劉淑芬 張敏

·藥物研究·

大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs進(jìn)展及耐藥性調(diào)查

劉淑芬 張敏

目的了解大腸埃希菌臨床感染及其耐藥性變化。方法收集2000至2009年所有從臨床標(biāo)本中分離的大腸埃希菌1 631株，觀察其檢出率及耐藥性變化。用全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)及其對(duì)應(yīng)的鑒定卡進(jìn)行鑒定；體外藥物敏感性試驗(yàn)用最低抑菌濃度法；超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)檢測(cè)用表型確證方法進(jìn)行。結(jié)果2000至2009年其分離率維持在12%～20%。產(chǎn)ESBL菌株由2000年18%提高到2009年61%。2000至2005年是產(chǎn)ESBL菌株迅速增長(zhǎng)期。藥物敏感性趨勢(shì)氨芐西林13%以下，一代頭孢菌素從35%降到15%，三代頭孢從78%降到40%，其他變化不明顯，碳青霉烯類沒(méi)有耐藥。結(jié)論大腸埃希菌在感染中的分離率變化不大，產(chǎn)ESBL菌株比率增長(zhǎng)明顯，ESBLS檢測(cè)應(yīng)常規(guī)進(jìn)行，頭孢類抗菌藥物耐藥性提高明顯，其他抗菌藥物耐藥性變化不明顯。

大腸埃希菌；超廣譜β-內(nèi)酰胺酶；感染；耐藥性

隨著廣譜抗生素的廣泛使用和不合理應(yīng)用，細(xì)菌耐藥性日趨嚴(yán)峻。產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰腦酶(ESBLs)是目前革蘭陰性菌耐藥的主要原因之一,革蘭陰性菌株往往具有多重耐藥性,常給臨床抗感染治療帶來(lái)很大困難。ESBLs主要由腸桿菌科細(xì)菌產(chǎn)生，臨床最常見(jiàn)的為大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌。為了解ESBLs的感染情況和耐藥性，本文收集遷西縣人民醫(yī)院2000至2009年所有從臨床標(biāo)本中分離的大腸埃希菌1 631株，進(jìn)行ESBLs的檢測(cè)及耐藥分析，為臨床合理使用抗生素提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 所有標(biāo)本為臨床送檢標(biāo)本，分離到的大腸埃希菌進(jìn)入本次調(diào)查，1周內(nèi)同一患者同樣標(biāo)本中分離的不重復(fù)記入。

1.2 標(biāo)本接種 血培養(yǎng)以血液增菌方法增菌，陽(yáng)性后分離培養(yǎng)；各類無(wú)污染的穿刺液標(biāo)本接種血/中國(guó)蘭瓊脂平板并同時(shí)增菌，增菌按血培養(yǎng)進(jìn)行；可能存在污染的標(biāo)本或其他的標(biāo)本接種血/中國(guó)蘭瓊脂。

1.3 培養(yǎng) 血培養(yǎng)以血液增菌培養(yǎng)儀及對(duì)應(yīng)的增菌培養(yǎng)瓶進(jìn)行；接種后的血/中國(guó)蘭瓊脂平板35℃，空氣，培養(yǎng)。

1.4 細(xì)菌鑒定 用全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)及對(duì)應(yīng)的鑒定卡片對(duì)分離的細(xì)菌進(jìn)行鑒定。

1.5 藥敏實(shí)驗(yàn) 用最低抑菌濃度(MIC)法進(jìn)行；判斷標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)和名稱更改后的CLSI標(biāo)準(zhǔn)。ESBLs檢測(cè)用表型確正方法。

2 結(jié)果

2.1 10年中大腸埃希菌感染中的分離率及各年產(chǎn)ESBLS 菌株比率 2000至2009年10年中大腸埃希菌在感染中的分離率維持在12%～20%。期間變化沒(méi)有規(guī)律。產(chǎn)ESBLS 菌株比率從2000年的18%[1]到2005年快速升高到68%。2005年之后維持在高水平。見(jiàn)表1。

表1 10年中大腸埃希菌感染中分離率及各年產(chǎn)ESBLS 菌株比率

2.2 10年中大腸埃希菌體外藥物敏感性結(jié)果 2000至2009年10年中青霉素類和一代頭孢敏感性差，三代頭孢敏感性與產(chǎn)ESBL相反。慶大霉素、環(huán)丙沙星和復(fù)方新諾明敏感性也很差。啊米卡星、呋喃妥因始終維持較高的敏感性。大腸埃希菌對(duì)亞胺培南一直保持敏感。見(jiàn)表2。

表2 10年中大腸埃希菌體外藥物敏感性結(jié)果

3 討論

大腸埃希菌是臨床最常見(jiàn)的感染菌之一，關(guān)注其感染中的分離率和耐藥性變化對(duì)治療和預(yù)防有極大的現(xiàn)實(shí)意義。感染中某一細(xì)菌分離率主要與感染類型和其耐藥性有關(guān)。從本資料看出盡管大腸埃希菌產(chǎn)ESBL增長(zhǎng)迅速，但其分離率并沒(méi)有雖之提高，說(shuō)明其他細(xì)菌耐藥性也有了一定的提高 。在陰性細(xì)菌感染中，大腸埃希菌的分離率由原來(lái)的第一位被銅綠假單胞菌取代之后一直保持第二的位置，說(shuō)明10年中感染的類型變化不大。

大腸埃希菌對(duì)氨芐西林的敏感性10年中一直很低，氨芐西林又是其他廣譜青霉素類的代表藥物，所以在沒(méi)有敏感證據(jù)且常由大腸埃希菌引起的感染治療時(shí)應(yīng)避免使用。頭孢噻吩是一代頭孢菌素體外藥敏試驗(yàn)的指示藥物，他低的敏感性說(shuō)明多數(shù)一代頭孢也不適合其感染的治療。頭孢唑林是一代頭孢菌素中抗菌活性最好的之一，但敏感性也很低。大腸埃希菌對(duì)青霉素類和一代頭孢菌素耐藥多由細(xì)菌產(chǎn)傳統(tǒng)的廣譜β-內(nèi)酰胺酶TEM-1，TEM-2和SHV引起[2]，說(shuō)明傳統(tǒng)β-內(nèi)酰胺酶在大腸埃希菌中相當(dāng)普遍。

三代頭孢菌素中頭孢哌酮敏感性低于頭孢曲松和頭孢他啶。頭孢曲松和頭孢他啶敏感性在200至2005年中迅速降低，且2005至2009年一直維持在較低水平。腸桿菌科細(xì)菌特別是大腸埃希菌、克雷伯菌屬和奇異變形桿菌對(duì)三代頭孢菌素耐藥最主要原因就是產(chǎn)ESBLs[2]。ESBLs是由傳統(tǒng)的廣譜β-內(nèi)酰胺酶TEM-1，TEM-2和SHV某一基因位點(diǎn)突變后表達(dá)所致[3]，但其水解β-內(nèi)酰胺環(huán)能力卻有了極大提高，其所表達(dá)的ESBLs不僅可以分解青霉素類、一、二代頭孢菌素，對(duì)三代頭孢菌素也有很強(qiáng)的分解能力。所以，NCCLs和更名后的CLSI規(guī)定，產(chǎn)ESBLs菌株感染臨床以上述藥物治療無(wú)效。我們的結(jié)果中只有及個(gè)別耐藥不是由于產(chǎn)ESBLs引起，證明了大腸埃希菌對(duì)三代頭孢耐藥主要其產(chǎn)ESBLs引起。值得注意的是產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌約80%對(duì)頭孢他啶體外藥物敏感檢測(cè)結(jié)果為敏感，這與基因型種類有關(guān)[4]。如果對(duì)大腸埃希菌不檢測(cè)ESBL，則其體外藥敏試驗(yàn)結(jié)果很容易誤導(dǎo)臨床治療。

其他類抗菌藥物敏感性變化不明顯。但慶大霉素、復(fù)方新諾明、環(huán)丙沙星敏感性很低。啊米卡星和呋喃妥因還維持較高敏感性。我們的結(jié)果中還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)亞胺培南不敏感的菌株。

大腸埃希菌在感染中的分離率10年間變化不大。大腸埃希菌產(chǎn)ESBL菌株比率增長(zhǎng)明顯，ESBLS檢測(cè)必須常規(guī)進(jìn)行；其他抗菌藥物耐藥性變化不明顯但敏感性很低。啊米卡星、呋喃妥因和亞胺培南敏感性高。

1 張敏，張迎春 我院產(chǎn)ESBL E.coli藥敏特點(diǎn)分析.承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2002,19:16-17.

2 陳民均.細(xì)菌對(duì)β-內(nèi)酰胺藥的耐藥性及檢測(cè)方法.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，2001，24：197.

3 應(yīng)春妹，陸麗，汪雅萍，等.大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶檢測(cè)及其耐藥基因分析.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)2007，22:272-275.

4 孫景勇，倪語(yǔ)星.大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的基因分型.中國(guó)抗感染化療雜志,2002,4:211-214.

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10.3969/j.issn.1002-7386.2014.05.063

064300 河北省遷西縣人民醫(yī)院(劉淑芬)；承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院(張敏)

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2013-11-12)