王雪丹，王培培，孫健，張勇，劉鳳麗，洪穎

（1.河北工程大學(xué)醫(yī)學(xué)院護(hù)理系，河北邯鄲067000；2.南京市鼓樓醫(yī)院婦產(chǎn)科，江蘇南京210000）

植物性雌激素對(duì)子宮肌瘤模型大鼠血清NOS、TNF-α、IL-2水平及子宮平滑肌厚度的影響研究

王雪丹1，王培培1，孫健1，張勇1，劉鳳麗1，洪穎2

（1.河北工程大學(xué)醫(yī)學(xué)院護(hù)理系，河北邯鄲067000；2.南京市鼓樓醫(yī)院婦產(chǎn)科，江蘇南京210000）

目的探究植物性雌激素對(duì)子宮肌瘤模型大鼠血清NOS、TNF-α、IL-2水平及子宮平滑肌厚度的影響。方法選取74只Wistar大鼠，采用腹腔注射苯甲酸雌二醇建立子宮肌瘤大鼠模型，隨機(jī)分為2組。實(shí)驗(yàn)組36例，灌胃給予植物性雌激素依普黃酮溶液，對(duì)照組38例，灌胃給予非植物性雌激素結(jié)合雌激素溶液。治療2周后，檢測(cè)并比較2組大鼠血清NOS、TNF-α及IL-2水平。結(jié)果治療后，對(duì)照組大鼠血清NOS、TNF-α水均較治療前顯著降低（P＜0.05），實(shí)驗(yàn)組大鼠血清NOS、TNF-α水平較治療前顯著升高（P＜0.05），治療后實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組顯著升高（P＜0.05）。治療后，對(duì)照組大鼠IL-2水平較治療前顯著升高（P＜0.05）；實(shí)驗(yàn)組大鼠IL-2水平較治療前顯著下降（P＜0.05）。治療后，對(duì)照組大鼠子宮平滑肌厚度較治療前顯著減少（P＜0.05）；實(shí)驗(yàn)組大鼠子宮平滑肌厚度較治療前顯著增加（P＜0.05）；且實(shí)驗(yàn)組大鼠平滑肌厚度顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。結(jié)論植物性雌激素可升高子宮肌瘤模型大鼠血清NOS、TNF-α含量、降低血清IL-2水平，對(duì)大鼠子宮平滑肌有顯著的增厚作用，是加重子宮肌瘤模型大鼠病情的藥物，不適用于子宮肌瘤患者的治療，臨床應(yīng)對(duì)該藥物的使用進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)管。

植物性雌激素；子宮肌瘤；血清NOS；血清TNF-α；血清IL-2；大鼠子宮平滑肌厚度

子宮肌瘤，是指由于細(xì)胞突變、激素刺激等多種原因?qū)е屡宰訉m平滑肌細(xì)胞增生，引起局部纖維組織化、子宮壁變厚，是女性較為常見的一種良性腫瘤。一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）途徑參與血管新生，腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和白介素-2（interleukin-2，IL-2）與子宮肌瘤形成與發(fā)展關(guān)系密切。臨床表現(xiàn)為子宮出血、貧血、小腹疼痛、白帶增多、小腹隆起伴包塊，嚴(yán)重者可導(dǎo)致不孕。有關(guān)數(shù)據(jù)顯示［1-2］，每年有3600萬(wàn)女性患者患子宮肌瘤，且呈逐年增加趨勢(shì)?；甲訉m肌瘤后，部分患者采取保守口服藥物治療，但其品種繁雜，效果不一，為了提高藥物治療的療效、減輕部分藥物為患者帶來(lái)的不良影響，許多專家學(xué)者對(duì)子宮肌瘤的治療藥物進(jìn)行了大量研究。有關(guān)研究顯示［3-4］，植物性雌激素可與雌激素受體結(jié)合，從而減弱靶細(xì)胞對(duì)雌激素的應(yīng)答，起到雌激素抵抗作用。雌激素過(guò)多是引起子宮肌瘤的主要因素。且有報(bào)道顯示其治療效果與疾病類型有關(guān)，用藥不當(dāng)可導(dǎo)致病情惡化［5］。本文旨在通過(guò)檢測(cè)子宮肌瘤模型大鼠血清NOS、TNF-α、IL-2水平及子宮平滑肌厚度，以進(jìn)一步探究植物性雌激素對(duì)子宮肌瘤的治療效果。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：選取74只健康成年清潔級(jí)雌性Wistar大鼠（上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)有限公司，合格證號(hào)：Q／BKJS2_ 92），體質(zhì)量219～253 g，大鼠飼養(yǎng)溫度在18～26℃，相對(duì)濕度40%～70%，暗光環(huán)境飼養(yǎng)。采用隨機(jī)數(shù)字表法，將其分為2組。實(shí)驗(yàn)組36例，對(duì)照組38例。參照《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》［6］。2組大鼠體質(zhì)量、飼養(yǎng)方式等一般資料相仿，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.1.2 主要試劑：植物性雌激素依普黃酮，由上海信誼天平藥業(yè)有限公司生產(chǎn)（國(guó)藥準(zhǔn)字H20041836）；非植物性雌激素結(jié)合雌激素片，由新疆新姿源生物制藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)（國(guó)藥準(zhǔn)字H20090165）；雌、孕激素負(fù)荷法子宮肌瘤模型構(gòu)建藥物：苯甲酸雌二醇注射液，由廣州白云山明興制藥有限公司生產(chǎn)（國(guó)藥準(zhǔn)字H44023822）；黃體酮注射液，由天津金耀氨基酸有限公司生產(chǎn)（國(guó)藥準(zhǔn)字H12020534）。

1.2 方法

1.2.1 模型制備：參照《雌、孕激素負(fù)荷子宮肌瘤大鼠模型制備法》［7］，對(duì)74只健康成年清潔級(jí)雌性Wistar大鼠進(jìn)行一般飼養(yǎng)，在溫度、濕度等環(huán)境適宜的情況下，飼養(yǎng)1周。待大鼠適應(yīng)環(huán)境，體內(nèi)各項(xiàng)激素基本穩(wěn)定后，腹腔注射苯甲酸雌二醇0.2 mg及黃體酮1mg，連續(xù)7 d，制備子宮肌瘤的大鼠模型。

1.2.2 分組給藥：將子宮肌瘤模型大鼠隨機(jī)分為2組，實(shí)驗(yàn)組36例，灌胃給予植物性雌激素依普黃酮0.167 g／（mL·d），2周為1個(gè)療程；對(duì)照組38例，灌胃給予非植物性雌激素結(jié)合雌激素片〔0.167 g／（mL·d）〕。均取0.5 g溶于3mL生理鹽水中，2周為1個(gè)療程。

1.2.3 指標(biāo)檢測(cè)：治療前后，大鼠采血2 mL，3000 r／min離心10min，選取上層澄清血清，于－65℃保溫箱，備用。取大鼠子宮組織浸于福爾馬林中備用。采用上海建成生物科技有限公司NOS、TNF-α及IL-2試劑盒，嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作，檢測(cè)2組大鼠血清NOS、TNF-α及IL-2水平。使用100倍顯微鏡（奧林巴斯，日本，SH1032J）對(duì)大鼠子宮組織進(jìn)行觀測(cè)，測(cè)量子宮內(nèi)膜厚度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 18.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，正態(tài)計(jì)量數(shù)據(jù)以±s”表示計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組大鼠治療前后血清NOS、TNF-α、IL-2水平比較治療后，對(duì)照組大鼠血清NOS、TNF-α、IL-2水平均較治療前有所下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；治療后，實(shí)驗(yàn)組大鼠血清NOS、TNF-α、IL-2水平較治療前顯著升高（P＜0.05）；且治療后實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組顯著升高（P＜0.05，見表1）。

表1 2組大鼠治療前后血清NOS、TNF-α水平比較Tab.1 Comparison of serum NOS，TNF-αlevels before and after treatment between two groups

2.2 比較2組大鼠治療前后血清IL-2水平 治療后，對(duì)照組大鼠IL-2水平較治療前顯著所升高（P＜0.05）；實(shí)驗(yàn)組大鼠IL-2水平較治療前顯著下降（P＜0.05）；且實(shí)驗(yàn)組大鼠血清IL-2水平顯著低于對(duì)照組（P＜0.05，見表2）。

表2 2組大鼠治療前后血清IL-2水平情況比較Tab.2 Comparison of serum IL-2 levels before and after treatment between two groups

2.3 2組大鼠治療前后子宮平滑肌厚度比較 治療后，對(duì)照組大鼠子宮平滑肌厚度較治療前顯著減少（P＜0.05）；實(shí)驗(yàn)組大鼠子宮平滑肌厚度較治療前顯著增加（P＜0.05）；且實(shí)驗(yàn)組大鼠平滑肌厚度顯著厚于對(duì)照組（P＜0.05，見表3）。

表3 2組大鼠治療前后子宮平滑肌厚度情況Tab.3 Comparison of uterine smooth muscle thickness before and after treatment between two groups

3 討論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：治療后，對(duì)照組大鼠血清NOS、TNF-α水平均較治療前有所下降，實(shí)驗(yàn)組大鼠血清NOS、TNF-α水平較治療前顯著升高，且治療后實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。王培培等［8］對(duì)19例子宮肌瘤大鼠模型進(jìn)行了相關(guān)研究，發(fā)現(xiàn)大鼠血清NOS水平較正常大鼠顯著升高，與本文結(jié)果一致。血清一氧化氮合酶（NOS）是參與血管新生的主要物質(zhì)，其含量升高則說(shuō)明體內(nèi)有組織增生，經(jīng)植物性雌激素治療后，血清NOS水平呈升高趨勢(shì)，從而促進(jìn)子宮平滑肌血管增生，加快腫瘤的形成。易忠勝等［9］對(duì)28例子宮肌瘤大鼠模型進(jìn)行植物性雌激素治療的相關(guān)研究，發(fā)現(xiàn)經(jīng)治療后大鼠血清TNF-α水平顯著升高，說(shuō)明腫瘤增生情況得到進(jìn)一步惡化，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致，說(shuō)明植物性雌激素對(duì)子宮肌瘤大鼠的病情有加重傾向。治療后，對(duì)照組大鼠IL-2水平較治療前有所升高；實(shí)驗(yàn)組大鼠IL-2水平較治療前顯著下降；且實(shí)驗(yàn)組大鼠血清IL-2水平顯著低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。吉梅等［10］對(duì)37例子宮肌瘤大鼠模型進(jìn)行治療，結(jié)果顯示經(jīng)植物性雌激素治療后，IL-2水平顯著降低，說(shuō)明機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)異常增多的平滑肌細(xì)胞的清除能力下降，植物性雌激素降低了大鼠體內(nèi)自身免疫功能，增加了子宮內(nèi)膜厚度，加重了子宮肌瘤的發(fā)展。治療后，對(duì)照組大鼠子宮平滑肌厚度較治療前有所減少；實(shí)驗(yàn)組大鼠子宮平滑肌厚度較治療前有所增加；且實(shí)驗(yàn)組大鼠平滑肌厚度顯著厚于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），奚劍敏等［11］對(duì)48例子宮肌瘤模型大鼠進(jìn)行藥物治療后，對(duì)其子宮內(nèi)膜厚度進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)經(jīng)植物性雌激素治療后，大鼠子宮內(nèi)膜厚度顯著增厚，平滑肌細(xì)胞異常增生情況嚴(yán)重，且對(duì)機(jī)體自身免疫系統(tǒng)產(chǎn)生了抑制作用，是加重子宮肌瘤模型大鼠病情的重要因素。

綜上所述，植物性雌激素可顯著升高子宮肌瘤模型大鼠血清NOS、TNF-α含量、降低血清IL-2水平，對(duì)大鼠子宮平滑肌有顯著的增厚作用，是加重子宮肌瘤模型大鼠病情的藥物，不適用于子宮肌瘤患者的治療，臨床應(yīng)對(duì)該藥物的使用進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)管。

［1］ 張祖威，姚書忠.子宮肌瘤的治療新進(jìn)展［J］.中山大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)科學(xué)版），2009，30（3S）：212-215.

［2］ 謝建軍，李健和，易利丹，等.子宮肌瘤的發(fā)病機(jī)制與藥物治療［J］.中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2011，08：16-18.

［3］ 朱蘭.子宮肌瘤的非手術(shù)治療［J］.國(guó)際婦產(chǎn)科學(xué)雜志，2010，37（3）：147-150.

［4］ 許苗.子宮肌瘤中細(xì)胞凋亡基因表達(dá)及其藥物治療的研究進(jìn)展［J］.醫(yī)學(xué)綜述，2012，18（7）：973-976.

［5］ 張素娥.子宮肌瘤的研究進(jìn)展［J］.河北醫(yī)藥，2013，35（6）：920-921.

［6］ 楊曉琴.關(guān)于婦科子宮肌瘤的藥物治療臨床探究［J］.健康之路，2014，（4）：131-131.

［7］ 李傳菊.80例子宮肌瘤藥物治療的臨床分析［J］.中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2011，8（6）：52-53.

［8］ 王培培，王雪丹，張勇，等.植物性雌激素對(duì)子宮肌瘤模型大鼠血清中E2、P及EGF的影響［J］.衛(wèi)生職業(yè)教育，2013，（22）：81-81，82.

［9］ 易忠勝，莫凌云，劉紅艷，等.植物性雌激素與雌激素受體作用的對(duì)接研究［C］.／／第六屆全國(guó)環(huán)境化學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集. 2011：1097.

［10］ 吉梅，陳超，林流芳，等.植物性雌激素對(duì)子宮內(nèi)膜及異位子宮內(nèi)膜的影響［J］.生殖與避孕，2012，32（3）：185-189.

［11］奚劍敏，丁正香.子宮肌瘤大鼠模型的病理改變及病因分析［J］.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2010，10（3）：466-469.

（編校：吳茜）

Study effect of phytoestrogens on serum NOS，TNF-α，IL-2 levels and thickness of uterine smooth muscle in uterine fibroidsmodel rats

WANG Xue-dan1，WANG Pei-pei1，SUN Jian1，ZHANG Yong1，LIU Feng-li1，HONG Ying2

（1.Department of Nursing，Hebei University of Engineering，Handan 067000，China；2.Department of Obstetrics and Gynecology，Nanjing City Drum Tower hospital，Nanjing 210000，China）

ObjectiveTo explore the effect of plant-based androgens on serum nitric oxide synthase，tumor necrosis factor-α，interleukin-2 levels and the thickness of uterine smooth muscle in uterinemyomamodel rats.Methods74Wistar rats were used to established the ratmodel with estrogen and progesterone and randomly divided into two groups.Experimental group had 36 cases，which were given phytoestrogens in accordance with the general flavone 0.167 g／（mL·d），for two weeks；control group had 38 cases，which were given plant estrogen premarin 0.167 g／（mL·d）for two weeks.The levels of rats serum NOS，TNF-αand IL-2 between two groups were detected and compared.ResultsAfter treatment，rats serum NOS，TNF-αlevel in control group was decreased significantly（P＜0.05），while in experimental group increased significantly（P＜0.05），and the difference between two groupswas significant（P＜0.05）.After treatment，rats serum IL-2 level in control group was increased significantly（P＜0.05），while in experimental group decreased significantly（P＜0.05），and the difference between two groupswas significant（P＜0.05）.After treatment，the thickness of uterine smooth muscle in control group reduced significantly（P＜0.05），while in experimental group increased significantly（P＜0.05），and the difference between two groupswas statistically significant（P＜0.05）.ConclusionPhytoestrogens can obviously increase serum NOS contentand serum TNF-αlevel，reduce serum IL-2 level and thicken uterine smoothmuscle of rat in uterusmyomamodel rats.It can aggravate the uterine fibroids of rats，not suitable for the treatment of patients with uterine fibroids，and should be strictly regulated in clinical response.

phytoestrogens；uterine fibroids；serum NOS；serum TNF-α；serum IL-2；rat uterine smooth muscle thickness

G424.31

A

1005－1678（2014）09－0137－03

江蘇省衛(wèi)生廳項(xiàng)目（H200803）

王雪丹，女，本科，實(shí)驗(yàn)師，研究方向：神經(jīng)內(nèi)科疾病，E-mail：mswxuedan＠126.com。