張朝林，李宏，李金平

(寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院腫瘤醫(yī)院腫瘤外科，寧夏銀川750004)

·論著·

p53、Ki67、EGFR、Nm23在乳腺癌組織中的表達及臨床意義

張朝林，李宏，李金平

(寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院腫瘤醫(yī)院腫瘤外科，寧夏銀川750004)

目的分析p53、Ki67、EGFR、Nm23在乳腺癌組織中的表達，并探討其與臨床病理特征之間的關(guān)系。方法采用SP免疫組織化學(xué)法檢測p53、Ki67、EGFR、Nm23在176例乳腺癌組織中的表達情況，并結(jié)合其臨床和病理資料進行回顧性分析。結(jié)果乳腺癌組織中p53的表達與組織學(xué)分級、淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移有顯著關(guān)系(P＜0.05)，且與Ki67(r=0.157，P＜0.05)呈正相關(guān)，與ER呈負(fù)相關(guān)(r=-0.168，P＜0.05)；Ki67表達與淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移及pTNM分期有顯著關(guān)系(P＜0.05)，與HER-2呈正相關(guān)(r=0.1756，P＜0.05)；EGFR表達與淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移、pTNM分期有顯著關(guān)系(P＜0.05)，同時與ER(r=-0.290，P＜0.05)、PgR(r=-0.239，P＜0.05)呈負(fù)相關(guān)；Nm23表達與腫瘤大小、組織學(xué)分級、淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移有顯著關(guān)系，表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，且與Ki67呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.178，P＜0.05)。結(jié)論p53、Ki67、EGFR、Nm23的檢測對乳腺癌的治療及預(yù)后評估有重要意義。

乳腺癌；p53；Ki67；EGFR；Nm23

乳腺癌是一種異質(zhì)性較強的惡性腫瘤，同時乳腺癌又具有臨床多樣性，不同乳腺癌組織基因表達也不同。近年來，乳腺癌的發(fā)病率呈逐年增高趨勢，已成為世界女性排名第一的常見惡性腫瘤，其預(yù)后受到人們越來越多的關(guān)注。聯(lián)合檢測多種腫瘤分子標(biāo)志物可以為乳腺癌的診療及評估預(yù)后提供可靠依據(jù)。本文對p53、Ki67、表皮生長因子受體(EGFR)、Nm23等免疫組化指標(biāo)的表達情況進行相關(guān)性分析，探索其在人乳腺癌組織中的表達及意義，以期為乳腺癌的診斷治療及預(yù)后判斷提供一些新的參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集我院2010年1月至2013年5月經(jīng)手術(shù)治療，病理確診的女性乳腺癌患者176例，均為女性，年齡25～76歲，平均(48±0.26)歲；其組織學(xué)分級：Ⅰ級52例，Ⅱ級86例，Ⅲ級38例；有腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的60例，無腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的116例；pTNM分期：Ⅰ期50例，Ⅱ期76例，Ⅲ期50例?；颊咝g(shù)前均未行放化療、內(nèi)分泌及靶向治療，免疫組化檢測p53、Ki67、EGFR、Nm23等資料完整。

1.2 方法免疫組化染色采用SP二步法進行檢測。p53、Ki67、EGFR、Nm23抗體均購自福州邁新生物公司。按試劑盒說明書操作。

1.3 免疫組化檢測判斷標(biāo)準(zhǔn)p53表達定位于細胞核，EGFR定位于細胞膜或細胞漿，Ki67定位于細胞核，Nm23為細胞質(zhì)陽性表達。評判標(biāo)準(zhǔn)：無陽性細胞或陽性細胞數(shù)＜10%為(-)；陽性細胞數(shù)為10%～50%為(+)；陽性細胞數(shù)為51%～75%為(++)；陽性細胞數(shù)＞75%為(+++)，以陽性細胞數(shù)＜10%為陰性表達(-)，≥10%為陽性表達(+)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法本研究數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS11.5軟件，對p53、Ki67、EGFR、Nm23表達與臨床病理特征的關(guān)系進行χ2檢驗(Student-Newman-Kueuls)、對其與常見分子標(biāo)志物之間的相關(guān)性進行Spearman's等級相關(guān)分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 乳腺癌組織中p53、Ki67、EGFR、Nm23的蛋白表達情況176例女性乳腺癌患者中行免疫組化檢測p53、Ki67、EGFR、Nm23，其陽性表達率分別為56.82%(100/176)、67.05%(118/176)、22.73%(40/176)、56.25%(99/176)。

2.2 乳腺癌組織中p53、Ki67、EGFR、Nm23表達與臨床病理特征的關(guān)系本研究發(fā)現(xiàn)p53在人乳腺癌組織中的表達與組織學(xué)分級、淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移有顯著關(guān)系，表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，且與Ki67(r=0.157，P＜0.05)呈正相關(guān)關(guān)系，與ER呈負(fù)相關(guān)(r=-0.168，P＜0.05)，而與腫瘤大小、pTNM分期、PgR、HER-2之間無顯著關(guān)系(P＞0.05)；Ki67表達與淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移及pTNM分期有顯著關(guān)系(P＜0.05)，且與HER-2呈正相關(guān)(r=0.1756，P＜0.05)，與腫瘤大小、組織學(xué)分級、ER、PgR無顯著關(guān)系(P＞0.05)；EGFR表達與淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移、pTNM分期有顯著關(guān)系(P＜0.05)，同時與ER(r=-0.290，P＜0.05)、PgR(r=-0.239，P＜0.05)呈負(fù)相關(guān)，與腫瘤大小、組織學(xué)分級、Ki67、HER-2無顯著關(guān)系(P＞0.05)；Nm23表達與腫瘤大小、組織學(xué)分級、淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移有顯著關(guān)系，表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，且與Ki67呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.178，P＜0.05)，而與pTNM分期、ER、PgR無顯著關(guān)系，表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，見表1和表2。

表1 乳腺癌組織中p53、Ki67、EGFR、Nm23表達與臨床病理特征的關(guān)系(例)

表2 乳腺癌組織中p53、Ki67、EGFR、Nm23表達與常見分子標(biāo)志物之間的相關(guān)性(例)

3 討論

乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展與多種基因和分子水平的變化密切相關(guān)，如原癌基因、抑癌基因的失活、缺失、突變等。隨著分子生物學(xué)的不斷發(fā)展，分子標(biāo)志物的檢測為研究腫瘤的生長、浸潤、轉(zhuǎn)移方面提供了巨大幫助，并為乳腺癌的診斷、治療和預(yù)后的評估提供了新的手段和措施，然而目前沒有單一的基因組及其代謝狀態(tài)變化可被視為能決定乳腺癌的發(fā)生和發(fā)展，而將傳統(tǒng)預(yù)測指標(biāo)與分子生物學(xué)指標(biāo)相結(jié)合可以更好地預(yù)測乳腺癌患者的生存率，并對患者進行評估及治療。

p53基因為一種重要的抑癌基因，其突變發(fā)生異常頻繁，可使p53蛋白失活，細胞分裂失去節(jié)制，發(fā)生癌變，人類癌癥中約有一半是由于該基因發(fā)生突變失活。p53基因?qū)せ頓NA的修復(fù)、停止細胞周期、啟動細胞凋亡、維護基因組穩(wěn)定起著非常重要的作用。根據(jù)目前公布的國際癌癥研究機構(gòu)(IARC)Tp53數(shù)據(jù)庫顯示，全球超過70%的乳腺癌患者發(fā)生Tp53錯義突變變化，p53的過表達被認(rèn)為是臨床療效不佳、生存期短的乳腺癌患者，可作為判斷乳腺癌患者預(yù)后及治療的分子指標(biāo)之一[1]。本研究發(fā)現(xiàn)p53在人乳腺癌組織中的表達與組織學(xué)分級、淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移有顯著關(guān)系，表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，且與Ki67 (r=0.157，P＜0.05)呈正相關(guān)關(guān)系，而與腫瘤大小、pTNM分期、PgR、HER-2之間無顯著關(guān)系(P＞0.05)。本研究還發(fā)現(xiàn)p53的表達與ER呈負(fù)相關(guān)(r=-0.168，P＜0.05)，與Berger等的研究一致[2]。

Ki67是與增殖細胞相關(guān)的核抗原，為目前檢測腫瘤細胞增殖活性的最可靠指標(biāo)之一，其表達水平升高一定程度上反應(yīng)了腫瘤細胞的增殖水平，增殖活躍的腫瘤更易侵襲和遠處轉(zhuǎn)移[3]，可作為術(shù)前內(nèi)分泌治療及評價乳腺癌術(shù)后治療和預(yù)后的可靠預(yù)測指標(biāo)[4-5]。本研究發(fā)現(xiàn)Ki67表達與淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移及pTNM分期有顯著關(guān)系(P＜0.05)，且與HER-2呈正相關(guān)(r=0.1756，P＜0.05)，與腫瘤大小、組織學(xué)分級、ER、PgR無顯著關(guān)系(P＞0.05)，進一步驗證了Ki67高表達的患者乳腺癌增殖活性高、預(yù)后差。

人類表皮生長因子受體(EGFR)在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮著重要的作用。國內(nèi)外大量研究發(fā)現(xiàn)，在30%的人體惡性腫瘤都存在EGFR的過表達，這些患者往往較早發(fā)生轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)，且復(fù)發(fā)率高、存活期短[6]。EGFR在細胞的生長、增殖、分化、粘附以及移動等過程中發(fā)揮著非常重要的作用[7]。本研究結(jié)果顯示EGFR表達與淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移、pTNM分期有顯著關(guān)系(P＜0.05)，同時與ER(r=-0.290，P＜0.05)、PgR(r=-0.239，P＜0.05)呈負(fù)相關(guān)，與腫瘤大小、組織學(xué)分級、Ki67、HER-2無顯著關(guān)系(P＞0.05)，此結(jié)果與Tzaida等[8]的研究結(jié)果一致，進一步提示其在乳腺癌的發(fā)生及演變過程中可能發(fā)揮著重要的作用，可作為評估乳腺癌預(yù)后的指標(biāo)之一。

Nm23基因是第一個被公認(rèn)的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因，而轉(zhuǎn)移往往是影響腫瘤患者預(yù)后的主要因素，Nm23能夠抑制腫瘤細胞的能動性、入侵潛力，在細胞增殖、分化、腫瘤發(fā)生、腫瘤轉(zhuǎn)移中發(fā)揮著重要作用[9]，被認(rèn)為是一個重要的預(yù)后因子，故Nm23可作為判斷乳腺癌預(yù)后的重要指標(biāo)。Niitsu等[9]報道Nm23表達水平與人類乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌、黑色素瘤等轉(zhuǎn)移潛能細胞呈負(fù)相關(guān)，另外，相反的趨勢也已經(jīng)在甲狀腺癌、神經(jīng)母細胞瘤和非霍奇金淋巴瘤中報道，盡管這種差異的機制是未知的[10-11]。本研究發(fā)現(xiàn)Nm23表達與腫瘤大小、組織學(xué)分級、淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移有顯著關(guān)系(P＜0.05)，且與Ki67呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.178，P＜0.05)，而與pTNM分期、ER、PgR無顯著關(guān)系，表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，進一步說明Nm23低表達的乳腺癌惡性程度高、預(yù)后差。

綜上所述，p53、Ki67、EGFR、Nm23在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮著重要的作用，聯(lián)合檢測評估可作為判斷乳腺癌生物學(xué)行為及預(yù)后的重要指標(biāo)，對于延長患者無病生存期，減少其復(fù)發(fā)和惡性轉(zhuǎn)化有重要意義。

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Expression of p53,Ki67,EGFR,Nm23 in breast cancer and their correlations with clinical prognosis.

ZHANG Chao-lin,LI Hong,LI Jin-ping.Department of Oncology,the Affiliated Hospital to Ningxia Medical University,Yinchuan 750004,Ninxia,CHINA

ObjectiveTo explore the associations between the expression of the breast cancer markers such as p53,Ki67,EGFR,Nm23 and clinical prognosis.MethodsThe SP immunohistochemical technique was used to determine p53,Ki67,EGFR,Nm23 proteins expression in 176 patients with breast cancer.The relationship between the expression of p53,Ki67,EGFR,Nm23 proteins and the clinical pathological parameters were retrospectively analyzed.ResultsThe expression of p53 in breast cancer tissue was correlated with the histological grades and lymph metastasis(P＜0.05)，had positive correlation with Ki67,and had negative correlation with ER;the expression of Ki67 was correlated with the lymph metastasis and clinical pathological stage(P＜0.05),and had negative correlation with HER-2;the expression of EGFR was significantly correlated with lymph-node metastasis and clinical pathological stage(P＜0.05),and had significantly negative correlated with ER and PgR(P＜0.05).The expression of Nm23 was significantly correlated with primary tumor diameter,histological grades and lymph metastasis,and had negative correlation with Ki67(P＜0.05).ConclusionJoint monitoring p53,Ki67,EGFR,Nm23 have the important significance to evaluate the treatment and prognosis of breast cancer.

Breast carcinoma;p53;Ki67;EGFR;Nm23

R737.9

A

1003—6350（2014）01—0015—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.01.0005

2013-06-12)

李金平。E-mail：drljp601@sina.com