王月茹 張 莉 張 建 謝 偉 陜西國際商貿(mào)學(xué)院醫(yī)藥學(xué)院（咸陽 712046）

沙棘黃酮類化合物是沙棘的主要有效成分之一，藥理研究表明，其具有抗心肌缺血、抗心率失常、增強機體免疫、抗衰老、抗腫瘤、抗菌等廣泛的作用[1]。但因沙棘總黃酮類物質(zhì)在水中溶解度較小，導(dǎo)致藥物在胃腸道吸收差、生物利用度低等缺點。自微乳化釋藥系統(tǒng)（SMEDDS）是由油相、乳化劑和助乳化劑形成均一的透明藥液，在胃腸道或環(huán)境溫度37℃溫和攪拌的情況下，能自發(fā)乳化形成粒徑在100～500nm的乳劑[2]。

為了提高沙棘總黃酮口服生物利用度，本試驗擬將成沙棘總黃酮制成自微乳化制劑。

1 儀器與試藥 UV-2450紫外－見分光光度計（日本島津公司）；RCZ-1A型溶出試驗儀（上海黃海藥檢儀器廠）；粒徑分析儀（Brookhaven Instruments Corp）；蘆丁對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號100080-201103）；沙棘總黃酮（青海康普生物科技股份有限公司，批號：20110503）；Transcutol P （法國 Gattefosse公司）；吐溫-80（廣州化學(xué)試劑廠）；油酸乙酯（上海飛祥化工廠）；其它試劑為分析醇。

2 方法與結(jié)果

2.1 偽三元相圖的繪制 經(jīng)預(yù)實驗，選擇對沙棘總黃酮溶解度大及乳化能力較好的自乳化輔料，確定以吐溫-80作為乳化劑，以Transcutol P為助乳化劑，分別配制不同處方比例的自乳化液2g，攪拌混合均勻后，用蒸餾水稀釋50倍，攪拌均勻。以目測的方法進(jìn)行考察，以能形成澄清或藍(lán)白色乳液作為標(biāo)準(zhǔn)溶液，采用Origin7.5軟件，其中以乳化劑、助乳化劑與油相各為一相，以油酸乙酯作為油相。繪制自微乳化區(qū)域，進(jìn)行處方比例的優(yōu)選[3，4]。

圖1 吐溫-80-TranscutolP-油酸乙酯

從圖1結(jié)果可以看出：形成自乳化區(qū)域面積的油酸乙酯含量為0%～50%，吐溫-80含量為20%～90%，Transcutol P含量為20%～90%，為了進(jìn)一步優(yōu)化自微乳化制劑處方配比提供參考依據(jù)。

2.2 處方比例優(yōu)選 A.平均粒徑測定：在自微乳化區(qū)域中，按照實驗設(shè)計的處方比例配制自微乳液10g，并加入自微乳液重量5%的藥物，攪拌混合均勻后，用蒸餾水稀釋50倍后，測定其粒徑大小。B.自乳化時間的測定：取含藥的自微乳0.5mL，于200mL蒸餾水為溶出介質(zhì)，溫度為 （37±0.5）℃，轉(zhuǎn)速為50r／min，待自微乳液接觸溶液開始計時，測定完全形成均勻乳液的時間。

表1 自微乳化處方優(yōu)選

考慮處方中乳化劑用量過大，可能會刺激胃腸道，易產(chǎn)生毒副作用，以油相用量最多、乳化劑用量最少、粒徑較小及自乳化時間較短為評判原則，綜合比較后，確定吐溫80-Transcutol P-油酸乙酯50∶40∶10為最優(yōu)處方。

2.3 沙棘總黃酮SMEDDS的制備 按照優(yōu)選的自微乳化處方吐溫80-Transcutol P-油酸乙酯50∶40∶10，加入5%沙棘總黃酮原料藥，攪拌均勻，水浴37℃，放置8h，即得沙棘總黃酮SMEDDS。

2.4 粒 徑 取沙棘總黃酮SMEDDS 0.5mL滴入25mL蒸餾水中，輕輕搖勻，用粒徑分析儀測定，其粒徑大小及分布。結(jié)果表明，經(jīng)水稀釋，乳化后的平均粒徑111.2nm，PDI 0.201，粒徑分布均勻。

2.5 體外溶出度測定

2.5.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精密稱取蘆丁對照品20.0mg，加乙醇適量，放冷，用乙醇定容，稀釋成12﹑24﹑36﹑48﹑60﹑72μg／mL系列濃度，加5%NaNO2溶液1mL，搖勻，靜置6min，再加入10%Al（NO3）3溶液1mL，搖勻，繼續(xù)靜置6min，加1mol／L NaOH溶液10mL，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，靜置15min，以相應(yīng)試劑為空白，測定510nm處吸光度。計算回歸方程為：A＝0.0108C-0.0059，r＝0.9992。

2.5.2 回收率實驗：分別稱取蘆丁對照品15mg、20mg、25mg于100mL容量瓶中，分別加入空白自乳化輔料，加乙醇至稀釋至刻度，搖勻，過濾，吸取續(xù)濾液1mL，用蒸餾水定容至25mL，再照“標(biāo)準(zhǔn)曲線測定方法”，測定吸光度，計算回收率，結(jié)果表明，低、中、高濃度的回收率分別為99.17%、101.26%、101.37%。

2.5.3 溶出度測定：參照中國藥典2010年版二部溶出度測定法（附錄XC第二法），分別稱取沙棘總黃酮SMEDDS0.5g和等量的沙棘總黃酮25mg，以900mL蒸餾水為溶出介質(zhì)，溫度為（37±0.5）℃，轉(zhuǎn)速為50r·min－1，依法操作，分別于5、10、20、30、45、60min取樣5mL，濾過后，精密量取濾液2mL，分別置于25mL容量瓶中，按照“標(biāo)準(zhǔn)曲線方法”測定510nm吸光度，計算樣品中總黃酮溶出量。實驗結(jié)果可知：沙棘總黃酮SMEDDS在30min溶出度達(dá)65.2%，而原料藥45min溶出度僅為17.5%，說明SMEDDS可顯著提高水難溶性藥物沙棘總黃酮的溶出度。

3 討 論 乳劑的粒徑大小是影響藥物吸收的主要因素，乳滴的粒徑越小，生物利用度越好。本實驗采用動態(tài)光散射技術(shù)，該方法可用于測定自乳化藥液分散后所形成乳液粒子的粒徑的大小和分布狀況。多分散指數(shù)（PDI）是指粒徑分布大小的指數(shù)，數(shù)值越小，則粒徑分布范圍越窄，表明所制備的粒子大小越均勻。為了保證樣品粒徑檢測的準(zhǔn)確性，樣品濃度應(yīng)控制在一定范圍內(nèi)，本次試驗稀釋倍數(shù)在50倍。對沙棘總黃酮自微乳化制劑進(jìn)行6個月常溫穩(wěn)定性考察，結(jié)果該制劑澄清透明，未出現(xiàn)分層或沉淀現(xiàn)象。在今后的研究中，應(yīng)進(jìn)一步研究沙棘總黃酮SMEDDS體內(nèi)藥動學(xué)研究。

[1]劉鳳云.沙棘總黃酮的藥理作用概況[J].中藥材，2004，27（2）：145-146.

[2]袁海建，陳 彥，賈曉斌.中藥自微乳傳遞系統(tǒng)的研究與應(yīng)用[J].中華中醫(yī)藥雜志，2008，23（6）：524-527.

[3]張 建，葉珍珍，崔升淼.山楂葉總黃酮固體自乳化顆粒的處方優(yōu)化和評價[J].中國實驗方劑藥學(xué)，2012，18（4）：15-16.

[4]雷 俊，吳正紅，平其能，等.靛玉紅自乳化釋藥系統(tǒng)的體外評價[J].中成藥，2008，30（7）：969-970.