2.2 牡丹皮的鑒別

稱取本品20 g，加硅藻土適量，研細(xì)，加乙醚80 mL，超聲處理（功率300 W，頻率50 kHz）20 min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)颖? mL使溶解，作為供試品溶液。另取丹皮酚對(duì)照品，加丙酮制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。再取除牡丹皮的全部樣品成分，同法制成陰性對(duì)照溶液。用定量毛細(xì)管吸取上述兩種溶液各10 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板（規(guī)格10 cm×10 cm，厚度0.3 mm）上，以正己烷-乙酸乙酯（3∶1）為展開劑，上行展開，取出，晾干，噴以鹽酸酸性的5%三氯化鐵乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。在對(duì)照品色譜所顯斑點(diǎn)的位置上，供試品色譜顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性則無。見圖2。

圖2 牡丹皮的薄層色譜鑒別（1、2、3批號(hào)：060301、060302、060303；4：丹皮酚對(duì)照品；5：陰性對(duì)照）

2 含量測(cè)定

2.1 儀器與試藥

Agilent-1200型高效液相系統(tǒng)。丹皮酚對(duì)照品由中國藥品生物制品檢定所提供，批號(hào)0708-9704，供含量測(cè)定用。甲醇為優(yōu)級(jí)純，水為純化水，其他試劑均為分析純。

2.2 方法與結(jié)果

2.2.1 色譜條件

色譜柱：迪馬C18色譜柱（DiamnosilTMC18，250 mm×4.6 mm，5 μm）；甲醇-水（70∶30）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為274 nm。理論板數(shù)按丹皮酚峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

2.2.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取丹皮酚對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 mL含20 μg的溶液，即得。

2.2.3 供試品溶液的制備

取本品水蜜丸，研細(xì)，或取重量差異項(xiàng)下的大蜜丸，剪碎，取約1.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，稱定重量，室溫放置30 min，超聲處理（功率300 W，頻率50 kHz）30 min，取出，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.2.4 陰性對(duì)照溶液的制備

取按處方比例制成的除去牡丹皮的陰性樣品，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。

2.2.5 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

分別精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液與陰性對(duì)照溶液各10 μL，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果陰性對(duì)照溶液在丹皮酚峰保留時(shí)間處無色譜峰，即處方中其他組分對(duì)測(cè)定無干擾。丹皮酚峰與其他組分峰基線分離，符合要求；對(duì)照品溶液與供試品溶液主峰的保留時(shí)間一致，理論板數(shù)板數(shù)按丹皮酚峰計(jì)算不低于3000。

2.2.6 線性關(guān)系考察

精密稱取丹皮酚對(duì)照品20.38 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并加該溶劑稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL，置100 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 μL、10 μL、15 μL、20 μL、25 μL，分別注入液相色譜儀，以進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)（X），峰面積積分值為縱坐標(biāo)（Y）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為Y=5103.6948X+0.3757（r=0.99999），表明進(jìn)樣量在0.102～0.510 μg范圍內(nèi)，與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.2.7 精密度試驗(yàn)

取本品（批號(hào)060301），照正文方法，連續(xù)進(jìn)樣5次，每次10 μL，計(jì)算5個(gè)峰面積的RSD為0.8%，表明該方法的精密度較好。結(jié)果表明精密度良好。

2.2.8 重復(fù)性試驗(yàn)

取本品（批號(hào)060301），照供試品溶液的制備方法，獨(dú)立測(cè)定6份，丹皮酚含量的RSD為0.9%，表明該方法重復(fù)性較好。

2.2.9 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一供試品（批號(hào)：060301）溶液，在制備后的0 h、30 h、48 h、72 h，分別測(cè)得峰面積，4個(gè)時(shí)間點(diǎn)測(cè)得峰面積的RSD為0.2%，表明在72 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.10 回收率試驗(yàn)

精密稱取已知含量的本品（批號(hào)：060303，含丹皮酚0.63 mg/g）細(xì)粉約0.75 g，6份做基底，再分別精密加入丹皮酚對(duì)照品溶液（0.02166 mg/mL）10 mL、11 mL、12 mL各2份，制成供試品溶液，測(cè)定丹皮酚的含量，計(jì)算回收率，得平均回收率為99.1%，RSD為0.8%，該方法的準(zhǔn)確度較好。

2.2.11 樣品測(cè)定結(jié)果及限度

三批樣品中丹皮酚含量測(cè)定結(jié)果分別為0.64、0.63、0.63 mg/g。綜合考慮牡丹皮藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[1]中含量的限度，藥材產(chǎn)地等的質(zhì)量不確定性及生產(chǎn)工藝的波動(dòng)性因素，將本品的含量限度定為每1 g含牡丹皮以丹皮酚（C9H10O3）計(jì)，不得少于0.40 mg。

[1] 國家藥典委員會(huì).中國藥典(一部)[S].2005年版.北京:北京化學(xué)工業(yè)出版社,2005:119.

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B

1671-8194（2014）18-0088-02