馮 冰, 王 浩, 沈元弟, 王 琥, 王紅娣

(解放軍第四一一醫(yī)院 腎內(nèi)科, 上海, 200081)

青少年系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是指包括青春期前后的少年時(shí)期患病，發(fā)病率高，預(yù)后差，女性發(fā)病率高于男性，在疾病的發(fā)生發(fā)展中，往往易導(dǎo)致腎功能衰竭[1]。青少年狼瘡性腎炎的臨床中的診斷方法有很多，如血清肌酐(sCr)、尿微量白蛋白(Albu)、24 h肌酐清除率等，但是這些指標(biāo)在SLE腎炎的早期診斷敏感性和特異性很低[2]。中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)屬脂蛋白超家族成員，是一種分子量較小的分泌性蛋白，正常表達(dá)于中性粒細(xì)胞、肝細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞等[3-5]。研究[6]表明NGAL可以預(yù)測(cè)不同情況下的早期急性腎損傷，如心臟術(shù)后、器官移植、膿毒血癥和ICU治療的病人。尿NGAL目前已被很多研究證實(shí)可以作為急性腎損傷早期檢測(cè)的生物學(xué)指標(biāo)，抗感染治療后NGAL會(huì)出現(xiàn)明顯的降低[7]。本研究的目的是為了進(jìn)一步探討NGAL在青少年狼瘡性腎炎中的臨床診斷價(jià)值，為青少年狼瘡性腎炎的診療提供更充分的臨床依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2012年3月—2014年3月本院確診的青少年狼瘡性腎炎患者30例為觀察組，其中男6例，女24例；年齡9～17歲，平均(12±1.2)歲。所有患者均符合2009年美國(guó)風(fēng)濕病協(xié)會(huì)對(duì)SLE的分類修訂標(biāo)準(zhǔn)。所有研究對(duì)象的SLE腎炎患者除SLE外未患其他任何疾病。另選取本院同期體檢的健康受試者10例為對(duì)照組，其中男2例，女8例；年齡10～16歲，平均(11±2.5)歲。

1.2 方法

1.2.1 尿NGAL檢測(cè)：分別收集2組24 h和48 h清潔中段尿3 mL, 置無(wú)致熱源及內(nèi)毒素的試管中以3 000 r/min的速度離心3 min。取上清液1 mL, 置于潔凈EP管中。采用散射比濁法分析檢測(cè)NGAL(檢測(cè)試劑盒，南京諾爾曼生物技術(shù)有限公司生產(chǎn))。實(shí)驗(yàn)步驟和試劑劑量嚴(yán)格按照試劑操作說明書，且每次檢測(cè)前都進(jìn)行質(zhì)控校準(zhǔn)。檢測(cè)正常參考范圍為<45 ng/mL。

1.2.2 sCr檢測(cè)：采集患者清晨空腹靜脈血5 mL, 以3 000 r/min的速度離心3 min, 分離血清后，采用苦味酸法檢測(cè)sCr水平。男性正常參考范圍為62～115 μmol/L, 女性正常參考范圍為53～97 μmol/L。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比分析2組24 h和48 h的尿NGAL和sCr水平變化及觀察組患者24 h和48 h尿NGAL和sCr水平異常的患者例數(shù)。

2 結(jié) 果

2.1 2組24 h和48 h檢測(cè)尿NGAL和sCr水平比較

組間比較顯示，觀察組24 h和48 h檢測(cè)尿NGAL和血清sCr水平均顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。組內(nèi)比較顯示，與24 h檢測(cè)值比較，對(duì)照組48 h的尿NGAL和血清sCr水平均無(wú)顯著變化(P>0.05), 而觀察組的尿NGAL和血清sCr水平均有顯著升高(P<0.01), 見表1。

表1 2組24 h和48 h檢測(cè)尿NGAL和血清sCr水平比較

與對(duì)照組比較，*P<0.05, **P<0.01; 與24 h比較，##P<0.01。

2.2 觀察組患者24、48 h的尿NGAL和sCr水平異常比較

24 h NGAL的檢測(cè)結(jié)果均為異常，而sCr僅10例異常, 48 h再檢測(cè)時(shí)，觀察組患者NGAL和sCr均出現(xiàn)異常，且48 h后sCr檢測(cè)異常者與24 h檢測(cè)sCr異常者比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

3 討 論

青少年系統(tǒng)性紅斑狼瘡較成人SLE發(fā)病率高，器官受累早，病程進(jìn)展快，往往導(dǎo)致體內(nèi)多個(gè)臟器的損害，例如皮膚和黏膜、心臟、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肺臟、腎臟及血液系統(tǒng)等。國(guó)內(nèi)外研究報(bào)道顯示，SLE早期腎臟病變不僅局限于腎小球，腎小管、間質(zhì)及血管均存在不同程度的損傷，且病變的發(fā)生率極高。腎臟發(fā)育的基本特征是間質(zhì)細(xì)胞向上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化，這種轉(zhuǎn)變受輸尿管芽分泌因子的控制，研究[8]發(fā)現(xiàn)輸尿管芽分泌因子誘導(dǎo)上皮細(xì)胞可形成NGAL。

狼瘡性腎炎影響腎單位功能，包括內(nèi)皮細(xì)胞和腎小管細(xì)胞[1]。正常生理情況，NGAL在人體內(nèi)是被完全吸收的，腎損傷除外。細(xì)胞因子在狼瘡性腎炎的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用[9]。最新前瞻性研究表明，在心臟手術(shù)后的急性腎損傷的早期診斷中, NGAL具有高敏感性和特異性[10]。尿NGAL是一個(gè)具有較高潛力的早期預(yù)測(cè)青少年系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動(dòng)性的生物學(xué)指標(biāo)，急性腎損傷后能觀察到NGAL水平顯著提高[12-13]。在慢性腎臟疾病中，NGAL水平也會(huì)出現(xiàn)顯著上升，與疾病的嚴(yán)重性密切相關(guān)[14]。且NGAL在受損的腎小管細(xì)胞的修復(fù)和重生中可能起到了保護(hù)性作用[2]。有研究將尿NGAL和血清NGAL檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了對(duì)比，結(jié)果發(fā)現(xiàn)尿NGAL更能體現(xiàn)出青少年狼瘡性腎炎的診斷意義，并可將尿NGAL作為狼瘡性腎炎的預(yù)測(cè)性生物學(xué)分子之一[11]。

NGAL與青少年狼瘡性腎炎的發(fā)生發(fā)展具有一致性[12], 這在本研究中也得到證實(shí)。且本研究還表明，NGAL較之于sCr能早期預(yù)測(cè)青少年狼瘡性腎炎腎損害，在青少年狼瘡性腎炎中的早期診斷中具有重要的價(jià)值。腎臟損傷程度占到整個(gè)腎臟的一半以上時(shí)，才會(huì)引起sCr升高。因此，sCr并不能反映早期、輕度的腎功能下降。但本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明, NGAL和sCr一樣均能反映腎損傷的嚴(yán)重程度，評(píng)估腎功能。NGAL和sCr在24 h、48 h的檢測(cè)結(jié)果表明, NGAL和sCr 均能早期預(yù)測(cè)腎損傷的情況，對(duì)臨床狼瘡性腎炎患者的診療具有重要臨床意義。本結(jié)果對(duì)同一患者同時(shí)檢測(cè)尿NGAL和sCr, 其中有18例患者sCr仍在正常范圍，而此時(shí)尿NGAL水平已經(jīng)提示腎功能已出現(xiàn)部分損傷。尿NGAL較之于sCr, 能早期預(yù)測(cè)青少年狼瘡性腎炎腎損害。

由于本研究所選取樣本量少，尚未進(jìn)行多中心臨床研究, NGAL與青少年系統(tǒng)性紅斑狼瘡和狼瘡性腎炎的相關(guān)性還需更多的臨床病例加以證實(shí)。

[1] Watson L, Beresford M W. Urine biomarkers in juvenile-onset SLE nephritis[J]. Pediatr Nephrol, 2013, 28(3): 363.

[2] Yang C C, Hsieh S C, Li K J. Urinary Neutrophil Gelatinase-Associated Lipocalin Is a Potential Biomarker for Renal Damage in Patients with Systemic Lupus Erythematosus[J]. Journal of Biomedicine and Biotechnology, 2012, 2012: 759313.

[3] 溫曉宏, 鄭毅, 陳珊珊, 等. 中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白單核細(xì)胞趨化蛋白-1及腫瘤壞死因子樣凋亡的微弱誘導(dǎo)劑在狼瘡腎炎中的臨床意義[J]. 中華風(fēng)濕病學(xué)雜志, 2013, 17(9): 611.

[4] Qing X, Zavadil J, Crosby M B, et al. Nephritogenic anti-DNA antibodies regulate gene expression in MRL/lpr mouse glomerular mesangial cells[J]. Arthritis Rheum, 2006, 54(7): 2198.

[5] Ishimori M L, Agarwal M, Beigel R, et al. Systemic lupus erythematosus cardiomyopathy-a case series demonstrating a reversible form of left ventricular dysfunction[J]. Echocardiography, 2014, 31(5): 563.

[6] Giasson J, Li G H, Chen Y, Neutrophil Gelatinase-Associated Lipocalin (NGAL) as a New Biomarker for Non-Acute Kidney Injury (AKI) Diseases[J]. Inflammation & Allergy - Drug Targets, 2011, 10(4): 272.

[7] Holzscheiter L, Beck C, Rutz S, et al. NGAL, L-FABP, and KIM-1 in comparison to established markers of renal dysfunction[J]. Clin Chem Lab Med, 2014, 52(4): 537.

[8] Cowland J B, Sorensen O E, Sehested M, et al. Neutrophil gelatinase associated lipocalin is up--regulated in human epithelial cells by IL-1β, but not by TNF-α[J]. J Immunol, 2003, 171(12): 6630.

[9] Adhya Z, Borozdenkova S, Karim M Y. The role of cytokines as biomarkers in systemic lupus erythematosus and lupus nephritis[J]. Nephrol Dial Transplant, 2011, 26(10): 3273.

[10] Hermine H I. Brunner M, Rutherford C, et al. Urinary Neutrophil Gelatinase-Associated Lipocalin as a Biomarker of Nephritis in Childhood-Onset Systemic Lupus Erythematosus[J]. Arthritis & Rheumatism, 2006, 54(8): 2577.

[11] Suzuki M, Wiers M, Klein-Gitelman M S, et al. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin as a biomarker of disease activity in pediatric lupus nephritis[J]. Pediatr Nephrol, 2008, 23(3): 403.

[12] Hinze H C, Suzuki M, Klein-Gitelman M, et al. Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin Is a Predictor of the Course of Global and Renal Childhood-Onset Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity[J]. Arthritis & Rheumatism, 2009, 60(9): 2772.

[13] Bolignano D, Lacquaniti A, Coppolino G, et al. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin reflects the severity of renal impairment in subjects affected by chronic kidney disease[J]. Kidney Blood Press Res, 2008, 31(4): 255.

[14] Torregrosa I, Montoliu C, Urios A, et al. Urinary KIM-1, NGAL and L-FABP for the diagnosis of AKI in patients with acute coronary syndrome or heart failure undergoing coronary angiography[J]. Heart Vessels, 2014, [Epub ahead of print].