張富全，田秀娥

(1.新疆阿克蘇地區(qū)山羊研究中心，新疆 阿克蘇 843000;2.西北農(nóng)林科技大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院，陜西 楊凌 712100)

動(dòng)物的同期發(fā)情處理是指采用激素或類激素的藥物處理，使大群母畜在特定時(shí)間內(nèi)集中發(fā)情和排卵。包括兩種技術(shù)途徑:一種是采用孕激素處理從而延長(zhǎng)黃體期，另一種是采用前列腺素類似物處理從而縮短黃體期[1～3]。用于同期發(fā)情處理的孕激素種類較多，如氟孕酮、甲孕酮、甲地孕酮、炔諾酮等[1]，其中十八甲基炔諾酮(NG)是應(yīng)用較多的一種。NG廣泛應(yīng)用于羊的同期發(fā)情處理[4～6]。在用于羊同期發(fā)情處理時(shí)多將其浸于海綿或者硅膠材料中制成陰道海綿栓或陰道栓。許多研究人員使用陰道海綿栓(浸入孕激素)對(duì)羊進(jìn)行同期發(fā)情處理和誘導(dǎo)發(fā)情處理時(shí)均取得了較好的同期發(fā)情效果和誘導(dǎo)發(fā)情效果[4～21]。NG為消旋體，即兩個(gè)鏡像異構(gòu)體 [分別稱為左旋十八甲基炔諾酮(Levonorgestrel LNG)和右旋十八甲基炔諾酮(dextronorgestrel)]的等量混合物，NG的激素活性取決于LNG，右旋構(gòu)體無(wú)生物活性。LNG主要通過(guò)反饋性調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-卵巢軸，抑制卵泡刺激激素(FSH)和黃體生成激素(LH)的分泌從而抑制排卵達(dá)到人類避孕的目的和調(diào)節(jié)動(dòng)物發(fā)情周期的目的[22]。奶山羊同期發(fā)情處理時(shí)能否使用LNG，使用多大劑量等未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。我們?cè)谝酝捎肗G制作羊用海綿栓試驗(yàn)的基礎(chǔ)上對(duì)采用不同劑量LNG制作的羊用海綿栓進(jìn)行了對(duì)比試驗(yàn)，為使用LNG制作羊用海綿栓進(jìn)行奶山羊同期發(fā)情奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物選擇及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

2013年在某奶山羊養(yǎng)殖場(chǎng)選擇膘情中等以上、無(wú)繁殖系統(tǒng)疾病、發(fā)情周期正常的108只健康奶山羊作為試驗(yàn)羊，將其隨機(jī)分為3組，每組3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)12只羊;3個(gè)試驗(yàn)組羊分別采用氯前列烯醇(PG，0.1 mg/只)+不同劑量十八甲基炔諾酮陰道海綿栓+50單位促卵泡素(FSH)進(jìn)行同期發(fā)情處理，其中試驗(yàn)1組采用NG 60 mg/枚的陰道海綿栓(處理方案1)，試驗(yàn)2組采用LNG 30 mg/枚的陰道海綿栓(處理方案2)，試驗(yàn)3組采用LNG 40 mg/枚的陰道海綿栓(處理方案3)。試驗(yàn)羊只均為常規(guī)飼養(yǎng)管理。

1.2 試驗(yàn)藥品與器械

氯前列烯醇(PG):上海市計(jì)劃生育研究所，批號(hào)111012，0.2 mg/支。促卵泡素(FSH):寧波市激素制品二廠，批號(hào)110103，100單位/支。

羊用實(shí)用型炔諾酮陰道栓(陰道海綿栓):試驗(yàn)采用的羊用陰道海綿栓均由西北農(nóng)林科技大學(xué)農(nóng)業(yè)部家畜生殖內(nèi)分泌與胚胎工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室小動(dòng)物胚胎工程第二實(shí)驗(yàn)室試制，第1種每枚含NG 60 mg(以往試驗(yàn)采用)，第2種含LNG 30 mg、第3種含LNG 40 mg，同時(shí)均匹配防腐劑、潤(rùn)滑劑、協(xié)同劑等藥劑及陰道栓專用置入器(套筒及推桿)。

1.3 試驗(yàn)羊同期發(fā)情處理

任意一天對(duì)試驗(yàn)羊只注射0.1 mg PG，第5天按試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)每組羊只放置不同海綿栓，放栓后第13天下午每只羊注射25單位FSH，第14天上午注射同樣劑量的FSH，并撤栓。撤栓后12 h開(kāi)始用公羊試情，早晚各一次，記錄每只羊的發(fā)情起止時(shí)間。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，用ANOVA進(jìn)行檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 3種不同處理方案對(duì)奶山羊發(fā)情同期率的影響

奶山羊同期發(fā)情結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 3種不同處理奶山羊的發(fā)情同期率

由表1可知，用3種不同處理方案對(duì)奶山羊進(jìn)行同期發(fā)情處理，每組羊96 h發(fā)情同期率分別為86.11%、94.44%和88.89%，以第2組最高，其次為第3組，最低的是第1組，各組間差異不顯著(P＞0.05)。三個(gè)組72 h發(fā)情同期率分別為80.53%、94.44%和88.89%，第2組顯著高于第1組(P＜0.05)，但與第3組差異不顯著(P＞0.05)。表明總體上LNG發(fā)情處理方案的效果優(yōu)于NG處理方案。分析第2、3組的發(fā)情同期率數(shù)據(jù)可知，不同劑量的LNG對(duì)奶山羊的發(fā)情同期率效果也不同，第2組即30 mg LNG劑量奶山羊96 h、72 h發(fā)情同期率均較第3組即40 mgLNG劑量組高。提示LNG處理的發(fā)情同期率效果優(yōu)于NG的處理效果，而LNG處理以30 mg處理效果優(yōu)于40 mg處理組。

2.2 3種不同處理方案對(duì)奶山羊撤栓至開(kāi)始發(fā)情間隔時(shí)間的影響

由表2可知，3種方案對(duì)奶山羊同期發(fā)情處理，試驗(yàn)羊均從處理結(jié)束后24 h開(kāi)始出現(xiàn)發(fā)情，且超過(guò)80%的羊于處理結(jié)束后48 h內(nèi)發(fā)情(3組分別為83.87%、83.36%和81.26%)，集中出現(xiàn)發(fā)情的時(shí)間各組大致相同，都在撤栓后24 h開(kāi)始發(fā)情，并且到48 h的發(fā)情數(shù)最多，各方案中分別占總發(fā)情羊數(shù)41.94%、41.18%和34.38%的羊于撤栓后48 h開(kāi)始發(fā)情，表明3種方案均可在處理結(jié)束后1 d開(kāi)始用公羊進(jìn)行試情，所有試驗(yàn)羊均表現(xiàn)出撤栓后48 h為開(kāi)始發(fā)情高峰，也是試情的高峰階段。平均間隔時(shí)間3組羊分別為45.29 h±18.99、48.35 h±15.02和42.38 h±12.19，方案2間隔時(shí)間最長(zhǎng)，而方案3最短，但差異均不顯著(P＞0.05)。這一結(jié)果表明，在對(duì)發(fā)情羊進(jìn)行試情時(shí)可從撤栓后1 d開(kāi)始，第1組羊試情天數(shù)最多，連續(xù)試3.5 d，而第2組羊試情天數(shù)均較第1組羊少0.5 d，第3組則少1 d，兩組羊均減少了試情的工作量。

表2 3種不同處理方案奶山羊撤栓至開(kāi)始發(fā)情的間隔時(shí)間

2.3 3種不同處理方案對(duì)奶山羊發(fā)情持續(xù)期的影響

由表3可知，3種方案對(duì)奶山羊同期發(fā)情處理的平均持續(xù)時(shí)間分別為30.19 h±11.95、30.71 h±8.11和 29.63 h±8.41，各組之間差異不顯著(P＞0.05)。三組羊的發(fā)情持續(xù)時(shí)間大多集中在24～36 h。但NG組的發(fā)情持續(xù)時(shí)間高峰出現(xiàn)在撤栓后24 h，隨后出現(xiàn)近乎直線下降，發(fā)情持續(xù)時(shí)間比較分散;30 mg LNG的發(fā)情持續(xù)時(shí)間以36 h居多，其次為24 h，56%的羊發(fā)情持續(xù)時(shí)間界于24 h和36 h;40 mg LNG處理的持續(xù)時(shí)間的變化趨勢(shì)與30 mg LNG組一致。表明LNG對(duì)奶山羊發(fā)情持續(xù)時(shí)間較NG處理更加集中。因此，在開(kāi)展奶山羊同期發(fā)情時(shí)，對(duì)于發(fā)情羊的試情及輸精安排可選擇使用每枚含30 mg LNG的陰道栓進(jìn)行處理，其次為40 mg LNG，最后為60 mg NG處理。

表3 3種不同處理方案奶山羊發(fā)情持續(xù)期

3 討論

同期發(fā)情的基本原理是通過(guò)調(diào)節(jié)發(fā)情周期，控制群體母畜的發(fā)情排卵在同一時(shí)期發(fā)生，一般采用延長(zhǎng)或縮短黃體期的方法，即通過(guò)孕激素抑制群體卵泡的發(fā)育和排卵，導(dǎo)致人為黃體期，或采用前列腺素類激素迅速消除黃體，人為縮短黃體期，使新的卵泡快速發(fā)育，均可達(dá)到同期發(fā)情的目的[1]。同期發(fā)情既是工廠化高效養(yǎng)羊生產(chǎn)體系中依市場(chǎng)需求調(diào)整母羊配種期和產(chǎn)羔期的關(guān)鍵技術(shù)，同時(shí)又是胚胎移植中供、受體同期化處理和人為控制母羊繁殖機(jī)能的重要技術(shù)。該項(xiàng)技術(shù)的合理運(yùn)用有利于人工授精(AI)和胚胎移植(ET)技術(shù)的實(shí)施，可以使發(fā)情、配種、分娩、斷奶等過(guò)程相對(duì)集中，從而便于大規(guī)模地畜牧生產(chǎn)和科學(xué)化的飼養(yǎng)管理，節(jié)省人力、物力、財(cái)力[16～18]。

國(guó)內(nèi)對(duì)羊的同期發(fā)情研究和推廣應(yīng)用始于20世紀(jì)80年代，采用孕激素或配合其他激素對(duì)羊進(jìn)行同期發(fā)情處理的研究報(bào)道較多，有的是單純使用孕激素，有的配合前列腺素PG，有的配合孕馬血清促性腺激素PMSG，有的配合使用FSH，還有的是配合兩種或兩種以上的激素。不同作者采用的孕激素類似物不盡一致，但不論采用那種類型的孕激素對(duì)綿羊或山羊進(jìn)行同期發(fā)情處理后，綿、山羊經(jīng)同期發(fā)情處理后發(fā)情同期率變化范圍較大，從86%到100%[2～21]。這可能與試驗(yàn)條件、激素藥物的種類與劑量以及試驗(yàn)動(dòng)物的不同有關(guān)，同時(shí)也與研究人員設(shè)定的發(fā)情同期率的計(jì)算方法有關(guān)。即便如此，上述研究人員的結(jié)果表明，綿、山羊經(jīng)處理后發(fā)情效果不錯(cuò)。本研究分別以96 h、72 h內(nèi)發(fā)情羊計(jì)算發(fā)情同期率，由試驗(yàn)數(shù)據(jù)不難發(fā)現(xiàn)，時(shí)間越長(zhǎng)，發(fā)情同期率越高。但總體上本試驗(yàn)?zāi)躺窖虻陌l(fā)情同期率基本處于上述變動(dòng)范圍，表明對(duì)奶山羊進(jìn)行同期發(fā)情可以使用含有LNG的海綿栓進(jìn)行處理。為了更全面地反映同期發(fā)情處理效果，除發(fā)情同期率指標(biāo)外，本研究還設(shè)置了其它兩個(gè)指標(biāo)，即撤栓到開(kāi)始發(fā)情間隔時(shí)間和發(fā)情持續(xù)時(shí)間，兩個(gè)指標(biāo)的設(shè)立與統(tǒng)計(jì)對(duì)在生產(chǎn)實(shí)踐中安排合理的試情時(shí)間和輸精時(shí)間有一定的指導(dǎo)意義。所以在今后對(duì)羊進(jìn)行同期發(fā)情處理時(shí)可同時(shí)分析測(cè)定三個(gè)指標(biāo)。

LNG是第二代全合成孕激素類藥物，19位甲基被取代，17位增加乙炔基，具有一定的雄激素和抗雌激素活性。它主要通過(guò)反饋性調(diào)節(jié)下丘腦—垂體—卵巢軸而調(diào)節(jié)動(dòng)物發(fā)情周期。研究人員推測(cè)LNG與NG一樣也可以用于對(duì)羊進(jìn)行同期發(fā)情處理[22]。本試驗(yàn)的研究結(jié)果證實(shí)了這一推測(cè)，即LNG完全可以替代NG用于奶山羊的同期發(fā)情處理。

4 結(jié)論

生產(chǎn)實(shí)踐中對(duì)奶山羊進(jìn)行同期發(fā)情處理時(shí)完全可以用LNG代替NG，而且每枚栓含30 mg LNG劑量較好。

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