梁旭鋒等

摘 要：

選取德國DR公司生產(chǎn)的28種除草劑標準物質(zhì)，將其配制成混合標準溶液后轉(zhuǎn)移至20 mL帶聚四氟乙烯襯蓋的棕色螺口樣品瓶中，于-18℃避光貯存，采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測試各組分量值隨貯存時間的變化。結(jié)果表明：在90天內(nèi)，標準物質(zhì)各組分量值的標準偏差在12～73 μg/L范圍內(nèi)，最大相對標準偏差為3.04%（n=5），測量結(jié)果的相對不確定度小于5.60%。在置信度為95%時，標準物質(zhì)各組分量值在（1 000±113） μg/L范圍內(nèi)，測量的偏差不顯著。在不超過標準物質(zhì)的有效期內(nèi)，稀釋混合分裝后的標準物質(zhì)可保存90天。

關(guān)鍵詞：除草劑；混合標準溶液；標準物質(zhì)；穩(wěn)定性

中圖分類號：TQ450.2+1 文獻標識號：A 文章編號：1001-4942（2014）04-0106-04

標準物質(zhì)是現(xiàn)代殘留分析檢測整體質(zhì)量控制過程中非常關(guān)鍵的因素。分析檢測用標準物質(zhì)在管理、儲運、使用過程中因溫度、濕度、光線、pH值、溶液濃度、時間、稀釋溶液性質(zhì)、混合物的數(shù)量等一系列因素的影響而表現(xiàn)出不同的穩(wěn)定性，由于以上因素導(dǎo)致的降解或化合物之間的相互作用均有可能造成檢測結(jié)果的錯誤。采用質(zhì)譜方法進行多殘留檢測是近年來研究熱點[1～6]。系統(tǒng)化地研究不同種類的標準物質(zhì)在不同狀態(tài)下的穩(wěn)定性，無論對實驗室分析檢測質(zhì)量控制，標準物質(zhì)的生產(chǎn)、研發(fā)、制備還是加強農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全關(guān)鍵控制技術(shù)均具有重要意義。

通過查閱文獻，國內(nèi)外對農(nóng)藥標準物質(zhì)穩(wěn)定性研究的文章較少[7～12]。實驗室對該類標準物質(zhì)的使用，首選的是固體標準物質(zhì)，大多數(shù)采用直接稱量法配制儲備液，然后混合稀釋配制成混合溶液，最后采用體積比稀釋法配制工作溶液，一次用量少時僅為幾十微升，剩余的絕大部分混合溶液通常轉(zhuǎn)移至20 mL樣品瓶或其他小體積容器中密閉低溫保存，作為儲備液繼續(xù)使用。這種密封方法從嚴格意義上不能滿足標準物質(zhì)的貯存要求，會因溶劑揮發(fā)而使剩余的混合溶液不能繼續(xù)使用[13]。但在短期內(nèi)，該類混合溶液仍能維持其作為標準物質(zhì)的計量特性[12]。本文針對分析檢測實驗室對除草劑標準物質(zhì)的使用現(xiàn)狀，依據(jù)標準物質(zhì)的穩(wěn)定性檢驗方法[14]，選用德國DR公司生產(chǎn)的28種除草劑標準物質(zhì)，稀釋混合，在特定條件下貯存，采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法對其使用時效進行評價。

1 試驗方法

1.1 儀器

液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀（Agilent 1100-API 4000）；電子天平（美國METTLER TOLEDO公司XP105）； 2、20 mL帶四氟乙烯襯蓋的棕色螺口樣品瓶（美國Agilent公司）；25 mL容量瓶（CNW公司）；10、100 μL微量注射器（德國Eppendorf公司）。

1.2 標準物質(zhì)和主要試劑

28種除草劑標準物質(zhì)均購自德國DR公司，純度大于92.5%，不確定度為0.5%，證書提供的有效期為包裝后2年；甲醇、乙腈均為色譜純（購自美國TEDIA公司）；甲酸、乙酸銨均為優(yōu)級純（購自德國CNW公司）；水為GB/T 6682-1992規(guī)定的一級水。

5 mmol/L乙酸銨+0.1%甲酸水溶液：稱取385.4 mg無水乙酸銨到1 000 mL容量瓶中，加入1 mL甲酸用水稀釋至刻度，超聲混勻。

1.3 標準溶液的配制

單標儲備溶液的配制：分別稱取經(jīng)折算適量標準物質(zhì)（精確至0.1mg），分別用甲醇溶解定容至25 mL容量瓶中，溶液濃度為100 mg/L，-18℃冰箱保存。

混合溶液的配制：分別移取250 μL儲備液，混合并用甲醇定容至25 mL，各組分濃度均為1 mg/L，轉(zhuǎn)移至20 mL棕色樣品瓶中，擰緊瓶蓋，貼好標簽作為混合溶液于-18℃保存。以此作為短期穩(wěn)定性評價對象。

評價樣品配制：分別在不同保存時間取出混合溶液，同時取出5個2 mL樣品瓶，準確加入990 μL甲醇，擰緊瓶蓋；分別用10 μL微量注射器依次準確移取10 μL的混合溶液至樣品瓶中，迅速換蓋后搖勻。上述混合溶液稱之為評價樣品，評價樣品濃度為10 μg/L。

1.4 儀器測定

1.4.1 色譜條件 色譜柱：Phenomenex C18， 2.6 μm， 100×2.10 mm ；流速：250 μL/min；柱溫：43℃；進樣量：10 μL；流動相A：乙腈；流動相B：5 mmol/L乙酸銨+0.1%甲酸水溶液。洗脫條件見表1。

2 結(jié)果與討論

2.1 標準物質(zhì)各組分量值隨貯存時間的變化

采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法對其實效性進行評價。儲存7、15、30、60、90、120天后取出，測得各

組分量值隨貯存時間變化的曲線圖，見表3。由表可知，二丙烯草胺、除草定、丁草胺等隨著貯存時間的延長其量值基本保持穩(wěn)定，而氟硫草定、氟吡酰草胺和肟草酮等，其量值呈逐漸增大的趨勢。這是由于氟硫草定等組分沸點較高，而溶劑甲醇沸點較低，低沸點組分具有較高的蒸汽壓，易蒸發(fā)逃逸。

2.2 測試方法的精密度及不確定度

各組分經(jīng)5次測量的標準偏差在12～73 μg/L范圍內(nèi)，最大相對標準偏差為3.04%。采用χ2檢驗對測試方法的精密度進行評價[17]，在置信度為95%時，測試方法滿足標準物質(zhì)評價測試方法的精密度要求[14]。

依據(jù)相關(guān)的不確定度評定方法[12，18～21]計算，該類最大合成相對不確定度為0.056。計算所得的數(shù)值，是對所有測量不確定度分量做最大估計得出的，具體到每一組分的不確定度應(yīng)較之要小[12]。該值與標準物質(zhì)證書提供的相對不確定度5%基本一致，表明采用評價方法的準確度滿足標準物質(zhì)穩(wěn)定性檢驗要求[14]。

2.3 標準物質(zhì)各組分量值的偏差評估

依據(jù)文獻[12]對標準物質(zhì)各組分量值的偏差評估，計算出在置信度為95%時，標準物質(zhì)各組分量值在1 000±113 μg/L范圍內(nèi)時，測量的偏差不顯著。將此范圍作為標準物質(zhì)制成混合溶液再密封貯存的時效性判據(jù)。據(jù)表3，除草劑混合標準溶液在前90天，各組分量值在967～1 085 μg/L，表現(xiàn)出良好的穩(wěn)定性；而到了120天，有10個特性量（氟硫草定、氟吡酰草胺等）的值超過了1 113 μg/L，達到了1 000±113 μg/L范圍的下限。表明該標準物質(zhì)稀釋混合分裝后在規(guī)定條件下可保存90天。endprint

3 結(jié)論

對28種除草劑混合標準溶液配制后再密封的短期穩(wěn)定性評價表明，標準物質(zhì)稀釋混合分裝后再密封于20 mL聚四氟乙烯襯蓋棕色螺口樣品瓶，于-18℃避光貯存，在標準物質(zhì)的有效期內(nèi)，隨著貯存時間的延長，沸點較低的組分，如二丙烯草胺、除草定、丁草胺等，其量值基本保持穩(wěn)定，而沸點較高的組分，如氟硫草定、氟吡酰草胺和肟草酮等，其量值呈現(xiàn)逐漸增大的趨勢。由于溶劑甲醇沸點較低，低沸點組分具有較高的蒸汽壓，溶劑蒸發(fā)逃逸引起溶質(zhì)濃縮是標準物質(zhì)的特性量值增大的主要因素。在標準物質(zhì)的有效期內(nèi)，置信度為95%時，甲醇作為溶劑于-18℃避光貯存可保存90天。

參 考 文 獻：

[1] 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局.GB/T 19648-2006 水果和蔬菜中500種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜法[S].

[2] 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局.GB/T 20769-2008 水果和蔬菜中450種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[S].

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[6] 胡梅，王駿，張卉，等. 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定蒜苔中多菌靈和噻菌靈的殘留量[J]. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，4：89-91.

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[10]陸繼偉，苗水，毛秀紅，等.氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法分析50種農(nóng)藥混合標準品溶液的穩(wěn)定性[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2011，21（8）：1854-1857，1860.

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[12]劉玉龍，夏凡，張洪志.揮發(fā)性有機污染物標準物質(zhì)使用的短期穩(wěn)定性評價[J].巖礦測試，2012，31（4）：647-652.

[13]邵明武，湯樺，陳大舟.關(guān)于多組分痕量有機污染物溶液標準物質(zhì)研制的體會[J].計量技術(shù)，2007（3）：61-63.

[14]國家標準物質(zhì)研究中心.JJG 1006-94，一級標準物質(zhì)技術(shù)規(guī)范[S].

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[20]陳曉翔，鄒永德，王長安，等.液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測定動物源食品中克倫特羅殘留量的不確定度評定[J].計量學(xué)報，2012，33（4）：372-376.

[21]馬康，楊亞楠，邢金京，等.誘惑紅溶液標準物質(zhì)的研制及不確定度評定[J].分析測試學(xué)報， 2012，31（3）：296-301.endprint

3 結(jié)論

對28種除草劑混合標準溶液配制后再密封的短期穩(wěn)定性評價表明，標準物質(zhì)稀釋混合分裝后再密封于20 mL聚四氟乙烯襯蓋棕色螺口樣品瓶，于-18℃避光貯存，在標準物質(zhì)的有效期內(nèi)，隨著貯存時間的延長，沸點較低的組分，如二丙烯草胺、除草定、丁草胺等，其量值基本保持穩(wěn)定，而沸點較高的組分，如氟硫草定、氟吡酰草胺和肟草酮等，其量值呈現(xiàn)逐漸增大的趨勢。由于溶劑甲醇沸點較低，低沸點組分具有較高的蒸汽壓，溶劑蒸發(fā)逃逸引起溶質(zhì)濃縮是標準物質(zhì)的特性量值增大的主要因素。在標準物質(zhì)的有效期內(nèi)，置信度為95%時，甲醇作為溶劑于-18℃避光貯存可保存90天。

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[2] 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局.GB/T 20769-2008 水果和蔬菜中450種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[S].

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3 結(jié)論

對28種除草劑混合標準溶液配制后再密封的短期穩(wěn)定性評價表明，標準物質(zhì)稀釋混合分裝后再密封于20 mL聚四氟乙烯襯蓋棕色螺口樣品瓶，于-18℃避光貯存，在標準物質(zhì)的有效期內(nèi)，隨著貯存時間的延長，沸點較低的組分，如二丙烯草胺、除草定、丁草胺等，其量值基本保持穩(wěn)定，而沸點較高的組分，如氟硫草定、氟吡酰草胺和肟草酮等，其量值呈現(xiàn)逐漸增大的趨勢。由于溶劑甲醇沸點較低，低沸點組分具有較高的蒸汽壓，溶劑蒸發(fā)逃逸引起溶質(zhì)濃縮是標準物質(zhì)的特性量值增大的主要因素。在標準物質(zhì)的有效期內(nèi)，置信度為95%時，甲醇作為溶劑于-18℃避光貯存可保存90天。

參 考 文 獻：

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[2] 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局.GB/T 20769-2008 水果和蔬菜中450種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[S].

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[12]劉玉龍，夏凡，張洪志.揮發(fā)性有機污染物標準物質(zhì)使用的短期穩(wěn)定性評價[J].巖礦測試，2012，31（4）：647-652.

[13]邵明武，湯樺，陳大舟.關(guān)于多組分痕量有機污染物溶液標準物質(zhì)研制的體會[J].計量技術(shù)，2007（3）：61-63.

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[16]全國認證認可標準化技術(shù)委員會.GB-T 27404-2008 實驗室質(zhì)量控制規(guī)范食品理化檢測[S].

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[18]盧曉華.標準物質(zhì)在化學(xué)測量結(jié)果不確定度評定中的應(yīng)用舉例[J].中國計量，2008，1：68-69.

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