唐式校

（東?？h動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，江蘇 連云港 222300）

豬霉形體肺炎，其病原為豬霉形體，是豬的一種接觸性、慢性呼吸道疾病。世界上絕大多數(shù)豬場(chǎng)都一定程度地受到該病的困擾。本研究選用土霉素油劑、慶大霉素、紅霉素、鏈霉素四種抗生素進(jìn)行藥敏試驗(yàn)和治療效果的比較試驗(yàn)，以便選出最佳藥物。

1 發(fā)病情況

2014年1月12～19日，江蘇省東?？h某規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)300多頭仔豬相繼表現(xiàn)出咳嗽、氣喘和腹式呼吸癥狀。仔豬體重為16～24kg，剛從外地購(gòu)入不久。豬舍潮濕、擁擠、通風(fēng)不良。

2 臨床癥狀

主要癥狀為咳嗽、氣喘。在早、晚或夜間突然驅(qū)趕，癥狀明顯。病初輕咳，精神萎靡不振，頭下垂，喜獨(dú)立一隅或趴伏在圈舍一角，呼吸頻率加快，達(dá)60～115次/min，輕咳，繼而痙攣性痛咳。患病中期出現(xiàn)呼吸困難、急促喘氣，腹式呼吸，80～100次/min；后期呼吸深而慢，張口呼吸，站立或犬坐喘嗚聲明顯，呈明顯腹式呼吸。間歇性咳嗽音低而沉，偶見痙攣性陣咳。后期感染者在清晨或被迫運(yùn)動(dòng)，以及吃食和氣候驟變時(shí)，出現(xiàn)連續(xù)的痙攣性咳嗽，努背拱腰、伸頸。若繼發(fā)感染其他疾病時(shí)，體溫可升高。最終窒息死亡。慢性病程可達(dá)2～3個(gè)月以上，開始食欲變化不明顯，隨病程加重，減食或不食。身體瘦弱，生長(zhǎng)發(fā)育停滯。

3 病理剖檢

隨機(jī)選取幾頭發(fā)病豬進(jìn)行病理剖解，病變主要見于肺、肺門淋巴結(jié)和縱膈淋巴結(jié)。胸腔液增多，肺有不同程度的水腫和氣腫，心葉、尖葉、中間葉及部分病例的膈葉前緣可見融合性支氣管肺炎病灶，以心葉最為顯著，尖葉和中間葉次之，然后波及到膈葉。兩側(cè)病理變化大致對(duì)稱，病變部顏色多為淡紅色或灰紅色，半透明狀，界限明顯，如鮮嫩的肌肉，俗稱“肉變”。隨著病程延長(zhǎng)或病情加重，病理變化部顏色轉(zhuǎn)為淺紅色、灰白色或灰紅，半透明狀態(tài)程度減輕，俗稱“胰變”或“蝦肉樣變”。肺門和膈淋巴結(jié)明顯腫大，呈灰白色，切面外翻、濕潤(rùn)、邊緣充血。繼發(fā)感染細(xì)菌時(shí)，引起肺和胸膜的纖維素性、化膿性和壞死性病理變化，還可見其他臟器的病理變化。肝臟體積腫大，邊緣鈍圓，色澤灰黃，渾濁無光澤，質(zhì)地較軟脆，結(jié)構(gòu)較為模糊。脾臟、腎臟亦可見腫大。

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

取肺尖葉病變部位涂片，固定后用姬姆薩氏液染色3h以上，油鏡下觀察可見大量紫色、球狀、球桿狀、棒狀及輪狀等多形態(tài)的微生物。

5 藥敏試驗(yàn)

5.1 霉形體分離培養(yǎng)

用棉拭子沾取剖解病豬的肺臟或氣管分泌物、滲出物，立即接種在A26液體培養(yǎng)基中（表1）進(jìn)行初代分離。將培養(yǎng)基置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。初代分離時(shí)每經(jīng)3～5d，以20%的接種量連續(xù)進(jìn)行移植[1]，4代后進(jìn)行復(fù)代分離。此時(shí)按1∶10接種，37℃培養(yǎng)，當(dāng)培養(yǎng)液的pH由7.6降至6.6～6.8，即菌液顏色由紅色變?yōu)辄S色，且呈均一渾濁狀態(tài)、無沉淀時(shí)即可收獲。培養(yǎng)物經(jīng)涂片，姬姆薩氏液染色3h以上，油鏡下觀察，可見大量紫色、球狀、球桿狀、棒狀及輪狀等多形態(tài)微生物，無雜菌。

表1 A26培養(yǎng)基的組分及用量

5.2 藥敏試驗(yàn)

霉形體藥敏試驗(yàn)可用瓊脂培養(yǎng)基瓊脂平板稀釋法或用液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)稀釋法，一般以液體試管雙倍釋釋法作藥物最小抑菌濃度（MIC）測(cè)定。

采用試管雙倍稀釋法[2]進(jìn)行試驗(yàn)。取48支試管分成4組，每組12支，在每組第一管加入2mL無菌培養(yǎng)基為陰性對(duì)照，每組第二管加入帶菌培養(yǎng)基1.9mL，剩余3～12管均加入lmL帶菌培養(yǎng)基，從配好的藥液（上述4種藥品配成濃度為250mg/L的原液）中取0.1mL加入第二管，充分混合搖勻后從第2管中取1mL加入第三管，依次倍比稀釋至第11管，第12管作為陽(yáng)性對(duì)照。將培養(yǎng)基放入37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。當(dāng)培養(yǎng)物顏色由桔紅色變?yōu)榈S色時(shí)，記錄發(fā)生顏色變化的管數(shù)，作為MIC結(jié)果；72h后，當(dāng)各管的培養(yǎng)物不再發(fā)生顏色變化時(shí)，記錄第二次判定結(jié)果為最小殺菌濃度（MBC）。每組4個(gè)重復(fù)，取平均值。

6 動(dòng)物治療試驗(yàn)

6.1 分組及用藥

表2 試驗(yàn)分組與處理方式 頭

從豬場(chǎng)中選取150頭發(fā)病的仔豬，隨機(jī)分成4組，每組30頭，各組均飼喂相同飼料及飲水，管理和環(huán)境條件相同，消除人為因素的影響，分別用土霉素油劑、慶大霉素、紅霉素、鏈霉素四種抗生素進(jìn)行肌肉注射，見表2。

6.2 藥效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

6.2.1 治愈率

在試驗(yàn)期間，仔豬經(jīng)給藥后，咳嗽、喘氣、腹式呼吸、口鼻流出泡沫樣液體、精神不振、不愿走動(dòng)、食欲減少等臨床癥狀消失，均屬治愈率。治愈率=每組治愈豬頭數(shù)/該試驗(yàn)豬頭數(shù)×100%

6.2.2 死亡率

6.2.3 復(fù)發(fā)率

病豬進(jìn)行治療后，咳嗽、氣喘和腹式呼吸等臨床癥狀一定時(shí)間內(nèi)消失，但經(jīng)過一段時(shí)間后，這些臨床癥狀又表現(xiàn)出來，即為復(fù)發(fā)。復(fù)發(fā)率=每組復(fù)發(fā)豬頭/該組豬頭數(shù)×100%

8 試驗(yàn)結(jié)果

8.1 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

表3 藥敏試驗(yàn)結(jié)果mg/L

表3可見，土霉素油劑MIC和MBC值最小，鏈霉素次之，其次為紅霉素，慶大霉素MIC和MBC值均較高。

8.2 臨床療效結(jié)果

表4 藥物治療效果比較 頭，%

通過表4的試驗(yàn)可以看出，土霉素油劑對(duì)治療豬霉形體肺炎效果明顯，治愈率高、死亡率少、復(fù)發(fā)率低。鏈霉素和紅霉素療效次之，而慶大霉素治療效果不理想。

[1]任家琰，馬海利.動(dòng)物病原微生物學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)科技出版社，2001:309～312.

[2]胡桂學(xué).獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2006:61.