陽梅++++++萬光平++++++劉芳++++++楊婕++++++曹霞++++++陽進(jìn)

[摘要] 目的 探討新生兒窒息后缺氧缺血性腦病（HIE）患兒血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）的動態(tài)變化及意義。 方法 收集2005年1月～2012年12月住院治療的足月窒息新生兒75例（窒息組）和健康足月新生兒50例（對照組），采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測兩組新生兒出生后1、3、7 d時血清NSE濃度變化，并分析其變化與窒息后HIE的關(guān)系。 結(jié)果 出生后1、3、7 d，窒息組新生兒血清NSE濃度均明顯高于對照組[（44.50±12.08） μg/L vs （15.59±6.25） μg/L，（42.65±12.43） μg/L vs （15.38±5.84） μg/L，（37.90±9.50） μg/L vs （13.92±5.37） μg/L]，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05 ）。重度窒息新生兒血清NSE濃度明顯高于輕度窒息新生兒[（58.95±14.85） μg/L vs （29.15±9.32） μg/L，（62.95±19.13） μg/L vs （22.35±5.75） μg/L，（57.35±13.75） μg/L vs （18.45±5.25） μg/L]，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05 ）。出生后1、3、7 d，HIE新生兒19例血清NSE濃度逐漸升高，而MRI正常新生兒56例血清NSE濃度逐漸下降，HIE新生兒血清NSE濃度均明顯高于MRI正常新生兒[（59.84±15.09） μg/L vs （32.95±12.86） μg/L，（63.95±19.21） μg/L vs （25.73±6.75） μg/L，（ 68.25±19.79） μg/L vs （19.62±5.94） μg/L]，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 監(jiān)測血清NSE濃度動態(tài)變化有助于早期輔助判斷窒息新生兒HIE。

[關(guān)鍵詞] 窒息，新生兒；缺氧缺血性腦??；神經(jīng)元特異性烯醇化酶

[中圖分類號] R722.1[文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A[文章編號] 1674-4721（2014）06（a）-0065-03

Significance of the variations of serum neuron-specific enolase level in hypoxic-ischemic encephalopathy neonatorum

YANC Mei WAN Guang-ping LIU Fang YANG Jie CAO Xia YANG Jin

Department of Neonatai Intensive Care Unit,Meishan People′s Hospitai of Sichuan Province,Meishan 620010,China

[Abstract] Objective To study the significance of the variations of serum neuron specific enolase (NSE) level in hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE) neonatorum. Methods The serum NSE level were detected in 75 asphyxia neonatorum (asphyxia group) and 20 normal neonatomm (control group) by the method of ELISA after parturition 1,3 and 7 days.The relation of serum NSE level and hypoxic ischemic encephalopathy was analyzed. Results After parturition 1,3 and 7 days,the serum NSE level in asphyxia group was higher than that in control group [(44.50±12.08) μg/L vs (15.59±6.25) μg/L,(42.65±12.43) μg/L vs (15.38±5.84) μg/L,(37.90±9.50) μg/L vs (13.92±5.37) μg/L],there had significant difference (P<0.05).The serum NSE level in sever asphyxia group was higher than that in mild asphyxia group [(58.95±14.85) μg/L vs (29.15±9.32) μg/L,(62.95±19.13) μg/L vs ( 22.35±5.75) μg/L,(57.35±13.75) μg/L vs (18.45±5.25) μg/L],there had significant difference (P<0.05).After parturition 1,3 and 7 d,the serum NSE level in HIE neonatorum(19 cases) was increased and in MRI normal neonatorum(56 cases) was decreased,the serum NSE level in HIE neonatorum was higher than that in MRI normal neonatorum [(59.84±15.09) μg/L vs (32.95±12.86) μg/L,(63.95±19.21) μg/L vs (25.73±6.75) μg/L,(68.25±19.79) μg/L vs (19.62±5.94) μg/L],there had significant difference(P<0.05). Conclusion The variations of serum NSE level can be the important indicator to monitor HIE in asphyxia neonatorum.

[Key words] Asphyxia neonatorum;Hypoxic-ischemic encephalopathy;Neuron-specific enolase

近年來，缺氧缺血性腦?。╤ypoxic-ischemic encephalopathy，HIE）在新生兒疾病中較為常見，該病嚴(yán)重影響患兒的腦部功能發(fā)育且致殘率高，有40%～50%的患兒死亡或留下嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，如腦癱、吞咽困難、認(rèn)知缺陷、視覺損傷、驚厥、癲癇、睡眠障礙、智力低下等[1]，早期診斷、早期干預(yù)是治療窒息后HIE、降低圍生期病死率的關(guān)鍵，因此，尋找簡便、安全、準(zhǔn)確有效的客觀指標(biāo)對窒息后腦損傷的判定，對降低新生兒窒息后的病死率及傷殘率，提高生存質(zhì)量有重要意義。大量動物及臨床試驗已經(jīng)證實，神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron-specific enolase，NSE）是可靠的早期評估成年人缺氧缺血性腦損傷或顱內(nèi)出血敏感而特異的血清生化指標(biāo)，但NSE能否判定新生兒窒息程度及預(yù)測腦損傷尚處于探索階段[2-4]。本研究對75例窒息新生兒和50例健康新生兒血清NSE濃度進(jìn)行了動態(tài)檢測，并觀察其與窒息后HIE發(fā)生及預(yù)后的關(guān)系，旨在為進(jìn)一步研究窒息新生兒HIE的發(fā)病機(jī)制及防治措施提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2012年1月～2014年1月在本院住院治療的足月窒息新生兒75例（窒息組），出生時均有窒息史，均符合第7版《實用兒科學(xué)》新生兒窒息的診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中男40例，女35例，胎齡（39.0±0.7）周；出生時體重（2.8±0.36） kg；輕度窒息（1 min Apgar評分4～7分）48例，重度窒息（1 min Apgar評分0～3分）27例。另選擇同期健康足月新生兒50例（對照組），男26例，女24例，胎齡（38±1）周；出生時體重（3.0±0.25） kg。兩組新生兒均排除產(chǎn)傷、先天性畸形、先天代謝性疾病、腫瘤、嚴(yán)重感染等。兩組性別、年齡、體重及孕周等差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 血清NSE濃度檢測

對兩組新生兒分別于出生后1、3、7 d時采集外周靜脈血2 ml，在室溫下，以3000 r/min離心15 min（離心半徑13.5 cm），分離血清，置-20℃冰箱保存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測血清NSE水平，試劑盒購自天津市協(xié)和醫(yī)藥科技有限公司，操作由專人按試劑盒說明書嚴(yán)格執(zhí)行。

1.3 HIE評價

75例窒息新生兒均于出生后7 d行頭顱MRI檢查，以評價HIE情況。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 10.0軟件處理數(shù)據(jù)，計量資料以x±s表示，采用t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組新生兒血清NSE濃度動態(tài)變化的比較

窒息組新生兒血清NSE濃度均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表1），窒息組輕度窒息新生兒血清NSE濃度逐漸下降，重度窒息新生兒血清NSE濃度逐漸升高，且重度窒息新生兒血清NSE濃度明顯高于輕度窒息新生兒，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表2）。

表1 兩組新生兒血清NSE濃度動態(tài)變化的比較（μg/L，x±s）

表2 輕度窒息組與重度窒息組新生兒血清NSE濃度動態(tài)變化的

比較（μg/L，x±s）

2.2 窒息新生兒血清NSE濃度動態(tài)變化與HIE的關(guān)系

75例窒息新生兒在出生后7 d行頭顱MRI檢查發(fā)現(xiàn)有19例頭顱MRI顯示不同程度的缺氧缺血性改變（HIE組），56例頭顱MRI示正常（MRI正常組）。出生后1、3、7 d，HIE組新生兒血清NSE濃度逐漸升高，而MRI正常組新生兒血清NSE濃度逐漸下降；出生后各時間點HIE組新生兒血清NSE濃度均明顯高于MRI正常組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表3）。

表3 窒息新生兒血清NSE濃度動態(tài)變化與HIE的關(guān)系（μg/L，x±s）

3 討論

新生兒窒息常見的嚴(yán)重后果是出現(xiàn)窒息后腦損傷，對新生兒機(jī)體影響巨大，可導(dǎo)致智力發(fā)育落后、腦癱、癲癇等神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，嚴(yán)重影響兒童生存質(zhì)量[5-6]。但目前尚無相對完善的診斷標(biāo)準(zhǔn)，僅僅依靠病史及臨床表現(xiàn)往往不能做出準(zhǔn)確的診斷，容易錯過最佳的治療時機(jī)，并且病史及臨床表現(xiàn)不能對預(yù)后做出相對準(zhǔn)確的判斷和預(yù)測。目前通過腦電圖及神經(jīng)評定等檢查手段可對預(yù)后作出相應(yīng)的預(yù)測，但結(jié)果易受患兒自身精神及身體健康狀況的影響，無法做到客觀評價[7]。

NSE由人類ENO2基因編碼，具有糖酵解同工酶作用，是糖酵解途徑關(guān)鍵酶，特異性定位于神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞中，在糖酵解過程中催化2-磷酸甘油酸與磷酸烯醇式丙酮酸互相轉(zhuǎn)化。NSE與神經(jīng)細(xì)胞分化及成熟有關(guān)，可保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞免受缺氧損害[8]，當(dāng)神經(jīng)元損傷或壞死后，NSE 從細(xì)胞內(nèi)溢入腦脊液和血液中，是檢測腦神經(jīng)元壞死的客觀指標(biāo)[9]，且腦脊液和血清NSE水平呈正相關(guān)。近年有研究表明，NSE在腦損傷的診斷和預(yù)后方面具有重要意義，可用來判斷腦卒中、腦外傷[10]、缺氧性腦病、腦炎、腫瘤腦轉(zhuǎn)移和癲癇持續(xù)狀態(tài)等神經(jīng)損傷嚴(yán)重程度及預(yù)后[11]，且NSE升高程度與腦損傷程度呈正相關(guān)[12]。

本研究中發(fā)現(xiàn)血清NSE濃度水平在窒息新生兒出生后各時間點均明顯高于正常新生兒，表明新生兒窒息后存在不同程度腦缺氧缺血所致的神經(jīng)細(xì)胞損傷。本研究中輕度窒息新生兒的血清NSE濃度逐漸下降，而重度窒息新生兒則逐漸升高，說明了新生兒腦缺氧缺血后神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生損傷是一個連續(xù)的過程，NSE可能參與了此病理過程，且與窒息的嚴(yán)重程度密切相關(guān)，而重度窒息新生兒合并HIE的風(fēng)險可能更高。有研究發(fā)現(xiàn)，新生兒圍生期窒息引起的腦損傷病理變化是一個動態(tài)過程，在生后3 d內(nèi)以腦水腫表現(xiàn)為主，而4~7 d則表現(xiàn)為腦實質(zhì)壞死缺氧缺血性損害[13]，故本研究顯示輕度窒息組新生兒3 d時NSE濃度逐漸下降，到7 d時基本降至正常，而重度窒息組新生兒3 d時NSE濃度逐漸升高，到7 d時更高。本研究結(jié)果顯示HIE組出生后1 d時血清NSE濃度水平已經(jīng)明顯高于MRI正常組，且之后HIE組血清NSE濃度逐漸升高，而MRI正常組的血清NSE濃度逐漸下降，提示圍生期監(jiān)測血清NSE濃度能預(yù)測HIE的發(fā)生，同時亦可以反映新生兒窒息缺氧時神經(jīng)元損害程度，對判斷窒息新生兒HIE的發(fā)生及預(yù)后有一定參考意義。

綜上所述，監(jiān)測血清NSE濃度動態(tài)變化有助于早期輔助判斷窒息新生兒HIE，在對患兒進(jìn)行早期腦保護(hù)干預(yù)性治療、降低神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥方面具有廣闊的應(yīng)用前景。

[參考文獻(xiàn)]

[1]Shankaran S，Barnes PD，Hintz SR，et al.Brain injuryfollowing trialof hypothermia for neonatal hypoxic-ischaemic encephalopathy[J].Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed，2012， 97（6）：F398-F404.

[2]Nagdyman N，GrimmerI，Scholz T，et al.Predictive value of brainspecific proteins in serum for neurodevelopmental outcom after birth asphyxia[J].Pediatr Res，2003，54（2）：270-275.

[3]黃會芝.血液中NSE水平的檢測在新生兒腦損傷中的應(yīng)用[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志，2011，19（9）：3-4.

[4]楊嘉琛，朱緒亮，李海珍.窒息新生兒腦干聽覺誘發(fā)電位與血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶的相關(guān)性分析[J].中國當(dāng)代兒科雜志，2008，10（6）：697-700.

[5]牛廷獻(xiàn)，史志勇，羅建軍，等.缺血缺氧腦損傷大鼠NSE和S-100B蛋白的變化及其臨床意義[J].中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2009，19（9）；34-37，封2.

[6]蔡娜莉，付亞林.NSE和S-100B蛋白的檢測在判斷新生兒腦損傷預(yù)后中的臨床應(yīng)用價值[J].中國婦幼保健，2012， 27（22）：3512-3514.

[7]Oygür N，S?nmez O，Saka O，et al.Predictive value of plasma and cerebrospinal fluid tumour necrosis factor-alpha and interleukin-1 beta concentrations on outcome of full term infants with hypoxic-ischaemic encephalopathy[J].Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed，1998，79（3）：F190-193.

[8]Bi Y，Chen JJ， Li Y，et al.The role of CYP2E1 in the protection of garlic oil′s from n-hexane-induced neurotoxicity[J].Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi，2011， 29（11）：825-833.

[9]顏鵬飛.新生兒缺氧缺血性腦病48例臨床分析[J].中華全科醫(yī)學(xué)，2008，6（9）：945-946.

[10]Alam JM，Baig JA，Mahmood SR，et al.Diagnostic utility of neuron specific （NSE） in serum and pleural fluids from patients with lung cancer and tuberculosis[J].Pak J Biochem，2010，43（3）：873-875.

[11]Goodman MD，Makley AT，Huber NL，et al.Hypobaric hypoxia exacerbates the neuroinflammatory response to traumatic brain injury[J].J Surg Ret，2011，165（1）：30-37.

[12]Berger RP，Bazaco MC，Wagner AK，et al.Trajectory analysis of serum biomarker concentrations facilitates outcome prediction after pediatric traumatic and hypoxemic brain injury[J].Dev Neurosci，2010，32（5-6）：396-405.

[13]何利珍，余斌偉，徐尚敖.急性創(chuàng)傷性腦損傷患者初期血清NSE含量及判斷限值的探討[J].放射免疫學(xué)雜志，2010，23（3）：344-347.

（收稿日期：2014-04-18本文編輯：郭靜娟）

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2012年1月～2014年1月在本院住院治療的足月窒息新生兒75例（窒息組），出生時均有窒息史，均符合第7版《實用兒科學(xué)》新生兒窒息的診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中男40例，女35例，胎齡（39.0±0.7）周；出生時體重（2.8±0.36） kg；輕度窒息（1 min Apgar評分4～7分）48例，重度窒息（1 min Apgar評分0～3分）27例。另選擇同期健康足月新生兒50例（對照組），男26例，女24例，胎齡（38±1）周；出生時體重（3.0±0.25） kg。兩組新生兒均排除產(chǎn)傷、先天性畸形、先天代謝性疾病、腫瘤、嚴(yán)重感染等。兩組性別、年齡、體重及孕周等差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 血清NSE濃度檢測

對兩組新生兒分別于出生后1、3、7 d時采集外周靜脈血2 ml，在室溫下，以3000 r/min離心15 min（離心半徑13.5 cm），分離血清，置-20℃冰箱保存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測血清NSE水平，試劑盒購自天津市協(xié)和醫(yī)藥科技有限公司，操作由專人按試劑盒說明書嚴(yán)格執(zhí)行。

1.3 HIE評價

75例窒息新生兒均于出生后7 d行頭顱MRI檢查，以評價HIE情況。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 10.0軟件處理數(shù)據(jù)，計量資料以x±s表示，采用t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組新生兒血清NSE濃度動態(tài)變化的比較

窒息組新生兒血清NSE濃度均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表1），窒息組輕度窒息新生兒血清NSE濃度逐漸下降，重度窒息新生兒血清NSE濃度逐漸升高，且重度窒息新生兒血清NSE濃度明顯高于輕度窒息新生兒，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表2）。

表1 兩組新生兒血清NSE濃度動態(tài)變化的比較（μg/L，x±s）

表2 輕度窒息組與重度窒息組新生兒血清NSE濃度動態(tài)變化的

比較（μg/L，x±s）

2.2 窒息新生兒血清NSE濃度動態(tài)變化與HIE的關(guān)系

75例窒息新生兒在出生后7 d行頭顱MRI檢查發(fā)現(xiàn)有19例頭顱MRI顯示不同程度的缺氧缺血性改變（HIE組），56例頭顱MRI示正常（MRI正常組）。出生后1、3、7 d，HIE組新生兒血清NSE濃度逐漸升高，而MRI正常組新生兒血清NSE濃度逐漸下降；出生后各時間點HIE組新生兒血清NSE濃度均明顯高于MRI正常組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表3）。

表3 窒息新生兒血清NSE濃度動態(tài)變化與HIE的關(guān)系（μg/L，x±s）

3 討論

新生兒窒息常見的嚴(yán)重后果是出現(xiàn)窒息后腦損傷，對新生兒機(jī)體影響巨大，可導(dǎo)致智力發(fā)育落后、腦癱、癲癇等神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，嚴(yán)重影響兒童生存質(zhì)量[5-6]。但目前尚無相對完善的診斷標(biāo)準(zhǔn)，僅僅依靠病史及臨床表現(xiàn)往往不能做出準(zhǔn)確的診斷，容易錯過最佳的治療時機(jī)，并且病史及臨床表現(xiàn)不能對預(yù)后做出相對準(zhǔn)確的判斷和預(yù)測。目前通過腦電圖及神經(jīng)評定等檢查手段可對預(yù)后作出相應(yīng)的預(yù)測，但結(jié)果易受患兒自身精神及身體健康狀況的影響，無法做到客觀評價[7]。

NSE由人類ENO2基因編碼，具有糖酵解同工酶作用，是糖酵解途徑關(guān)鍵酶，特異性定位于神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞中，在糖酵解過程中催化2-磷酸甘油酸與磷酸烯醇式丙酮酸互相轉(zhuǎn)化。NSE與神經(jīng)細(xì)胞分化及成熟有關(guān)，可保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞免受缺氧損害[8]，當(dāng)神經(jīng)元損傷或壞死后，NSE 從細(xì)胞內(nèi)溢入腦脊液和血液中，是檢測腦神經(jīng)元壞死的客觀指標(biāo)[9]，且腦脊液和血清NSE水平呈正相關(guān)。近年有研究表明，NSE在腦損傷的診斷和預(yù)后方面具有重要意義，可用來判斷腦卒中、腦外傷[10]、缺氧性腦病、腦炎、腫瘤腦轉(zhuǎn)移和癲癇持續(xù)狀態(tài)等神經(jīng)損傷嚴(yán)重程度及預(yù)后[11]，且NSE升高程度與腦損傷程度呈正相關(guān)[12]。

本研究中發(fā)現(xiàn)血清NSE濃度水平在窒息新生兒出生后各時間點均明顯高于正常新生兒，表明新生兒窒息后存在不同程度腦缺氧缺血所致的神經(jīng)細(xì)胞損傷。本研究中輕度窒息新生兒的血清NSE濃度逐漸下降，而重度窒息新生兒則逐漸升高，說明了新生兒腦缺氧缺血后神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生損傷是一個連續(xù)的過程，NSE可能參與了此病理過程，且與窒息的嚴(yán)重程度密切相關(guān)，而重度窒息新生兒合并HIE的風(fēng)險可能更高。有研究發(fā)現(xiàn)，新生兒圍生期窒息引起的腦損傷病理變化是一個動態(tài)過程，在生后3 d內(nèi)以腦水腫表現(xiàn)為主，而4~7 d則表現(xiàn)為腦實質(zhì)壞死缺氧缺血性損害[13]，故本研究顯示輕度窒息組新生兒3 d時NSE濃度逐漸下降，到7 d時基本降至正常，而重度窒息組新生兒3 d時NSE濃度逐漸升高，到7 d時更高。本研究結(jié)果顯示HIE組出生后1 d時血清NSE濃度水平已經(jīng)明顯高于MRI正常組，且之后HIE組血清NSE濃度逐漸升高，而MRI正常組的血清NSE濃度逐漸下降，提示圍生期監(jiān)測血清NSE濃度能預(yù)測HIE的發(fā)生，同時亦可以反映新生兒窒息缺氧時神經(jīng)元損害程度，對判斷窒息新生兒HIE的發(fā)生及預(yù)后有一定參考意義。

綜上所述，監(jiān)測血清NSE濃度動態(tài)變化有助于早期輔助判斷窒息新生兒HIE，在對患兒進(jìn)行早期腦保護(hù)干預(yù)性治療、降低神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥方面具有廣闊的應(yīng)用前景。

[參考文獻(xiàn)]

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[4]楊嘉琛，朱緒亮，李海珍.窒息新生兒腦干聽覺誘發(fā)電位與血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶的相關(guān)性分析[J].中國當(dāng)代兒科雜志，2008，10（6）：697-700.

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[6]蔡娜莉，付亞林.NSE和S-100B蛋白的檢測在判斷新生兒腦損傷預(yù)后中的臨床應(yīng)用價值[J].中國婦幼保健，2012， 27（22）：3512-3514.

[7]Oygür N，S?nmez O，Saka O，et al.Predictive value of plasma and cerebrospinal fluid tumour necrosis factor-alpha and interleukin-1 beta concentrations on outcome of full term infants with hypoxic-ischaemic encephalopathy[J].Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed，1998，79（3）：F190-193.

[8]Bi Y，Chen JJ， Li Y，et al.The role of CYP2E1 in the protection of garlic oil′s from n-hexane-induced neurotoxicity[J].Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi，2011， 29（11）：825-833.

[9]顏鵬飛.新生兒缺氧缺血性腦病48例臨床分析[J].中華全科醫(yī)學(xué)，2008，6（9）：945-946.

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（收稿日期：2014-04-18本文編輯：郭靜娟）

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2012年1月～2014年1月在本院住院治療的足月窒息新生兒75例（窒息組），出生時均有窒息史，均符合第7版《實用兒科學(xué)》新生兒窒息的診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中男40例，女35例，胎齡（39.0±0.7）周；出生時體重（2.8±0.36） kg；輕度窒息（1 min Apgar評分4～7分）48例，重度窒息（1 min Apgar評分0～3分）27例。另選擇同期健康足月新生兒50例（對照組），男26例，女24例，胎齡（38±1）周；出生時體重（3.0±0.25） kg。兩組新生兒均排除產(chǎn)傷、先天性畸形、先天代謝性疾病、腫瘤、嚴(yán)重感染等。兩組性別、年齡、體重及孕周等差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 血清NSE濃度檢測

對兩組新生兒分別于出生后1、3、7 d時采集外周靜脈血2 ml，在室溫下，以3000 r/min離心15 min（離心半徑13.5 cm），分離血清，置-20℃冰箱保存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測血清NSE水平，試劑盒購自天津市協(xié)和醫(yī)藥科技有限公司，操作由專人按試劑盒說明書嚴(yán)格執(zhí)行。

1.3 HIE評價

75例窒息新生兒均于出生后7 d行頭顱MRI檢查，以評價HIE情況。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 10.0軟件處理數(shù)據(jù)，計量資料以x±s表示，采用t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組新生兒血清NSE濃度動態(tài)變化的比較

窒息組新生兒血清NSE濃度均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表1），窒息組輕度窒息新生兒血清NSE濃度逐漸下降，重度窒息新生兒血清NSE濃度逐漸升高，且重度窒息新生兒血清NSE濃度明顯高于輕度窒息新生兒，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表2）。

表1 兩組新生兒血清NSE濃度動態(tài)變化的比較（μg/L，x±s）

表2 輕度窒息組與重度窒息組新生兒血清NSE濃度動態(tài)變化的

比較（μg/L，x±s）

2.2 窒息新生兒血清NSE濃度動態(tài)變化與HIE的關(guān)系

75例窒息新生兒在出生后7 d行頭顱MRI檢查發(fā)現(xiàn)有19例頭顱MRI顯示不同程度的缺氧缺血性改變（HIE組），56例頭顱MRI示正常（MRI正常組）。出生后1、3、7 d，HIE組新生兒血清NSE濃度逐漸升高，而MRI正常組新生兒血清NSE濃度逐漸下降；出生后各時間點HIE組新生兒血清NSE濃度均明顯高于MRI正常組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表3）。

表3 窒息新生兒血清NSE濃度動態(tài)變化與HIE的關(guān)系（μg/L，x±s）

3 討論

新生兒窒息常見的嚴(yán)重后果是出現(xiàn)窒息后腦損傷，對新生兒機(jī)體影響巨大，可導(dǎo)致智力發(fā)育落后、腦癱、癲癇等神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，嚴(yán)重影響兒童生存質(zhì)量[5-6]。但目前尚無相對完善的診斷標(biāo)準(zhǔn)，僅僅依靠病史及臨床表現(xiàn)往往不能做出準(zhǔn)確的診斷，容易錯過最佳的治療時機(jī)，并且病史及臨床表現(xiàn)不能對預(yù)后做出相對準(zhǔn)確的判斷和預(yù)測。目前通過腦電圖及神經(jīng)評定等檢查手段可對預(yù)后作出相應(yīng)的預(yù)測，但結(jié)果易受患兒自身精神及身體健康狀況的影響，無法做到客觀評價[7]。

NSE由人類ENO2基因編碼，具有糖酵解同工酶作用，是糖酵解途徑關(guān)鍵酶，特異性定位于神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞中，在糖酵解過程中催化2-磷酸甘油酸與磷酸烯醇式丙酮酸互相轉(zhuǎn)化。NSE與神經(jīng)細(xì)胞分化及成熟有關(guān)，可保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞免受缺氧損害[8]，當(dāng)神經(jīng)元損傷或壞死后，NSE 從細(xì)胞內(nèi)溢入腦脊液和血液中，是檢測腦神經(jīng)元壞死的客觀指標(biāo)[9]，且腦脊液和血清NSE水平呈正相關(guān)。近年有研究表明，NSE在腦損傷的診斷和預(yù)后方面具有重要意義，可用來判斷腦卒中、腦外傷[10]、缺氧性腦病、腦炎、腫瘤腦轉(zhuǎn)移和癲癇持續(xù)狀態(tài)等神經(jīng)損傷嚴(yán)重程度及預(yù)后[11]，且NSE升高程度與腦損傷程度呈正相關(guān)[12]。

本研究中發(fā)現(xiàn)血清NSE濃度水平在窒息新生兒出生后各時間點均明顯高于正常新生兒，表明新生兒窒息后存在不同程度腦缺氧缺血所致的神經(jīng)細(xì)胞損傷。本研究中輕度窒息新生兒的血清NSE濃度逐漸下降，而重度窒息新生兒則逐漸升高，說明了新生兒腦缺氧缺血后神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生損傷是一個連續(xù)的過程，NSE可能參與了此病理過程，且與窒息的嚴(yán)重程度密切相關(guān)，而重度窒息新生兒合并HIE的風(fēng)險可能更高。有研究發(fā)現(xiàn)，新生兒圍生期窒息引起的腦損傷病理變化是一個動態(tài)過程，在生后3 d內(nèi)以腦水腫表現(xiàn)為主，而4~7 d則表現(xiàn)為腦實質(zhì)壞死缺氧缺血性損害[13]，故本研究顯示輕度窒息組新生兒3 d時NSE濃度逐漸下降，到7 d時基本降至正常，而重度窒息組新生兒3 d時NSE濃度逐漸升高，到7 d時更高。本研究結(jié)果顯示HIE組出生后1 d時血清NSE濃度水平已經(jīng)明顯高于MRI正常組，且之后HIE組血清NSE濃度逐漸升高，而MRI正常組的血清NSE濃度逐漸下降，提示圍生期監(jiān)測血清NSE濃度能預(yù)測HIE的發(fā)生，同時亦可以反映新生兒窒息缺氧時神經(jīng)元損害程度，對判斷窒息新生兒HIE的發(fā)生及預(yù)后有一定參考意義。

綜上所述，監(jiān)測血清NSE濃度動態(tài)變化有助于早期輔助判斷窒息新生兒HIE，在對患兒進(jìn)行早期腦保護(hù)干預(yù)性治療、降低神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥方面具有廣闊的應(yīng)用前景。

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（收稿日期：2014-04-18本文編輯：郭靜娟）