郭芬芬，孫婉，李雪芝，趙建，曲音波

山東大學(xué)微生物技術(shù)國家重點實驗室，山東 濟南 250100

預(yù)處理苧麻稈和紅麻稈糖化發(fā)酵生產(chǎn)燃料乙醇

郭芬芬，孫婉，李雪芝，趙建，曲音波

山東大學(xué)微生物技術(shù)國家重點實驗室，山東 濟南 250100

苧麻和紅麻是我國傳統(tǒng)纖維作物，皮部纖維在造紙、紡織等工業(yè)具有廣泛用途，但剝皮后剩余的莖稈部分并沒有被有效利用。由于其中含有較多纖維素，可望被生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)燃料乙醇。比較了幾種不同化學(xué)預(yù)處理方法對苧麻稈和紅麻稈纖維素酶解性能的改善效果，進而選擇堿法預(yù)處理后原料，進行半同步糖化發(fā)酵產(chǎn)乙醇實驗。結(jié)果表明，苧麻稈和紅麻稈經(jīng)4% NaOH和0.02%蒽醌-2-磺酸鈉鹽 (AQSS)，在170 ℃下處理1 h，繼而在固形物底物濃度18%時發(fā)酵168 h，發(fā)酵液中乙醇濃度達到51 g/L。采用少量多次補料至20%的底物濃度，乙醇濃度都能達到63 g/L，纖維素轉(zhuǎn)化率分別為77%和79%。紅麻稈經(jīng)5.2% NaHSO3和0.2% H2SO4，在170 ℃下處理1 h，補料至20%的底物濃度時，乙醇濃度可達到65 g/L，纖維素轉(zhuǎn)化率為72%。

苧麻稈，紅麻稈，預(yù)處理，酶解，半同步糖化發(fā)酵，乙醇

隨著世界經(jīng)濟的快速發(fā)展和人口的增加，石油、煤炭等多種不可再生資源已經(jīng)瀕臨枯竭，同時，大量排放的二氧化碳也導(dǎo)致嚴重的溫室效應(yīng)[1-6]。因此，出于經(jīng)濟發(fā)展、國家安全以及環(huán)境保護等各方面的需要，對可持續(xù)和清潔能源的要求更為迫切。生物乙醇這一新型能源在這一背景下應(yīng)運而生。第一代生物乙醇是以谷物淀粉或者是蔗糖為原料來生產(chǎn)乙醇，但存在“與糧爭地，與人爭糧”等問題。第二代生物乙醇是以木質(zhì)纖維素為原料生產(chǎn)乙醇，不僅解決了“與糧爭地，與人爭糧”的問題，還可以增加農(nóng)業(yè)廢棄物利用率，具有很多優(yōu)點。苧麻Boehmeria nivea L.是我國傳統(tǒng)纖維作物，有“中國草”之稱。我國苧麻常年種植面積20萬hm2左右[7]。紅麻Hibiscus cannabinus L.是屬于錦葵科木槿屬的一種速生高產(chǎn)生物質(zhì)植物，已成為我國栽培面積最大、總產(chǎn)量最高的麻類纖維作物之一，其纖維單產(chǎn)居世界首位[8]，而占生物學(xué)產(chǎn)量60%左右的麻莖稈除少部分用于壓制纖維板或制漿造紙外，大部分被當(dāng)作柴燒或廢棄，生物利用率很低，造成資源的極大浪費。由于麻稈中富含纖維素，因此可望用于轉(zhuǎn)化生產(chǎn)燃料乙醇。但目前尚未有利用苧麻稈生產(chǎn)生物乙醇的報道。

利用木質(zhì)纖維素生產(chǎn)乙醇主要包括原料的預(yù)處理、酶解、發(fā)酵和蒸餾4個步驟，利用纖維素酶將纖維素降解成可發(fā)酵糖是重要一步，但由于天然木質(zhì)纖維素結(jié)構(gòu)致密，直接進行酶解，纖維素的轉(zhuǎn)化率很低，普遍認為對木質(zhì)纖維素原料進行預(yù)處理是提高酶解的必要手段[1-4]。目前，預(yù)處理方法主要有物理法、化學(xué)法、物理化學(xué)法和生物法等。其中，稀H2SO4、燒堿法、亞硫酸鹽法等化學(xué)法預(yù)處理是較為常用的方法。堿法預(yù)處理可以去除原料中的木質(zhì)素組分，在破壞原料結(jié)構(gòu)的同時，也部分消除木素對酶解的不利影響，并對纖維素有化學(xué)膨脹作用[9]。亞硫酸鹽法預(yù)處理已被證明對多種原料均有效[10-14]，根據(jù)預(yù)處理液pH值的不同，分為堿性亞硫酸鹽法、中性亞硫酸法和酸性亞硫酸鹽法等3種。堿性亞硫酸鹽法可以部分地脫除木素，而酸性亞硫酸鹽法則可以溶出原料的半纖維素和部分木素。阮奇城等[8]采用H2O、H2SO4、NaOH溶液 (121 ℃，60 min) 或白腐真菌P. sajor-caju固態(tài)培養(yǎng)的方法，對紅麻秸稈進行預(yù)處理，對比酶解后物料的纖維素轉(zhuǎn)化率，發(fā)現(xiàn)用NaOH預(yù)處理后樣品的纖維酶解效率最高。在25 ℃下，對粒徑為1 mm的紅麻粉末在不同的離子液中進行超聲處理120 min，纖維素轉(zhuǎn)化率可達60%–95%[15]。對2 mm粒徑的紅麻粉用每克50 mL的1% H2O2在pH 11.5下處理24 h，在10%的底物濃度下，發(fā)酵144 h后，乙醇轉(zhuǎn)化率為76%[16]。在50 ℃下，微波輔助的堿處理能有效地使紅麻中的結(jié)晶纖維素轉(zhuǎn)化為無定形纖維素，可在酶解中得到顯著高的糖得率[17]。但總體而言，對麻稈這類纖維素原料進行預(yù)處理和糖化發(fā)酵生產(chǎn)乙醇的研究還比較少，對其生產(chǎn)可行性還需要作進一步評價，特別是利用亞硫酸鹽法對麻稈類原料進行預(yù)處理的研究還未見報道。

本文以苧麻稈和紅麻稈為原料，比較了幾種不同的預(yù)處理方法對酶解的影響，進而對預(yù)處理后原料進行了不同底物濃度下的半同步糖化發(fā)酵生產(chǎn)乙醇實驗。對苧麻、紅麻等原料莖稈預(yù)處理和酶解糖化發(fā)酵性能進行了初步評價，希望為這類原料應(yīng)用于燃料乙醇生產(chǎn)工業(yè)提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

苧麻稈購自湖南省，紅麻稈采自新疆。在實驗室將稈破碎至長度約為1–5 cm，混勻，置于塑料袋中，密封備用。經(jīng)分析，苧麻稈的主要化學(xué)組成為：纖維素44.0%，木聚糖11.9%，木素18.1%；紅麻稈主要化學(xué)成分為：纖維素38.2%，木聚糖17.4%，木素21.0%。

實驗用纖維素酶為商品酶，其濾紙酶活為160 IU/g，β-葡萄糖苷酶活為75 IU/g。乙醇發(fā)酵中使用的是安琪高活性干酵母 (Saccharomyces cerevisiae; Angel, China)。

1.2 方法

1.2.1 預(yù)處理

預(yù)處理在ZQS-3型電加熱式旋轉(zhuǎn)蒸煮鍋(陜西科技大學(xué)輕工機械廠) 中進行。稱取一定絕干量的原料，放入1.5 L的鋼罐中，將配制好的一定濃度的溶液，按固液比1∶5 (W/V) 放入鋼罐中，密封好后放入蒸煮鍋中，設(shè)定好溫度，到達目的溫度后保溫1 h，處理完畢后冷卻放料。固體殘渣經(jīng)過過濾后，用自來水沖洗至中性，放入密封袋中置于4 ℃冰箱中備用。收集部分預(yù)處理液做成分分析，固體部分用來做成分分析、纖維素酶酶解和乙醇發(fā)酵。對照樣品為沒有經(jīng)過預(yù)處理的原料。

1.2.2 纖維素酶水解

酶解實驗在100 mL三角瓶，恒溫搖床中進行，使用50 mmol/L的HAc-NaAc緩沖液 (pH 4.8) 調(diào)節(jié)pH值。

酶解條件：底物濃度2%，酶加量25 FPU/g底物，0.1% 疊氮化鈉，45 ℃，150 r/min，72 h。定時取樣，離心后取上清液，使用SBA-40C生物傳感分析儀檢測葡萄糖的含量，并依據(jù)式 (1)計算纖維素的轉(zhuǎn)化率。

1.2.3 半同步糖化發(fā)酵

半同步糖化發(fā)酵產(chǎn)乙醇實驗在50 mL三角瓶，恒溫搖床中進行，使用pH 4.8的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液調(diào)節(jié)pH值，用橡膠塞保持密閉和厭氧狀態(tài)。

糖化發(fā)酵條件：25 FPU/g底物，預(yù)糖化8 h后接入酵母，5 mg酵母/g底物 (加入前，酵母首先經(jīng)過活化處理，0.15 g酵母，加0.25 g葡萄糖，10 mL無菌水，30 ℃，活化2 h)，35 ℃發(fā)酵。定時取樣，離心后取上清液測定乙醇、葡萄糖的含量和溶液的pH值。葡萄糖和乙醇的含量使用SBA-40C生物傳感分析儀檢測，并依據(jù)式 (2) 計算纖維素轉(zhuǎn)化率。分批補料發(fā)酵工藝[6]：初始底物濃度為10%，加20%底物濃度時的酵母用量，在24、48、72、96、120 h分別加入一定量的料和相應(yīng)的纖維素酶酶粉。

1.3 分析和測定方法

物料中的含水量和乙醇抽出物參照NREL (National Renewable Energy Laboratory)[18]的分析流程。酸溶木素和酸不溶木素等含量測定按照國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T2677.8-1994和GB/T747-1989規(guī)定方法[19]進行，并按照式 (3) 計算木素脫出率。葡萄糖和木糖的檢測采用HPLC法，色譜柱為HPX-87P (Bio-Rad，Hercules，CA，USA)，示差折光檢測器，柱溫78 ℃，流動相為三蒸水，流速為0.5 mL/min。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同預(yù)處理方法對苧麻稈化學(xué)組成和酶解性能的影響

2.1.1 NaOH預(yù)處理

圖1 不同NaOH預(yù)處理對酶解段苧麻稈纖維素轉(zhuǎn)化率的影響Fig. 1 Effect of NaOH on the enzymatic digestibility of pretreated ramie stalk.

表1 不同NaOH預(yù)處理對苧麻稈化學(xué)組成和纖維素轉(zhuǎn)化率的影響Table 1 Effects of NaOH pretreatment on the chemical components and cellulose conversion of ramie stalk

影響預(yù)處理的主要因素有：預(yù)處理溫度、預(yù)處理時間、溶劑的濃度和固液比等。在固液比1∶5，預(yù)處理時間1 h的條件下，主要研究了溫度、NaOH濃度及助劑添加等因素對苧麻莖稈化學(xué)組成和酶解性能的影響 (表1和圖1)。由化學(xué)組成可以看出，NaOH預(yù)處理后，與未處理樣品相比，苧麻稈的纖維素含量增加。提高預(yù)處理溫度和NaOH濃度有利于增加物料中纖維素含量，纖維素轉(zhuǎn)化率顯著提高，但固形物得率下降。實驗結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，在170 ℃，3.6% NaOH下，添加蒽醌-2-磺酸鈉鹽 (AQSS) 可以明顯增加木素脫除率和物料中纖維素含量，證實AQSS具有促進脫木素[20]和保護纖維素的作用。此外，添加AQSS的預(yù)處理物料纖維素轉(zhuǎn)化率也明顯提高。在AQSS為0.02% 時，將NaOH濃度從3.6%提高到4%，可以明顯提高預(yù)處理后物料中纖維素含量 (從64.9%增加到72.4%)、木素脫除率 (從56.4% 提高到80.6%)，改善纖維素的轉(zhuǎn)化效率 (從87.6% 增加到91.9%)。脫除的木素可以回收用來做肥料或土壤改良劑等[21]。雖然有文獻報道認為H2O2等氧化劑在脫木素過程中也會起到重要作用[16,22-24]，但從本文的實驗結(jié)果來看，與不添加H2O2相比，添加H2O2后，苧麻木素含量未見明顯減少，纖維素轉(zhuǎn)化率也未增加，可能是在實驗條件下添加H2O2的預(yù)處理方法不適用于苧麻稈。

眾所周知，木素的存在不利于纖維素的酶解，它既可以作為物理屏障限制纖維素酶接近纖維素，又可以非反應(yīng)性地結(jié)合纖維素酶[5,8]。在本文中，添加AQSS助劑的NaOH預(yù)處理可以使苧麻稈中大部分木素和部分半纖維素被脫除，切斷了木素和碳水化合物的聯(lián)結(jié)鍵并且破壞了原料的致密結(jié)構(gòu)。木素和半纖維素溶出致使原料內(nèi)部孔隙率增加，增加了原料的內(nèi)表面積；木素的溶出也使得對纖維素酶的負面影響減少，這些結(jié)構(gòu)變化使得苧麻碳水化合物更容易與纖維素酶發(fā)生作用，因而提高了水解效率。

2.1.2 亞硫酸鹽法預(yù)處理

對不同pH和不同鹽基的亞硫酸鹽法預(yù)處理苧麻稈效果進行了比較研究。不同pH水平下，在亞硫酸鹽預(yù)處理液中，反應(yīng)性的離子有所不同，酸性pH值下主要是HSO3-或SO2和HSO3-；中性pH值下，主要是SO32-和HSO3-；而堿性pH值下，則主要是SO32-。由表2可以看出，在用NaOH調(diào)節(jié)至中性pH (pH 6.75) 條件下，NaHSO3預(yù)處理后的物料中葡聚糖、木素和木聚糖的損失幾乎一致，說明這種方式下的中性NaHSO3處理對苧麻這3種組分沒有較強的選擇性；同樣在中性pH條件下，采用(NH4)2SO3和尿素組合的預(yù)處理方式，木素僅脫除了10%，酶解段纖維素轉(zhuǎn)化率也明顯較低(圖2)。由于尿素可以與木素反應(yīng)形成親水性的木素羧酸鹽，且形成的亞氨基與木素反應(yīng)可使得木素易于斷裂和潤漲，因而有望增加木素的脫除，與此同時采用亞銨法處理，廢液可以直接加工生產(chǎn)緩釋放有機氮肥，但是本文初步結(jié)果表明，在選擇的實驗條件下，采用(NH4)2SO3預(yù)處理苧麻稈原料的效果不太明顯。但在酸性(pH 2.28) 條件下亞硫酸鹽法預(yù)處理后，苧麻中的木聚糖脫除率達60%，這是由半纖維素在酸性條件下易發(fā)生水解反應(yīng)導(dǎo)致的，木素脫除率增高的主要原因是因為木素和亞硫酸氫根離子發(fā)生磺化反應(yīng)生成親水性的木素磺酸鹽，導(dǎo)致木素的溶出。在堿性條件下，采用Na2SO3預(yù)處理，與中性亞硫酸鹽法相比，木素脫除率有所增加，且隨著預(yù)處理液堿性的增強 (加入少量NaOH)，木素脫除率進一步加大，且添加少量NaOH后，葡聚糖的損失減少，纖維素轉(zhuǎn)化率也有所提高。

表2 不同亞硫酸鹽預(yù)處理對苧麻稈化學(xué)組成和纖維素轉(zhuǎn)化率的影響Table 2 Effects of sulfite pretreatment on the chemical components and cellulose coversion of ramie stalk

圖2 不同亞硫酸鹽預(yù)處理對酶解段苧麻稈纖維素轉(zhuǎn)化率的影響Fig. 2 Effect of sulfite on the enzymatic digestibility of pretreated ramie stalk.

相比較而言，在本文選擇的實驗條件下，采用亞硫酸鹽法預(yù)處理后，苧麻稈原料酶解段纖維素轉(zhuǎn)化率明顯低于相同藥品用量和相同處理條件下采用NaOH預(yù)處理的纖維素轉(zhuǎn)化率。因此，后續(xù)酶解糖化發(fā)酵產(chǎn)乙醇研究中，選用了NaOH預(yù)處理后的苧麻稈作為原料。

2.2 預(yù)處理后苧麻稈的半同步糖化發(fā)酵

利用微生物發(fā)酵木質(zhì)纖維素原料生產(chǎn)酒精的工藝大致可以分為纖維素直接發(fā)酵、間接發(fā)酵和同步糖化發(fā)酵三類[25]。同步糖化發(fā)酵的優(yōu)點是酶解的產(chǎn)物葡萄糖可以馬上被酵母發(fā)酵生成乙醇，解除了葡萄糖對纖維素酶的反饋抑制，從而有利于纖維素酶水解反應(yīng)順利地進行，有效地提高了糖化和發(fā)酵的效率，但不足之處是糖化和發(fā)酵最適溫度的不同。半同步糖化發(fā)酵包括了預(yù)糖化和同步糖化發(fā)酵兩個階段，結(jié)合了間接發(fā)酵和同步糖化發(fā)酵的優(yōu)點，并可以在一定的程度上彌補最適溫度不同造成的反應(yīng)不充分。預(yù)糖化使底物粘稠度降低，也使酵母在加入后有一個二次生長的機會。有研究表明，在半同步糖化發(fā)酵工藝下的乙醇生產(chǎn)量和轉(zhuǎn)化率明顯高于同步糖化發(fā)酵[26]。此外，一般來說，乙醇蒸餾時要求醪液中乙醇濃度不低于50 g/L[8]，否則乙醇蒸餾時能量消耗過大。苧麻稈預(yù)處理后固形物的半同步糖化發(fā)酵結(jié)果見表3。由表3可知，經(jīng)過3.6% NaOH+0.02% AQSS在160 ℃下處理1 h后，預(yù)處理料發(fā)酵乙醇未取得理想的乙醇濃度。但在170 ℃下，采用4% NaOH+0.02% AQSS預(yù)處理苧麻稈，當(dāng)發(fā)酵時底物濃度在14%以上時，半同步糖化發(fā)酵乙醇濃度都能達到45 g/L以上，纖維素的轉(zhuǎn)化率都在69%以上。在發(fā)酵液中，要得到高的乙醇濃度就預(yù)示著必須提高底物濃度，但提高底物濃度會增加發(fā)酵體系的粘稠度，不利于酶解和乙醇發(fā)酵的進行，纖維素轉(zhuǎn)化率會由于傳質(zhì)速率下降而大幅降低[6]。實驗發(fā)現(xiàn)，當(dāng)?shù)孜餄舛葟?4%增加到18%時，乙醇濃度雖然從45 g/L增加到51 g/L，但纖維素的轉(zhuǎn)化率從78%下降到69%。為了解決這一矛盾，所以考慮將分批補料[6]與半同步糖化發(fā)酵結(jié)合起來，實現(xiàn)酒精濃度和轉(zhuǎn)化率的增長。實驗發(fā)現(xiàn)，在10%的初始底物濃度下，經(jīng)過少量多次補料至20%的底物濃度時，發(fā)酵168 h，乙醇濃度可達63 g/L，纖維素轉(zhuǎn)化率為77%。

表3 預(yù)處理苧麻稈半同步糖化發(fā)酵結(jié)果Table 3 The maximum ethanol yield and cellulose conversion during Q-SSF of pretreated ramie stalk

表4 不同預(yù)處理對紅麻稈化學(xué)組成和纖維素轉(zhuǎn)化率的影響Table 4 Effects of different pretreatment on the chemical components and cellulose conversion of kenaf stalk

2.3 紅麻稈的預(yù)處理與半同步糖化發(fā)酵

紅麻的生物產(chǎn)量是樹木的3?4倍[27]，也有望作為燃料乙醇的原料來源。對NaOH和亞硫酸鹽預(yù)處理的紅麻稈糖化發(fā)酵產(chǎn)乙醇性能進行了初步研究。由表4可以看出，酸性NaHSO3和堿性Na2SO3預(yù)處理能導(dǎo)致較多的木素和木聚糖組分被脫除。在實驗條件下，酸性NaHSO3處理對物料中木素和木聚糖的脫除效果要優(yōu)于堿性Na2SO3處理，但物料得率降低。而NaOH預(yù)處理則能導(dǎo)致更多的木素被脫除。例如，在AQSS添加量為0.02% 時，采用3.6% NaOH和4% NaOH對紅麻原料預(yù)處理后，木素脫除率分別達到95% 和97%。NaOH和亞硫酸鹽預(yù)處理后的紅麻稈，酶解72 h時的纖維素轉(zhuǎn)化率都達到80%以上 (圖3)。

在14%的底物濃度下，對NaOH和亞硫酸鹽預(yù)處理后物料進行半同步糖化發(fā)酵，表5顯示5.2% NaHSO3+0.2% H2SO4條件下的預(yù)處理，發(fā)酵液乙醇濃度可以達到51 g/L，纖維素轉(zhuǎn)化率為83%。4% NaOH處理條件后物料的糖化發(fā)酵效果優(yōu)于3.6% NaOH處理后的物料。利用4% NaOH+0.02% AQSS預(yù)處理后物料，經(jīng)過少量多次補料至底物濃度到20%，發(fā)酵液乙醇濃度能達63 g/L，纖維素轉(zhuǎn)化率為79%。雖然酸性NaHSO3預(yù)處理后，采用多次補料，發(fā)酵液乙醇濃度也可達到60 g/L及以上，但乙醇得率和纖維素轉(zhuǎn)化率卻低于相同底物濃度下NaOH預(yù)處理物料的發(fā)酵結(jié)果。本組的實驗結(jié)果也說明了NaOH預(yù)處理方法同樣適用于紅麻稈原料。

圖3 不同的預(yù)處理條件對紅麻稈纖維素酶解轉(zhuǎn)化率的影響Fig. 3 Effect of different conditions of pretreatment on the enzymatic digestibility of pretreated kenaf stalk.

表5 預(yù)處理紅麻稈的半同步糖化發(fā)酵結(jié)果Table 5 The maximum ethanol yield and cellulose conversion during Q-SSF of pretreated kenaf stalk

3 結(jié)論

苧麻稈和紅麻稈可用來作為燃料乙醇生產(chǎn)的原料。采用堿性預(yù)處理苧麻稈和紅麻稈，經(jīng)過分批補料半同步糖化發(fā)酵工藝，在補料至底物濃度為20%時，乙醇濃度達到63 g/L，轉(zhuǎn)化率分別為77%和79%。酸性NaHSO3預(yù)處理的紅麻稈，在補料至20%的底物濃度時，乙醇濃度可達65 g/L，纖維素轉(zhuǎn)化率為72%。經(jīng)過進一步優(yōu)化工藝，可望進一步提高乙醇產(chǎn)量。

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(本文責(zé)編 陳宏宇)

Pretreatment of ramie and kenaf stalk for bioethanol production

Fenfen Guo, Wan Sun, Xuezhi Li, Jian Zhao, and Yinbo Qu
State Key Laboratory of Microbial Technology, Shandong University, Jinan 250100, Shandong, China

Ramie and kenaf were traditional fiber crops in China, but their stalk after decorticating has not been used effectively. The stalk contains a lot of cellulose, and can therefore be used for the production of bioethanol. We studied the effects of different chemical pretreatment on enzymatic digestibility of ramie stalk and kenaf stalk. Ramie and kenaf stalks pretreated with alkali were chosen to produce ethanol using quasi-simultaneous saccharification and fermentation (Q-SSF) process. Theresults show that for the stalks pretreated with 4% NaOH and 0.02% anthraquinone-2-sulfonic acid sodium salt (AQSS) as catalyzer at 170 ℃ for 1 h, the ethanol concentration could reach 51 g/L after fermentation for 168 h at 18% of solid substrate concentration. By fed-batch to 20% of solid substrate concentration, the ethanol concentration could reach 63 g/L, 77% and 79% of the cellulose conversion could get for ramie stalk and kenaf stalk, respectively. For kenaf stalk pretreated with 5.2% NaHSO3and 0.2% H2SO4at 170 ℃ for 1 h, the ethanol concentration and cellulose conversion could reach to 65 g/L and 72%, respectively.

ramie stalk, kenaf stalk, pretreatment, enzymatic hydrolysis, quasi-simultaneous saccharification and fermentation, ethanol

Junuary 16, 2014; Accepted: March 14, 2014

Jian Zhao. Tel: +86-531-88364690; Fax: +86-531-88565610; E-mail: zhaojian@sdu.edu.cn

郭芬芬, 孫婉, 李雪芝, 等. 預(yù)處理苧麻稈和紅麻稈糖化發(fā)酵生產(chǎn)燃料乙醇. 生物工程學(xué)報, 2014, 30(5): 774?783

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Supported by: National Basic Research Program of China (973 Program) (No. 2011CB707401), National Natural Science Foundation of China (Nos. 21276143, 21376141).

國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃 (973計劃) (No. 2011CB707401)，國家自然科學(xué)基金 (Nos. 21276143, 21376141) 資助。

時間：2014-04-09 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://www.cnki.net/kcms/doi/10.13345/j.cjb.140037.html