楊萍 朱豫

淚腺炎患者血清中白細胞介素-4、白細胞介素-17和γ-干擾素的含量及意義

楊萍 朱豫

淚腺炎；白細胞介素-4；白細胞介素-17；γ-干擾素

目的探討淚腺炎患者血清中白細胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、IL-17和γ-干擾素(γ-interferon，γ-IFN)的含量及意義。方法收集2012年10月到2013年7月于我院診斷為淚腺炎的31例患者的炎癥期及炎癥緩解期血清樣本各31份，另收集同期正常體檢血清標(biāo)本32份為正常對照組。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測淚腺炎患者炎癥期及炎癥緩解期和正常血清中IL-4、IL-17、γ-IFN的含量，并進行對比分析。結(jié)果淚腺炎患者炎癥期血清中IL-4、IL-17和γ-IFN 3種因子含量分別為945.96～1594.28 ng·L-1、178.42～300.50 ng·L-1和371.56～432.08 ng·L-1，較炎癥緩解期(分別為604.06～987.33 ng·L-1、106.60～156.78 ng·L-1和175.86～241.04 ng·L-1)及正常對照組(分別為604.84～1293.06 ng·L-1、108.88～164.36 ng·L-1和166.00～191.52 ng·L-1)顯著增高(均為P<0.05)；淚腺炎患者炎癥緩解期與正常對照組血清中3種因子含量相比，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均為P>0.05)。結(jié)論以IL-4、IL-17和γ-IFN為主要代表的Th1、Th17及Th2細胞可能參與了淚腺炎病變過程，并可在血清中檢測到變化，該疾病是與全身免疫相關(guān)的。

[眼科新進展，2014，34(5)：471-473]

近年來，臨床上具有免疫反應(yīng)特征的淚腺炎具有增多趨勢，一些研究顯示其病理特征為淚腺大量T淋巴細胞浸潤[1]，然而其病因及發(fā)病機制尚未明了。免疫學(xué)研究多認為該病的發(fā)生與淋巴細胞對淚腺自身抗原間產(chǎn)生的異常免疫應(yīng)答有關(guān)，多種炎癥因子及趨化因子參與其中。γ-干擾素(γ-interferon，γ-IFN)、白細胞介素-4(interleukin-4,IL-4)和IL-17分別作為Th1、Th2以及Th17細胞最有特征性的細胞因子一直備受關(guān)注。本研究觀察一組免疫反應(yīng)相關(guān)淚腺炎患者炎癥期及炎癥緩解期血清中的IL-4、IL-17、γ-IFN的水平，并與正常血清中含量進行對比，現(xiàn)將結(jié)果總結(jié)報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料收集2012年10月到2013年7月于我科診斷為免疫反應(yīng)相關(guān)淚腺炎患者31例，其中男12例、女19例；年齡18～61歲，平均42.8歲。采集每例患者炎癥期與炎癥緩解期血清樣本各31份。另收集同期于我院體檢的正常血清標(biāo)本32份，均無淚腺炎及其他免疫性疾病，作為正常對照組，男17例，女15例；年齡22～63歲，平均40.3歲。

免疫反應(yīng)相關(guān)淚腺炎納入標(biāo)準：反復(fù)發(fā)作一側(cè)或雙側(cè)淚腺區(qū)紅腫腫脹，病史超過1個月，未行糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑、局部放射等相關(guān)治療。排除標(biāo)準：其他眼科疾病、自身免疫性疾病、感染性疾病以及惡性腫瘤等。本研究方案經(jīng)過鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院倫理委員會的審批；所有患者簽署知情同意書。

1.2血清標(biāo)本收集與檢測方法淚腺炎患者均于清晨空腹采血2 mL，離心后取上清，置于EP管中-80 ℃低溫冰箱儲存?zhèn)錂z。正常對照組血清為我院門診體檢中心符合條件的正常血清標(biāo)本，均測血清中IL-4、IL-17、γ-IFN的含量。

采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測淚腺炎患者炎癥期及炎癥緩解期和正常血清中IL-4、IL-17、γ-IFN的水平，按照試劑說明書操作。酶標(biāo)儀(美國Thermo Scientific 公司 Multiskan MS型)450 nm處檢測吸光度A值，繪制出標(biāo)準曲線，計算出IL-4、IL-17、γ-IFN的濃度值。

2 結(jié)果

2.1正常對照組與淚腺炎患者炎癥期及炎癥緩解期血清中IL-4、IL-17和γ-IFN的含量正常對照組血清中IL-4含量為604.84～1293.06(826.09±137.40)ng·L-1，IL-17含量為108.88～164.36(133.42±17.53)ng·L-1，γ-IFN含量為166.00～191.52(191.86±17.82)ng·L-1。淚腺炎患者炎癥期血清IL-4含量為945.96～1594.28(1151.56±178.43)ng·L-1；IL-17含量為178.42～300.50(220.68±37.07)ng·L-1，γ-IFN含量為371.56～432.08(400.28±15.57)ng·L-1。淚腺炎患者炎癥緩解期血清中IL-4含量為604.06～987.33(890.47±194.68)ng·L-1，IL-17血清含量為106.60～156.78(126.65±15.30)ng·L-1，γ-IFN含量為175.86～241.04(203.82±19.63)ng·L-1。

2.2正常對照組與淚腺炎患者炎癥期及炎癥緩解期血清中IL-4、IL-17和γ-IFN含量比較正常對照組與淚腺炎患者炎癥期及炎癥緩解期血清中IL-4、IL-17和γ-IFN含量比較見表1，由表1可以看出：正常對照組和淚腺炎患者炎癥期IL-4、IL-17和γ-IFN含量差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均為P<0.05)，正常對照組和淚腺炎患者炎癥緩解期IL-4、IL-17和γ-IFN含量差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均為P>0.05)；淚腺炎患者炎癥期及炎癥緩解期血清中IL-4、IL-17和γ-IFN含量比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均為P<0.05)。

表1 正常對照組與淚腺炎患者炎癥期及炎癥緩解期血清中細胞因子含量的比較Table 1 Comparison with serum levels of cytokines in normal control group,inflammation and inflammation remission of dacryoadenitis patients

3 討論

3.1炎癥因子與淚腺炎多種自身免疫性疾病的研究認為，Th1/Th2失衡是主要原因。γ-IFN和IL-4分別作為Th1 和Th2 細胞產(chǎn)物中最有特征性的細胞因子，它們之間的平衡對Th0分化成Th1或Th2起關(guān)鍵調(diào)控作用。同時，國內(nèi)外近期研究發(fā)現(xiàn)不同于Th1和Th2的Th17細胞，因其獨立的分化和發(fā)育調(diào)節(jié)功能，成為自身免疫病機制中的新的要素。Th17細胞特異性地產(chǎn)生IL-17[2]，但不產(chǎn)生γ-IFN和IL-4。在機體內(nèi)IL-6與TGF-β通過Th17獨特的RORγt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路啟動該細胞分化，隨后Th17細胞通過自分泌擴大分化規(guī)模、活化并啟動STAT3信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，上調(diào)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子RORγt的表達，從而編碼表達IL-17并發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)[3-4]。IL-17被證實與多種炎癥及自身免疫性疾病的發(fā)生有關(guān)[5-6]，靶向Th17細胞的分化、發(fā)育及IL-17本身的治療方案在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化及銀屑病等多種自身免疫病中得到肯定，深入了解其分化調(diào)節(jié)及生物學(xué)功能，對于認識機體免疫調(diào)節(jié)規(guī)律、理解疾病發(fā)病機制提供了新思路，對于尋求更有效的疾病干預(yù)靶點有非常重要的理論意義和實際意義。

3.2IL-4、IL-17和γ-IFN含量變化分析及意義本研究中正常人血清中可測得一定含量的IL-4、IL-17和γ-IFN存在，說明在正常情況下，這些細胞因子共同參與機體的免疫反應(yīng)和免疫調(diào)節(jié)。目前尚無明確數(shù)據(jù)顯示正常人血清中這3種因子的含量范圍，但在一些疾病狀態(tài)下，如炎癥、自身免疫性疾病、惡性腫瘤等，血清中這些細胞因子水平發(fā)生變化[7-8]。

淚腺炎患者炎癥期血清中IL-4、IL-17和γ-IFN含量均有明顯增高，與正常對照組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。故認為血清中IL-4、IL-17和γ-IFN的含量變化與淚腺炎相關(guān)。Guo等[9]通過對淚腺炎動物模型的研究發(fā)現(xiàn)，IL-4陽性細胞在頜下腺、脾臟及淚腺組織中表達較正常小鼠高，血清中可檢測到IL-4、IL-17和γ-IFN含量增高；張梅等[10]發(fā)現(xiàn)γ-IFN可導(dǎo)致淚腺及結(jié)膜上皮細胞發(fā)生炎癥反應(yīng)以及淚腺炎癥損傷；在對干燥綜合征患者的研究中發(fā)現(xiàn)，患者外周血中Th17細胞數(shù)增高，與外分泌腺體炎癥密切相關(guān)。淚腺炎患者炎癥緩解期血清中IL-4、IL-17和γ-IFN含量，與正常對照組比較，水平稍有波動，但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均為P>0.05)。說明這三種因子參與了炎癥反應(yīng)過程，可作為檢測淚腺炎癥反應(yīng)的血清學(xué)指標(biāo)。

本研究結(jié)果分析，雖然淚腺炎患者炎癥期血清中IL-4、IL-17和γ-IFN含量均有顯著增高，但IL-4含量增高幅度較小、個體差異較大，而IL-17和γ-IFN兩種炎癥因子增高幅度更為明顯、且個體差異較小，與正常對照組無重疊，故認為后兩者臨床檢測意義更大。

一些研究顯示，IL-4、IL-17和γ-IFN參與多種炎癥與自身免疫病的進程：如在Graves病中檢測到初發(fā)患者血清中γ-IFN、IL-4水平升高，且γ-IFN可能是導(dǎo)致疾病容易復(fù)發(fā)的重要因素之一[11]；在原發(fā)性干燥綜合征患者唇腺組織中有大量的淋巴細胞浸潤及IL-17表達，IL-17參與了炎癥損傷的過程[12]。故在使用IL-17和γ-IFN作為淚腺炎患者炎癥期的輔助診斷指標(biāo)時，應(yīng)排除其他免疫性疾病。

淚腺炎患者炎癥期血清中IL-4、IL-17和γ-IFN含量升高，說明在局部炎癥反應(yīng)的同時可能存在全身免疫系統(tǒng)的反應(yīng)，故在臨床淚腺炎診治過程中，當(dāng)檢測到血清中IL-4、IL-17和γ-IFN含量明顯增高時，應(yīng)首先給予全身治療，而血清中IL-4、IL-17和γ-IFN含量下降到正常水平淚腺仍有炎癥時，可給予局部治療。這些因子的含量變化有望作為臨床診斷和治療療效的評估指標(biāo)。同樣，針對這些相關(guān)的細胞因子或者其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的干預(yù)，可能阻止病情進展。如最近有研究，通過利用SiRNA減少T細胞中STAT3水平，抑制Th17細胞的分化而治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎[13]，同樣為治療免疫反應(yīng)相關(guān)淚腺炎提供了新的思路。

1 Moriyama M,Tanaka A,Maehara T,Furukawa S,Nakashima H,Nakamura S.T helper subsets in Sj?gren’s syndrome and IgG4-related dacryoadenitis and sialadenitis:A critical review[J].JAutoimmun,2013,7(7):1-8.

2 唐碧霞,張烜,唐福林.IL-17與自身免疫性疾病關(guān)系的研究進展[J].基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床,2008,128(1):94-97.

3 柴文,張寧,王艷青,卜軍,何奔.孤兒核受體RORs的病理生理作用及其調(diào)控機制[J].生理科學(xué)進展，2013,44(2):87-92.

4 王國兵，李成榮，楊 軍，溫鵬強，賈實磊.白細胞介素 6/STAT3 信號活化在急性免疫性血小板減少性紫癜患兒輔助性 T 淋巴細胞 17/調(diào)節(jié)性 T 淋巴細胞失衡中的作用[J].實用兒科臨床雜志，2012,27(13):1005-1008.

5 王朦夏，洪銘范.多發(fā)性硬化與Th17細胞及其主要影響因子的關(guān)系[J].新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2012,29(8):641-644.

6 常紅,張秋業(yè),莊超.輔助性T淋巴細胞17/調(diào)節(jié)性T淋巴細胞偏倚在川崎病發(fā)病機制中的作用[J].實用兒科臨床雜志，2011,26(9):664-666.

7 劉海螺，高玉興，李淑蘭，李 慧，馬愛華，席家水，等.白細胞介素-17、白細胞介素-23和腫瘤壞死因子-α在吉蘭-巴雷綜合征發(fā)病中的作用[J].實用兒科臨床雜志，2012，27(21)：1675-1677.

8 Saito S,Nakashima A,Shima T,Ito M.Th1/Th2/ Th17 and regulatory T cell paradigm in pregnancy[J].AmJReprodImmunol,2010,63(6):601-610.

9 Guo J,Qian J,Zhang R,Yuan YF.Expression of interleukin-17 in autoimmune dacryoadenitis in MRL/lpr mice[J].CurrEyeRes,2010,35(10):865-871.

10 張梅，劉祖國，陳家祺，鄭健.γ-干擾素對培養(yǎng)人原代結(jié)膜及淚腺上皮細胞表達炎癥相關(guān)因子的影響[J].眼科新進展,2003,23(4):229-234.

11 李玉琳,湯旭磊.Graves’病患者血清中γ-IFN,IL-4和IL-18水平檢測及其相關(guān)研究[J].第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報,2004,25(17):1607-1610.

12 王喜梅,厲小梅,李向培.白細胞介素-17在原發(fā)性干燥綜合征患者唇腺組織和外周血的表達[J].中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2009，13(5)：292-295.

13 郭小芹,韓根成,黎燕.IL-17/IL-17R信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制及功能的研究進展[J].國際免疫學(xué)雜志,2012,35(6):416-421.

date：Oct 14,2013

Contents and significances of interleukin-4,interleukin-17 and γ-interferon in serum of dacryoadenitis patients

YANG Ping，ZHU Yu

dacryoadenitis;interleukin-4;interleukin-17;γ-interferon

Objective To investigate the contents and significances of interleukin-4(IL-4),IL-17 and γ-interferon(γ-IFN) in serum of dacryoadenitis patients.Methods A total of 31 dacryoadenitis patients with their data and blood samples in inflammation and remission stage were collected in our hospital from October 2012 to July 2013,then another 32 normal cases with their blood samples were collected as normal group.The content of IL-4,IL-17 and γ-IFN in serum of patients were detected by ELISA.Results IL-4,IL-17 and γ-IFN in serum levels in inflammatory stage of dacryoadenitis patients[945.96-1594.28 ng·L-1，178.42-300.5 ng·L-1and 371.56-432.08 ng·L-1]were significantly higher than those of remission[604.06-987.33 ng·L-1，106.6-156.78 ng·L-1and 175.86-241.04 ng·L-1] and normal control group[604.84-1293.06 ng·L-1，108.88-164.36 ng·L-1and 166-191.52 ng·L-1](allP<0.05),there was no statistical significance between inflammation remission stage of dacryoadenitis patients and normal control group(allP>0.05).Conclusion Th1 and Th17 Th2 cells which were represented by IL-4,IL-17 and γ-IFN may participate in the lacrimal gland inflammation process,and can be detected the changes in serum,the disease is associated with systemic immune.

楊萍，女，1986年7月出生，河南商丘人，碩士。研究方向：眼外傷與眼眶病。聯(lián)系電話：18736012110；E-mail：pyang_172@163.com

AboutYANGPing：Female,born in July,1986.Postgraduate student.Tel:18736012110;E-mail:pyang_172@163.com

2013-10-14

450052 河南省鄭州市，鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院眼科

朱豫，E-mail:13673666718@163.com

楊萍,朱豫.淚腺炎患者血清中白細胞介素-4、白細胞介素-17和γ-干擾素的含量及意義[J].眼科新進展,2014,34(5):471-473.

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10.13389/j.cnki.rao.2014.0129

修回日期：2013-12-29

本文編輯：方紅玲

Accepteddate:Dec 29,2013

From theDepartmentofOphthalmology,theFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,HenanProvince,China

Responsibleauthor:ZHU Yu,E-mail:13673666718@163.com

[RecAdvOphthalmol，2014，34(5)：471-473]