+陳其龍+蔣雪峰

作者簡介：陳其龍(1952— )，男,主任醫(yī)師。平湖市227例手足口病患者病原學(xué)檢測結(jié)果分析陳其龍, 蔣雪峰 （浙江省平湖市疾病預(yù)防控制中心, 浙江 平湖 314200）手足口病(HFMD)是一種由腸道病毒引起的常見傳染病，嬰幼兒高發(fā)。一般認(rèn)為病原體主要為腸道病毒EV71型（EV71）及柯薩奇病毒A組16型（coxA16）。為進(jìn)一步了解平湖市手足口病病原體種類，我們自2010年起開展手足口病患者病原學(xué)檢測，現(xiàn)將2010年1月—2013年8月的檢測結(jié)果分析如下。

1對象與方法

1.1對象

2010年1月—2013年8月，在平湖市市級及以上醫(yī)院臨床診斷的手足口病病例共227例，其中男性146例，女性81例。

1.2標(biāo)本采集

在發(fā)生手足口病的現(xiàn)場采集病人發(fā)病7 d內(nèi)糞便(量為5~8 g/份)，放于滅菌采便管內(nèi)；或是肛拭采樣，即將采樣棉簽插入病人肛門2 cm,輕輕轉(zhuǎn)動，取出放入保存液中；對咽拭子標(biāo)本(病人發(fā)病3 d內(nèi))用專用采樣棉簽取適度用力拭抹咽后壁和兩側(cè)扁桃體部位(避免觸及舌部)，取出后放入裝有3～5 mL保存液的試管內(nèi)，折斷棉簽桿，旋緊管蓋并封好后放置－20℃低溫冷藏待檢；皰疹液采集用75.00%酒精對皰疹周圍皮膚消毒后，用消毒針挑破皰疹，再用棉簽蘸取皰疹液迅速放入裝有3～5 mL保存液管中，然后折斷棉簽桿旋緊管蓋并密封。

1.3方法

檢測方法按《衛(wèi)生部手足口病預(yù)防控制指南(2009版)》要求進(jìn)行[1]；熒光定量PCR檢測試劑盒由大連寶生物公司提供，熒光定量PCR儀為美國安捷倫公司生產(chǎn)，在有效期內(nèi)使用。

2結(jié)果

2.1陽性率

共采樣227例，陽性147例，陽性率為64.76%。其中男性146例，女性81例，男性陽性率為64.38%，女性陽性率為65.43%，兩者基本一致。

2.2年齡分布

0~26歲，其中0~3歲166例，占73.13%。

2.3采樣時間與陽性檢出關(guān)系

227例標(biāo)本中，發(fā)病后3 d內(nèi)采樣的146例，陽性105例，陽性率為71.92%；4~7 d采集的68例，陽性36例，陽性率為52.94%；超過7 d采樣的13例，陽性6例，陽性率為46.15%，即采樣間隔時間越長，檢測結(jié)果陽性率越低(表1)。

表1不同采樣間隔時間與檢測陽性率（%）

發(fā)病至采樣

間隔（d）病例

數(shù)陽性EV71CoxA16其他腸道病毒合計陽性率0~14636294010571.924~68115203652.948~13006646.15

2.4不同標(biāo)本類型陽性率比較

227例標(biāo)本中，咽拭子97例，肛拭子122例，皰疹液8例，以采樣間隔時間為分層條件，結(jié)果顯示，采樣間隔時間相同條件下，不同標(biāo)本類型檢測結(jié)果差異不明顯(表2)。

表2不同標(biāo)本類型與檢測陽性率（%）

發(fā)病至

采樣間隔

（d）樣本類型病例

數(shù)陽性EV71CoxA16其他腸

道病毒合計陽性率0~咽拭子671117124059.70肛拭子或糞便72237275779.17皰疹液72507100.004~咽拭子21223733.33肛拭子或糞便4683172860.87皰疹液11001100.008~咽拭子9004444.44肛拭子或糞便4003375.00

2.5不同年份手足口病病原學(xué)分析

本次共檢測到EV71型病毒47例，CoxA 16型病毒34例，其中2010年兩種類型病毒各占45.45%，而2013年分別占11.43%和0.00%，呈下降趨勢；而其他腸道病毒感染所占比例從2010年的9.09%上升至2013年的88.57%。經(jīng)對不同年份手足口病病原體類型分析顯示，不同年份手足口病流行病原體的構(gòu)成有明顯差異(表3)。

表3不同年份手足口病病原學(xué)檢測結(jié)果分析

年份EV71例數(shù)構(gòu)成比CoxA16例數(shù)構(gòu)成比其他腸道病毒例數(shù)構(gòu)成比合計20101545.451545.4539.093320111336.11616.671747.223620121534.881330.231534.88432013411.430—3188.5735合計4731.973423.136644.901473討論

手足口病病原體屬于小RNA病毒科腸道病毒屬，包括腸道病毒71(EV71)，柯薩奇病毒A組（16、4、5、7、9、10型）和B組（2、5型），?？刹《狙逍偷?，而最為常見病原體類型為EV71型及Cox Al6[2]。1957年新西蘭首次報道該病，1958年分離出CoxA，1959年命名為手足口病，1969年EV71在美國被確認(rèn)[3]。

我市手足口病發(fā)病以0~3歲散居兒童為主，每年5—8月為高發(fā)季節(jié)。病原學(xué)檢測顯示，手足口病病原體，2010—2012年以EV71和CoxA16為主，占50.00~60.00%，而2013年則以其他腸道病毒為主，占88.57%。目前手足口病檢測方法按照《衛(wèi)生部手足口病預(yù)防控制指南(2009版)》操作，即僅重點檢測EV71和CoxA16常見病原類型，而未開展其他病毒檢測，導(dǎo)致無法判斷本市目前手足口病流行的病原體具體類型。因此我們以為，應(yīng)設(shè)立手足口病病原體監(jiān)測哨點，提高腸道病毒分型檢測技術(shù)，為手足口病防控提供病原學(xué)依據(jù)。我市發(fā)生的5例重癥病例中，3例EV71感染，1例CoxA16感染，另1例為其他腸道病毒感染，因此仍需警惕EV71感染后重癥病例的出現(xiàn)。

手足口病病原體檢測受采樣時間的影響明顯，即發(fā)病后采樣時間越早，標(biāo)本檢測陽性率越高?！缎l(wèi)生部手足口病預(yù)防控制指南(2009版)》中規(guī)定，糞便及肛拭子采樣應(yīng)在發(fā)病后7 d內(nèi)采集，咽拭子應(yīng)在發(fā)病后3 d內(nèi)采集。本次檢測結(jié)果顯示，無論咽拭子還是肛拭子或是皰疹液，3 d內(nèi)采集的陽性率均明顯高于超過3天標(biāo)本，且不同標(biāo)本類型間無明顯差異，這與上海浦東報道基本一致[4]。因此,建議手足口病病原學(xué)檢測力爭在發(fā)病后3 d內(nèi)采集，可根據(jù)患兒年齡、配合程度及癥狀采樣咽拭子、肛拭子或糞便、皰疹液。

4參考文獻(xiàn)

［1］衛(wèi)生部．手足口病預(yù)防控制指南(2009版)［S］．2009．

［2］胡亞美，江載芳.實用兒科學(xué)［M］．第7版．北京:人民衛(wèi)生出版社，2002:802．

［3］于長水．天津市由CoxA16腸道病毒引發(fā)的手足口病流行［J］．中華流行病學(xué)雜志，1985，6(2):66-69．

［4］潘麗峰，劉丹，劉青，等.上海市浦東新區(qū)2010—2011年手足口病檢測情況分析［J］.中國初級衛(wèi)生保健,2011,11（25）:64-66.

(收稿日期：2013-10-24)文章編號：1004-9231(2014)04-0174-03