陶 益，季 德，蔡寶昌，陸兔林（南京中醫(yī)藥大學(xué)中藥炮制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，南京 210046）

續(xù)斷又名接骨、屬折，為川續(xù)斷科植物川續(xù)斷的干燥根，始載于《本經(jīng)》，味苦、辛，微溫，歸肝、腎經(jīng)。具有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、續(xù)折傷、止崩漏等功效。臨床常用于腰膝酸軟、風(fēng)濕痹痛、崩漏、胎漏、跌打損傷等。生品補(bǔ)肝腎、通血脈、強(qiáng)筋骨，多用于腰膝酸軟；酒炙后可引藥向外行散，增強(qiáng)通血脈之功，多用于風(fēng)濕痹痛、跌打損傷。有研究結(jié)果顯示，三萜皂苷類為續(xù)斷主要的藥效成分[1-2]。川續(xù)斷皂苷Ⅵ是續(xù)斷中主要的三萜皂苷類成分，是2010年版《中國藥典》用于控制續(xù)斷藥材質(zhì)量的指標(biāo)性成分之一。現(xiàn)代藥理研究結(jié)果顯示，續(xù)斷具有抗菌消炎、增強(qiáng)免疫、防氧化、抗衰老、促骨形成、心肌保護(hù)等多重功效，尤其是對跌打損傷、關(guān)節(jié)疼痛患者具有良好的治療效果[3]，是當(dāng)代醫(yī)藥研究的熱點(diǎn)藥物之一。續(xù)斷現(xiàn)代炮制方法主要有切片、酒炙、鹽制、炒制、麩制、制炭等，2010年版《中國藥典》僅收載續(xù)斷片、酒續(xù)斷和鹽續(xù)斷3種在臨床上應(yīng)用。本文從續(xù)斷炮制工藝出發(fā)，結(jié)合現(xiàn)代研究進(jìn)展，對不同規(guī)格續(xù)斷飲片的炮制機(jī)制進(jìn)行綜述。

1 續(xù)斷古代炮制方法

續(xù)斷古代炮制的方法很多，始載于南北朝劉宋時(shí)代，主要包括凈制、切制、酒制、米泔制、焙制、面制、炒制等。南朝宋時(shí)有酒浸焙制，唐代有米泔浸制，宋代有酒浸炒、酒浸，元代有面水炒制，明代增加了酒洗、酒拌、酒蒸、炒制等，清代有酒洗蒸、酒煎制。酒制又包括酒焙、酒炒、酒浸、酒洗、酒拌、酒蒸、酒煎等。在古代炮制方法中，以酒制法為主，續(xù)斷酒炙后可引藥上行、行散，增強(qiáng)通血脈、強(qiáng)筋骨的功效。

2 續(xù)斷各省市和《中國藥典》炮制方法

自1988年至今，全國各省和直轄市出版了一系列中藥飲片炮制規(guī)范。在續(xù)斷凈制方面，各地均要求“去雜質(zhì)”，北京、上海、湖南、安徽、廣西等地還要求篩去碎屑。在切制方面，各地一般為“濕切”（洗潤后切）。炮炙方面，除山東、吉林外，大部分地區(qū)都有續(xù)斷酒炙品和鹽炙品，廣西和上海還包括炒制品（加麥麩和清炒），浙江還包括續(xù)斷炒炭。酒炙品以文火炒續(xù)斷，顏色至微黑或灰褐色，略有酒氣，輔料黃酒用量多以100∶10、100∶15為度，加酒形式以“先拌勻、后悶潤至透”為主，北京對悶潤時(shí)間進(jìn)行了量化，為1～2h。鹽炙品以文火炒續(xù)斷，顏色至黑褐色，味微咸，輔料鹽用量多以100∶2為度，加鹽形式以“拌勻、悶潤至透”為主。

自1977年版《中國藥典》開始收載續(xù)斷，并規(guī)定了炮制方法和規(guī)格。1977年版、1985年版、1990年版、1995年版《中國藥典》只收載生續(xù)斷，均強(qiáng)調(diào)洗凈潤透、切薄片。2000年版和2005年版《中國藥典》開始收載續(xù)斷酒炙品和鹽炙品：酒炙時(shí)用文火炒顏色至微帶黑色，輔料黃酒用量為100∶10為度，加酒形式以拌勻、悶透；鹽炙時(shí)用文火炒干，輔料鹽用量為100∶2為度，加鹽形式以鹽水拌勻、悶透。2000年版和2005年版《中國藥典》新增生續(xù)斷浸出物測定項(xiàng)目，不得＜45.0%。2010年版《中國藥典》中，酒炙時(shí)輔料黃酒用量變?yōu)椤?00∶10～20”，續(xù)斷片增加含量測定（川續(xù)斷皂苷Ⅵ＞1.5%）、鑒別、檢查（水分＜15%，總灰分＜12%，酸不溶性灰分＜3%）3個(gè)項(xiàng)目，酒炙品和鹽炙品也增加了上述3個(gè)項(xiàng)目，而且鹽炙品還增加了性狀標(biāo)準(zhǔn)（表面黑褐色）。

3 續(xù)斷代表性專著炮制方法

自1985年至今，續(xù)斷被歷版《中藥炮制學(xué)》教材收載，主要有生續(xù)斷、酒續(xù)斷和鹽續(xù)斷這3種規(guī)格，并規(guī)定了炮制方法和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。教材還收載了續(xù)斷炒炭這一規(guī)格。除1985年版教材外，其他教材收載生續(xù)斷炮制時(shí)均強(qiáng)調(diào)除雜質(zhì)，在續(xù)斷片性狀方面均要求皮部墨綠色或棕色，木部灰黃色或黃褐色。除1985年版教材和1999年版教材外，大部分教材均要求續(xù)斷酒炙時(shí)黃酒被吸盡后，再用文火進(jìn)行炒制，輔料黃酒用量為100∶10或100∶12為度，加酒形式以拌勻、悶透。續(xù)斷鹽炙時(shí)，大部分教材要求用文火炒干，1985年版教材要求炒至黃黑色。輔料鹽用量均為100∶2為度，加鹽形式以鹽水拌勻、悶透。在質(zhì)量要求方面，2007年版教材和2008年版教材均要求水溶性浸出物含量不得＜45.0%，而2012年版教材增加了水分（不得＜10.0%）、總灰分（不得＞12.0%）、酸不溶性灰分（不得＞3.0%）、水溶性浸出物（不得＜45.0%）、川續(xù)斷皂苷Ⅵ（不得＜1.5%）這些標(biāo)準(zhǔn)，與2010年版《中國藥典》標(biāo)準(zhǔn)一致。

4 續(xù)斷現(xiàn)代炮制工藝研究

張丹等[4]采用正交設(shè)計(jì)法對炒制溫度、用鹽量、悶潤時(shí)間和炒制時(shí)間進(jìn)行考察，優(yōu)化續(xù)斷鹽炙工藝，得到最優(yōu)鹽炙條件為：500g續(xù)斷藥材，加10g鹽水浸潤45min，在150℃條件炒制8min。許臘英等[5]使用正交設(shè)計(jì)法對續(xù)斷酒炙工藝條件如黃酒用量（10%、20%、30%）、炒制溫度（150℃、170℃、190℃）、炒制時(shí)間（6min、8min、10min）進(jìn)行優(yōu)化，得到最佳酒炙工藝為：續(xù)斷片用10%的黃酒浸潤，下鍋溫度150℃，炒制6min。陳華曦[6]應(yīng)用正交試驗(yàn)法和方差分析對續(xù)斷水洗工藝進(jìn)行優(yōu)化，最佳水洗工藝為5倍量水、水洗4次、洗3min；最佳干燥工藝為60℃烘制17h；最佳酒炙工藝為在150℃條件下用10%黃酒炒炙6min。宋麗[7]采用正交試驗(yàn)法，選擇不同黃酒用量（10%、15%、20%、25%）、酒炙溫度（100℃、130℃、160℃、190℃）和酒炙時(shí)間（6min、8min、10min、12min）對酒炙工藝進(jìn)行優(yōu)化，最后得到最優(yōu)酒炙條件為：在100℃條件下用10%黃酒炒制6min。金奇等[8]對續(xù)斷鹽炙過程中多個(gè)工藝參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化，選擇不同鹽用量、炒制溫度、炒制時(shí)間和炒藥機(jī)轉(zhuǎn)速，得到最優(yōu)鹽炙條件為：100kg續(xù)斷用2kg食鹽，在轉(zhuǎn)速40r/min且溫度210℃下炒制12 min。

5 續(xù)斷炮制前后化學(xué)成分變化研究

馬新飛等[9]采用反相高效液相色譜（RP-HPLC）法比較了續(xù)斷不同炮制品中川續(xù)斷皂苷Ⅵ的變化。研究結(jié)果顯示，用不同輔料、不同方法加工炮制續(xù)斷，炮制品多個(gè)成分的含量較生品發(fā)生了明顯變化，而炮制品的臨床療效各有所長。提示這些變化成分可能與功效差異存在關(guān)聯(lián)，有待進(jìn)一步深入研究。

李華鵬[10]采集多個(gè)產(chǎn)地的續(xù)斷，并自制酒續(xù)斷和鹽續(xù)斷，HPLC-蒸發(fā)光散射檢測（ELSD）分析發(fā)現(xiàn)9個(gè)共有峰，與生續(xù)斷比較，酒續(xù)斷中有4個(gè)峰峰面積下降，5個(gè)峰峰面積升高；而鹽續(xù)斷中4個(gè)峰峰面積升高，川續(xù)斷皂苷Ⅵ和另外一個(gè)峰峰面積下降。值得注意的是，在酒量10%時(shí)，川續(xù)斷皂苷Ⅵ和3個(gè)峰峰面積隨酒炙溫度升高而升高；酒量為20%時(shí)，峰面積隨酒炙溫度升高而降低。

張丹等[11]研究結(jié)果顯示，總皂苷含量在酒續(xù)斷和鹽續(xù)斷中較生續(xù)斷稍有增加，指標(biāo)成分川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量升高。樊媛潔等[12]按照2010年版《中國藥典》制備的3種炮制規(guī)格制備出續(xù)斷炮制品，即續(xù)斷片、酒續(xù)斷和鹽續(xù)斷。研究結(jié)果顯示，酒續(xù)斷和鹽續(xù)斷中川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量均升高，但是前者更為明顯；續(xù)斷皂苷Ⅹ含量則下降。作者推斷可能與續(xù)斷皂苷Ⅹ水解變川成續(xù)斷皂苷Ⅵ有關(guān)。張丹等[13]參照2010年版《中國藥典》炮制工藝，制備4種續(xù)斷炮制品，即生品、酒續(xù)斷、鹽續(xù)斷和炒續(xù)斷。結(jié)果顯示，鹽續(xù)斷總生物堿含量最高，其次為生續(xù)斷、酒續(xù)斷、炒續(xù)斷。依照《全國中藥炮制規(guī)范》制備3種炮制品，即生品、鹽續(xù)斷、酒續(xù)斷。水分測定結(jié)果顯示，生品和鹽續(xù)斷水分含量較高；溶出率結(jié)果顯示：鹽續(xù)斷＞酒續(xù)斷＞生品；微量元素檢測結(jié)果顯示，酒續(xù)斷中鈣元素和鋅元素含量較高，鹽續(xù)斷中錳元素和硒元素含量最高；熊果酸含量測定發(fā)現(xiàn)酒續(xù)斷和鹽續(xù)斷中熊果酸含量較生品均升高[14-15]。

Xin N等[16]按照2010年版《中國藥典》規(guī)定炮制鹽續(xù)斷，并采集了續(xù)斷片和鹽續(xù)斷的近紅外光譜，使用3種分類器進(jìn)行分類，發(fā)現(xiàn)均具有較好地分類能力；將近紅外光譜和化學(xué)計(jì)量學(xué)手段相結(jié)合，能夠快速地區(qū)分續(xù)斷不同炮制樣品。顧曉風(fēng)等[17]首先制備生續(xù)斷-生牛膝、生續(xù)斷-炙牛膝、炙續(xù)斷-生牛膝、炙續(xù)斷-炙牛膝這4組藥對樣品，然后使用3種分類器對樣品共有指紋圖譜進(jìn)行分類。研究結(jié)果顯示，線性判別分析分類效果最好，其次為簇類獨(dú)立軟件模式分類法和偏最小二乘判別分類法。

6 續(xù)斷炮制前后藥理藥效變化研究

陳旭等[18]前期研究比較了炮制對續(xù)斷抗凝血作用的影響。研究結(jié)果顯示，續(xù)斷不同炮制品均具抗凝血作用，以酒炙續(xù)斷的作用最強(qiáng)。同時(shí)還進(jìn)行了炮制品的鎮(zhèn)痛和抗炎藥效測定。研究結(jié)果顯示，酒續(xù)斷鎮(zhèn)痛效果最好，鹽續(xù)斷和生品鎮(zhèn)痛效果一般；酒續(xù)斷抗炎效果最好，生品次之，鹽續(xù)斷最差。炮制對續(xù)斷成分和藥效作用影響的結(jié)果顯示，續(xù)斷經(jīng)酒炙后對續(xù)斷皂苷等成分產(chǎn)生不同程度的影響，且酒炙后活血通絡(luò)作用明顯增強(qiáng)。

陳華曦[6]對生續(xù)斷和酒續(xù)斷水煎液的鎮(zhèn)痛抗炎作用差異進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)兩者皆有鎮(zhèn)痛作用，但是酒續(xù)斷的鎮(zhèn)痛作用更強(qiáng)?？寡捉Y(jié)果顯示，兩者都能抑制小鼠耳廓炎癥和腫脹，無明顯差異。

辛繼蘭等[19]制備了續(xù)斷酒炙品、清炒品、鹽炙品，并比較3種炮制品和生品的鎮(zhèn)痛、抗炎和消血腫作用的差異。研究結(jié)果顯示，酒續(xù)斷的鎮(zhèn)痛效果和抗炎效果最好，可能與酒的行散作用有關(guān)；而鹽續(xù)斷的消血腫作用最好，可能與鹽的軟堅(jiān)散節(jié)作用有關(guān)。

Li F等[20]利用脂多糖（LPS）誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞模型篩選中藥中的抗炎成分發(fā)現(xiàn)，續(xù)斷提取物具有較好的抗炎活性，從而進(jìn)一步對其進(jìn)行分離，得到21個(gè)單體化合物，并對這些單體化合物進(jìn)行炎癥測試。研究結(jié)果顯示，dipasperoside A、咖啡酸、續(xù)斷苷A、續(xù)斷苷B、川續(xù)斷皂苷Ⅵ、4′-O-乙酰基續(xù)斷皂苷Ⅵ、續(xù)斷皂苷A這7個(gè)化合物具有抗炎活性，其中dipasperosideA和川續(xù)斷皂苷Ⅵ活性最好，由此推斷這兩個(gè)成分是續(xù)斷中的主要抗炎成分。

Kim BS 等[21]報(bào)道續(xù)斷二氯甲烷部分對人肺泡、骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的作用。與對照組比較，續(xù)斷二氯甲烷部分可以明顯增強(qiáng)堿性磷酸酶活性、蛋白表達(dá)骨涎蛋白和骨鈣素。研究結(jié)果顯示，二氯甲烷部份具有促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的潛能。此外，從二氯甲烷部分分離到單體化合物常春藤3-O-（2-O-乙酰基）-α-L-阿拉伯吡喃糖苷，也能明顯增加堿性磷酸酶（ALP）活性、蛋白表達(dá)水平的骨涎蛋白和骨鈣素。以上研究結(jié)果顯示，續(xù)斷二氯甲烷部分和單體常春藤3-O-（2-O-乙酰基）-α-L-阿拉伯吡喃糖苷在骨再生方面可能有臨床應(yīng)用前景。

Zhou YQ 等[22]制備了川續(xù)斷的5個(gè)不同組分（生物堿、揮發(fā)油、皂苷、環(huán)烯醚萜苷和多糖），以Aβ25-35誘導(dǎo)PC12細(xì)胞為模型，研究5個(gè)不同組分對β-淀粉樣肽誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性的保護(hù)作用。研究結(jié)果顯示，皂苷組分具有明顯的保護(hù)作用。作者對皂苷組分進(jìn)行了液相分析，結(jié)果顯示，其主要成分為川續(xù)斷皂苷Ⅵ。進(jìn)一步對川續(xù)斷皂苷Ⅵ及其常春藤苷元單獨(dú)進(jìn)行活性測試，結(jié)果顯示，川續(xù)斷皂苷Ⅵ有明顯的活性，而其苷元沒有活性。

據(jù)報(bào)道[23-24]，從川續(xù)斷根部分離得到馬錢苷酸乙酯、綠原酸、咖啡酸、馬錢苷、茶茱萸苷、丁香樹脂醇-4′，4′′-O-雙葡糖苷、asperosaponinA、asperosaponinB、asperosaponinC等，其中馬錢苷酸乙酯、馬錢苷、茶茱萸苷、asperosaponinA、asperosapon-inB、asperosaponinC具有神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用，可以抑制Aβ25-35誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡。

JiangWL等[25]研究了川續(xù)斷皂苷Ⅹ抗心肌缺血和再灌注損傷的潛在機(jī)制，給予10mg/kg劑量的川續(xù)斷皂苷Ⅹ，大鼠心肌抗心肌缺血和再灌注損傷的梗死體積減少，血流動(dòng)力學(xué)改善，心肌損傷程度減少。此外，川續(xù)斷皂苷Ⅹ可以降低大鼠血清促炎癥因子，減少高遷移率族蛋白B1、IκB-α的磷酸化和NF-κB在缺血心肌組織中的表達(dá)。

SongJS等[26]報(bào)道，中藥提取物可能會(huì)有引起血栓的風(fēng)險(xiǎn)，所以對21種中藥提取物進(jìn)行篩選，試圖發(fā)現(xiàn)具有促血小板凝血活性和促血栓形成風(fēng)險(xiǎn)的中藥。研究結(jié)果顯示，續(xù)斷提取物有促凝血活性。作者使用液相對續(xù)斷提取物進(jìn)行表征，發(fā)現(xiàn)10個(gè)化合物，其中續(xù)斷皂苷C的促凝血作用最強(qiáng)。

LiuJJ等[27]報(bào)道，續(xù)斷皂苷Ⅻ和續(xù)斷皂苷ⅫⅠ具有促進(jìn)UMR106細(xì)胞增殖的作用，并在4μm濃度下提高UMR106細(xì)胞中的堿性磷酸酶活性，而堿性磷酸酶是成骨細(xì)胞分化早期和中期的關(guān)鍵物質(zhì)。研究結(jié)果顯示，續(xù)斷皂苷Ⅻ和續(xù)斷皂苷ⅫⅠ具有促進(jìn)成骨細(xì)胞分化的作用。

JungHW等[28]用Ⅱ型膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎小鼠模型，研究續(xù)斷水提物在治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎方面的療效。在造模后的21d，續(xù)斷水提液按50mg/kg和100mg/kg提取物灌胃給藥，43d后，處死小鼠，取血樣和關(guān)節(jié)組織進(jìn)行分析。研究結(jié)果顯示，與模型組比較，續(xù)斷水提取物給藥組小鼠的關(guān)節(jié)炎得分明顯降低，血清抗Ⅱ型膠原IgG2α抗體、前列腺素、TNF-α、IL-1β和IL-6等指標(biāo)也明顯降低。此外，從病理組織切片中觀察到續(xù)斷水提取物給藥組小鼠的關(guān)節(jié)構(gòu)筑得到明顯改善。研究結(jié)果顯示，續(xù)斷水提取物具有較好的關(guān)節(jié)炎治療效果。

許建安[29]采用常規(guī)抗炎模型（二甲苯致小鼠耳廓腫脹）和鎮(zhèn)痛模型（熱板法和醋酸扭體法）等實(shí)驗(yàn)研究續(xù)斷的抗炎、鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果顯示，與模型組比較，100g/kg劑量續(xù)斷水煎液對大鼠耳廓腫脹度抑制率為45.2%，60g/kg劑量續(xù)斷水煎液給藥后，大鼠足跖腫脹度明顯減輕，10g/kg劑量續(xù)斷水煎液對大鼠肉芽組織增生抑制率達(dá)到44.8%，2g/kg劑量續(xù)斷水煎液給藥可以明顯增加大鼠痛閾時(shí)間，對大鼠扭體抑制率為55.8%。以上研究結(jié)果顯示，續(xù)斷水煎液具有良好的抗炎和鎮(zhèn)痛效果。

武密山等[30]研究川續(xù)斷皂苷Ⅵ對骨骼干細(xì)胞分化成熟的作用。研究結(jié)果顯示，1μm和10μm濃度川續(xù)斷皂苷Ⅵ可以明顯提高成骨細(xì)胞中骨鈣素含量和增強(qiáng)堿性磷酸酶的活性。此外，川續(xù)斷皂苷Ⅵ明顯增加核結(jié)合因子α-1（Cbfα-1）mRNA的表達(dá)，而Cbfα-1是調(diào)節(jié)骨鈣素基因表達(dá)的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子。因此，續(xù)斷皂苷Ⅵ主要通過調(diào)節(jié)Cbfα1、骨鈣素、堿性磷酸酶起到促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖和分化的作用。

7 結(jié)語

如何將現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)與理論引入傳統(tǒng)炮制理論研究中、續(xù)斷炮制前后自身內(nèi)在化學(xué)成分群發(fā)生了怎樣的量變和質(zhì)變、續(xù)斷炮制后成分群變化與功效之間有何種相關(guān)性？這些問題已嚴(yán)重影響了續(xù)斷在臨床上的合理應(yīng)用，同時(shí)也是制約中藥炮制理論在現(xiàn)代科學(xué)中進(jìn)一步發(fā)展的瓶頸。解決上述問題是未來續(xù)斷炮制工藝和炮制機(jī)制研究的發(fā)展方向。

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