劉慧+賀漫媚+張繼方+王偉

摘要：采用離體培養(yǎng)法，研究不同開花時間和不同貯藏方式對長春花花粉萌發(fā)率的影響。結(jié)果表明：不同開花時間的長春花花粉都保持較高的可育率，其離體培養(yǎng)萌發(fā)率保持在90%以上；常溫貯藏、5 ℃低溫貯藏和5 ℃低溫干燥貯藏3種方式間的花粉萌發(fā)率差異顯著，短時間保存宜選用5 ℃低溫貯藏，長時間保存宜選用5 ℃低溫干燥貯藏。

關(guān)鍵詞：長春花；貯藏；花粉；活力

中圖分類號：S682.01 文獻標(biāo)志碼：A

文章編號：1002-1302（2014）08-0172-02

長春花（Catharanthus roseus G. Don.）為夾竹桃科（Apocynaceae）長春花屬（Catharanthus）多年生草本植物，原產(chǎn)于南非、東部非洲及美洲熱帶，常綠直立亞灌木或多年生草本，株高30～60 cm，幼枝綠色或紅褐色，全株無毛，莖直立，多分枝，葉對生。植物花粉生命力及其貯藏特性是開花生物學(xué)特性研究中的一項重要內(nèi)容，在常規(guī)育種特別是人工輔助授粉或雜交授粉時，需要早期采集和貯藏花粉。自Hirata證實長春花具有較強生物堿研究以來^[1]，國內(nèi)外學(xué)者開始關(guān)注長春花，尤其是對長春花生物堿進行了大量的研究，此外，關(guān)于長春花的組織培養(yǎng)，國內(nèi)外研究者也開展了大量工作^[1-4]。對于長春花花粉貯藏技術(shù)方面的研究目前尚未系統(tǒng)報道。通過研究本地長春花品系白長春花（C. roseus cv. albus）、黃長春花（C. roseus cv. flavus）和進口長春花品系的農(nóng)藝性狀及其花粉在自然條件下衰敗和花粉貯藏技術(shù)，為解決長春花遠距離雜交、解決花期不遇問題奠定理論基礎(chǔ)，同時為進行長春花雜交制種、新品系的培育提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗長春花品系及其農(nóng)藝性狀調(diào)查

參試長春花品系如表1所見。2012年7月調(diào)查各品系的農(nóng)藝性狀，包括株高、花徑、株幅、花朵數(shù)及花色，利用SAS 8.0對不同品系各性狀進行Duncans檢驗。

1.2 花粉活力測定

1.2.1 測定方法 將試驗用培養(yǎng)皿洗凈晾干，和配制好的培養(yǎng)基一起消毒；消毒完成后，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，培養(yǎng)基盡量薄而均勻；自然冷卻后，用棉花棒蘸上花粉，輕彈到培養(yǎng)基上，通過顯微鏡觀察花粉的萌發(fā)情況，統(tǒng)計花粉萌發(fā)率來衡量花粉品質(zhì)及活力。花粉萌發(fā)率計算公式：花粉萌發(fā)率=目鏡視野中萌發(fā)花粉粒數(shù)/目鏡視野中花粉?？倲?shù)×100%。所有操作均在超凈工作臺上完成。

1.2.2 試驗內(nèi)容 （1）長春花不同開花時間花粉活力變化：采集本地長春花開花第1天至第7天的花朵，收集新鮮花粉進行離體培養(yǎng)，檢測花粉活力。每種花粉5個培養(yǎng)皿，每培養(yǎng)皿取3個視野進行觀察，每隔1 h進行1次花粉活力測定，直至觀察6 h，統(tǒng)計萌發(fā)率。（2）不同貯藏方式對長春花花粉活力的影響：分別將常溫貯藏、5 ℃低溫貯藏和5 ℃低溫干燥貯藏的花粉各1份，每天進行離體培養(yǎng)，直至第15天，每種花粉5個培養(yǎng)皿，每培養(yǎng)皿取3個視野進行觀察，統(tǒng)計萌發(fā)率。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同長春花品系農(nóng)藝特性調(diào)查

由表2、表3可見，除冠幅外，參試不同長春花品系的農(nóng)藝性狀之間均存在很大差異；花色種類繁多，以紅色為主；各品種的株高分布在18.38～25.12 cm之間，這與本地長春花株高差異非常大；最矮的是6號品系（Pacifica Orchid Deep），株高均值為18.38 cm，最大株高的為3號品系（Cora Punch），其株高均值為25.12 cm；不同品系間冠幅差異不顯著，其單株間存在一定差異，可能與個體的營養(yǎng)生長環(huán)境有關(guān)；不同品系間花徑差異極顯著，最小花徑為2號品系，為4.04 cm，最大花徑為4號品系， 達到5.20 cm；不同品系間花朵數(shù)差異也很大，從8.3朵到15.9朵，花朵數(shù)最多的為11號品系。

2.2 長春花不同開花時間花粉活力的變化

由圖1可見，長春花不同開花時間的花粉活力都保持在較高的水平，花粉萌發(fā)率第1天就達到最高，為99.82%，到第7天花瓣即將脫落，花粉萌發(fā)率仍保持在95%以上，不同時間花粉萌發(fā)率差異不明顯。這說明長春花從開始開花到落花，其花粉活力都保持在一個較高的水平，有較高的可育率，隨時可以收集花粉進行雜交授粉。

2.3 不同貯藏方式對長春花粉活力的影響

由圖2可見，常溫貯藏下，花粉活力隨貯藏時間的增加呈明顯下降趨勢，貯藏15 d后，花粉萌發(fā)率僅為7.56%，且花粉管明顯縮短；5 ℃低溫貯藏的花粉活力一直保持在較高水平，貯藏半個月后，其花粉活力仍達到80%以上；5 ℃低溫干燥處理4 d后的花粉，其花粉萌發(fā)率保持在50%左右，不同處理間差異較大，變化范圍在30%～70%之間，隨著貯藏時間延長，其活力變化不大。

3 小結(jié)

對15個進口長春花品系的農(nóng)藝特性進行調(diào)查，結(jié)果表明，除了冠幅外，不同品種的農(nóng)藝性狀之間均存在很大差異，尤其是不同品系花朵數(shù)差異顯著；花色種類繁多，以紅色為主。對長春花不同開花時間的花粉進行活力進行檢測，結(jié)果表明，長春花不同開花時間的花粉都保持較高的可育率，其花粉離體培養(yǎng)萌發(fā)率保持在90%以上。對不同貯藏方式的長春花花粉活力進行研究，結(jié)果表明，常溫貯藏、5 ℃低溫貯藏和5 ℃低溫干燥貯藏3種貯藏方式間花粉萌發(fā)率差異顯著，短時間保存宜選用5 ℃低溫貯藏，長時間進行長春花花粉保存，宜選用5 ℃低溫干燥貯藏。長春花干燥處理后導(dǎo)致花粉活力大大降低，這可能是由于長春花花粉活力對水分的要求相對較高所導(dǎo)致，這與絲瓜、玉米、甘薯等花粉離體萌發(fā)的研究結(jié)果^[5-7]一致，高濕度是許多植物花粉活力降低的重要因素^[7]。

低溫冷凍貯藏的溫度大概在-20～-15 ℃。一般來說，花粉冷凍貯藏比冷藏效果好，如西南樺花粉在-20 ℃下干燥貯藏效果最佳^[8]；楊傳友等發(fā)現(xiàn)12種果樹14個品種的花粉在冷凍室的貯藏效果比冷藏室好，花粉萌發(fā)率可提高7.5%～27.2%^[9]。超低溫（-80 ℃）能最大限度地抑制生理代謝強度，Knowlton第1次報道了-180 ℃貯存后的金魚草（Antrirrhinum majus）花粉仍具有生活力，降低花粉含水量能夠提高冰凍保存的生存率^[10]，目前已經(jīng)進行了30多種植物花粉的超低溫保存研究^[11]。對長春花花粉進行冷凍低溫貯藏（-5 ℃）和超低溫（-80 ℃）貯藏，結(jié)果表明，0 ℃以下低溫不利于常規(guī)處理花粉的保存，冷凍貯藏1 h即喪失活力，而對于干燥真空貯藏的花粉則能起到延長保存時間的作用。

參考文獻：

[1]Hirata K，Yamanaka A，Kurano N，et al. Production of indole alkaloids in multiple shoot culture of Catharanthus roseus（L）G. Don.[J]. Agricultural and Biological Chemistry，1987，51（5）：1311-1317.

[2]楊玉敏，元英進，胡宗定. 正交試驗法優(yōu)化長春花分化培養(yǎng)基[J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，1993，5（3）：34-37.

[3]黃 勇，郭善利，錢關(guān)澤，等. 長春花的組織培養(yǎng)與快速繁殖[J]. 植物生理學(xué)通訊，2000，36（1）：39.

[4]郭勝娟. 長春花細胞培養(yǎng)與快速繁殖的初步研究[D]. 武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2004.

[5]王少先，李普安，喬明亮. 蔬菜作物花粉生物學(xué)特性的研究——Ⅰ：絲瓜花粉的萌發(fā)特性[J]. 洛陽農(nóng)專學(xué)報，1995，2（1）：22-27.

[6]史桂榮. 玉米花粉生活力的研究[J]. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，1996（2）：13-15.

[7]王慶美，郗光輝，王大箴，等. 甘薯花粉離體萌發(fā)及不同保存方法對其生活力的影響[J]. 萊陽農(nóng)學(xué)院學(xué)報，1996，13（3）：28-31.

[8]程 偉，趙志剛，郭俊杰，等. 西南樺花粉低溫貯藏試驗初報[J]. 浙江林業(yè)科技，2007，27（6）：49-52.

[9]楊傳友，畢 杰，楊先棟. 十二種果樹花粉貯藏試驗[J]. 果樹科學(xué)，1994，11（2）：103-104.

[10]Lwanami Y. Storage in an organic solvent as a mean for preserving viability pollen grain[J]. Stain Technology，1972，47（4）：137-139.

[11]趙樹仁，武麗英，姚民昌，等. 番茄花粉超低溫保存的研究[J]. 園藝學(xué)報，1993，20（1）：66-70.

摘要：采用離體培養(yǎng)法，研究不同開花時間和不同貯藏方式對長春花花粉萌發(fā)率的影響。結(jié)果表明：不同開花時間的長春花花粉都保持較高的可育率，其離體培養(yǎng)萌發(fā)率保持在90%以上；常溫貯藏、5 ℃低溫貯藏和5 ℃低溫干燥貯藏3種方式間的花粉萌發(fā)率差異顯著，短時間保存宜選用5 ℃低溫貯藏，長時間保存宜選用5 ℃低溫干燥貯藏。

關(guān)鍵詞：長春花；貯藏；花粉；活力

中圖分類號：S682.01 文獻標(biāo)志碼：A

文章編號：1002-1302（2014）08-0172-02

長春花（Catharanthus roseus G. Don.）為夾竹桃科（Apocynaceae）長春花屬（Catharanthus）多年生草本植物，原產(chǎn)于南非、東部非洲及美洲熱帶，常綠直立亞灌木或多年生草本，株高30～60 cm，幼枝綠色或紅褐色，全株無毛，莖直立，多分枝，葉對生。植物花粉生命力及其貯藏特性是開花生物學(xué)特性研究中的一項重要內(nèi)容，在常規(guī)育種特別是人工輔助授粉或雜交授粉時，需要早期采集和貯藏花粉。自Hirata證實長春花具有較強生物堿研究以來^[1]，國內(nèi)外學(xué)者開始關(guān)注長春花，尤其是對長春花生物堿進行了大量的研究，此外，關(guān)于長春花的組織培養(yǎng)，國內(nèi)外研究者也開展了大量工作^[1-4]。對于長春花花粉貯藏技術(shù)方面的研究目前尚未系統(tǒng)報道。通過研究本地長春花品系白長春花（C. roseus cv. albus）、黃長春花（C. roseus cv. flavus）和進口長春花品系的農(nóng)藝性狀及其花粉在自然條件下衰敗和花粉貯藏技術(shù)，為解決長春花遠距離雜交、解決花期不遇問題奠定理論基礎(chǔ)，同時為進行長春花雜交制種、新品系的培育提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗長春花品系及其農(nóng)藝性狀調(diào)查

參試長春花品系如表1所見。2012年7月調(diào)查各品系的農(nóng)藝性狀，包括株高、花徑、株幅、花朵數(shù)及花色，利用SAS 8.0對不同品系各性狀進行Duncans檢驗。

1.2 花粉活力測定

1.2.1 測定方法 將試驗用培養(yǎng)皿洗凈晾干，和配制好的培養(yǎng)基一起消毒；消毒完成后，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，培養(yǎng)基盡量薄而均勻；自然冷卻后，用棉花棒蘸上花粉，輕彈到培養(yǎng)基上，通過顯微鏡觀察花粉的萌發(fā)情況，統(tǒng)計花粉萌發(fā)率來衡量花粉品質(zhì)及活力?；ǚ勖劝l(fā)率計算公式：花粉萌發(fā)率=目鏡視野中萌發(fā)花粉粒數(shù)/目鏡視野中花粉粒總數(shù)×100%。所有操作均在超凈工作臺上完成。

1.2.2 試驗內(nèi)容 （1）長春花不同開花時間花粉活力變化：采集本地長春花開花第1天至第7天的花朵，收集新鮮花粉進行離體培養(yǎng)，檢測花粉活力。每種花粉5個培養(yǎng)皿，每培養(yǎng)皿取3個視野進行觀察，每隔1 h進行1次花粉活力測定，直至觀察6 h，統(tǒng)計萌發(fā)率。（2）不同貯藏方式對長春花花粉活力的影響：分別將常溫貯藏、5 ℃低溫貯藏和5 ℃低溫干燥貯藏的花粉各1份，每天進行離體培養(yǎng)，直至第15天，每種花粉5個培養(yǎng)皿，每培養(yǎng)皿取3個視野進行觀察，統(tǒng)計萌發(fā)率。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同長春花品系農(nóng)藝特性調(diào)查

由表2、表3可見，除冠幅外，參試不同長春花品系的農(nóng)藝性狀之間均存在很大差異；花色種類繁多，以紅色為主；各品種的株高分布在18.38～25.12 cm之間，這與本地長春花株高差異非常大；最矮的是6號品系（Pacifica Orchid Deep），株高均值為18.38 cm，最大株高的為3號品系（Cora Punch），其株高均值為25.12 cm；不同品系間冠幅差異不顯著，其單株間存在一定差異，可能與個體的營養(yǎng)生長環(huán)境有關(guān)；不同品系間花徑差異極顯著，最小花徑為2號品系，為4.04 cm，最大花徑為4號品系， 達到5.20 cm；不同品系間花朵數(shù)差異也很大，從8.3朵到15.9朵，花朵數(shù)最多的為11號品系。

2.2 長春花不同開花時間花粉活力的變化

由圖1可見，長春花不同開花時間的花粉活力都保持在較高的水平，花粉萌發(fā)率第1天就達到最高，為99.82%，到第7天花瓣即將脫落，花粉萌發(fā)率仍保持在95%以上，不同時間花粉萌發(fā)率差異不明顯。這說明長春花從開始開花到落花，其花粉活力都保持在一個較高的水平，有較高的可育率，隨時可以收集花粉進行雜交授粉。

2.3 不同貯藏方式對長春花粉活力的影響

由圖2可見，常溫貯藏下，花粉活力隨貯藏時間的增加呈明顯下降趨勢，貯藏15 d后，花粉萌發(fā)率僅為7.56%，且花粉管明顯縮短；5 ℃低溫貯藏的花粉活力一直保持在較高水平，貯藏半個月后，其花粉活力仍達到80%以上；5 ℃低溫干燥處理4 d后的花粉，其花粉萌發(fā)率保持在50%左右，不同處理間差異較大，變化范圍在30%～70%之間，隨著貯藏時間延長，其活力變化不大。

3 小結(jié)

對15個進口長春花品系的農(nóng)藝特性進行調(diào)查，結(jié)果表明，除了冠幅外，不同品種的農(nóng)藝性狀之間均存在很大差異，尤其是不同品系花朵數(shù)差異顯著；花色種類繁多，以紅色為主。對長春花不同開花時間的花粉進行活力進行檢測，結(jié)果表明，長春花不同開花時間的花粉都保持較高的可育率，其花粉離體培養(yǎng)萌發(fā)率保持在90%以上。對不同貯藏方式的長春花花粉活力進行研究，結(jié)果表明，常溫貯藏、5 ℃低溫貯藏和5 ℃低溫干燥貯藏3種貯藏方式間花粉萌發(fā)率差異顯著，短時間保存宜選用5 ℃低溫貯藏，長時間進行長春花花粉保存，宜選用5 ℃低溫干燥貯藏。長春花干燥處理后導(dǎo)致花粉活力大大降低，這可能是由于長春花花粉活力對水分的要求相對較高所導(dǎo)致，這與絲瓜、玉米、甘薯等花粉離體萌發(fā)的研究結(jié)果^[5-7]一致，高濕度是許多植物花粉活力降低的重要因素^[7]。

低溫冷凍貯藏的溫度大概在-20～-15 ℃。一般來說，花粉冷凍貯藏比冷藏效果好，如西南樺花粉在-20 ℃下干燥貯藏效果最佳^[8]；楊傳友等發(fā)現(xiàn)12種果樹14個品種的花粉在冷凍室的貯藏效果比冷藏室好，花粉萌發(fā)率可提高7.5%～27.2%^[9]。超低溫（-80 ℃）能最大限度地抑制生理代謝強度，Knowlton第1次報道了-180 ℃貯存后的金魚草（Antrirrhinum majus）花粉仍具有生活力，降低花粉含水量能夠提高冰凍保存的生存率^[10]，目前已經(jīng)進行了30多種植物花粉的超低溫保存研究^[11]。對長春花花粉進行冷凍低溫貯藏（-5 ℃）和超低溫（-80 ℃）貯藏，結(jié)果表明，0 ℃以下低溫不利于常規(guī)處理花粉的保存，冷凍貯藏1 h即喪失活力，而對于干燥真空貯藏的花粉則能起到延長保存時間的作用。

參考文獻：

[1]Hirata K，Yamanaka A，Kurano N，et al. Production of indole alkaloids in multiple shoot culture of Catharanthus roseus（L）G. Don.[J]. Agricultural and Biological Chemistry，1987，51（5）：1311-1317.

[2]楊玉敏，元英進，胡宗定. 正交試驗法優(yōu)化長春花分化培養(yǎng)基[J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，1993，5（3）：34-37.

[3]黃 勇，郭善利，錢關(guān)澤，等. 長春花的組織培養(yǎng)與快速繁殖[J]. 植物生理學(xué)通訊，2000，36（1）：39.

[4]郭勝娟. 長春花細胞培養(yǎng)與快速繁殖的初步研究[D]. 武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2004.

[5]王少先，李普安，喬明亮. 蔬菜作物花粉生物學(xué)特性的研究——Ⅰ：絲瓜花粉的萌發(fā)特性[J]. 洛陽農(nóng)專學(xué)報，1995，2（1）：22-27.

[6]史桂榮. 玉米花粉生活力的研究[J]. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，1996（2）：13-15.

[7]王慶美，郗光輝，王大箴，等. 甘薯花粉離體萌發(fā)及不同保存方法對其生活力的影響[J]. 萊陽農(nóng)學(xué)院學(xué)報，1996，13（3）：28-31.

[8]程 偉，趙志剛，郭俊杰，等. 西南樺花粉低溫貯藏試驗初報[J]. 浙江林業(yè)科技，2007，27（6）：49-52.

[9]楊傳友，畢 杰，楊先棟. 十二種果樹花粉貯藏試驗[J]. 果樹科學(xué)，1994，11（2）：103-104.

[10]Lwanami Y. Storage in an organic solvent as a mean for preserving viability pollen grain[J]. Stain Technology，1972，47（4）：137-139.

[11]趙樹仁，武麗英，姚民昌，等. 番茄花粉超低溫保存的研究[J]. 園藝學(xué)報，1993，20（1）：66-70.

摘要：采用離體培養(yǎng)法，研究不同開花時間和不同貯藏方式對長春花花粉萌發(fā)率的影響。結(jié)果表明：不同開花時間的長春花花粉都保持較高的可育率，其離體培養(yǎng)萌發(fā)率保持在90%以上；常溫貯藏、5 ℃低溫貯藏和5 ℃低溫干燥貯藏3種方式間的花粉萌發(fā)率差異顯著，短時間保存宜選用5 ℃低溫貯藏，長時間保存宜選用5 ℃低溫干燥貯藏。

關(guān)鍵詞：長春花；貯藏；花粉；活力

中圖分類號：S682.01 文獻標(biāo)志碼：A

文章編號：1002-1302（2014）08-0172-02

長春花（Catharanthus roseus G. Don.）為夾竹桃科（Apocynaceae）長春花屬（Catharanthus）多年生草本植物，原產(chǎn)于南非、東部非洲及美洲熱帶，常綠直立亞灌木或多年生草本，株高30～60 cm，幼枝綠色或紅褐色，全株無毛，莖直立，多分枝，葉對生。植物花粉生命力及其貯藏特性是開花生物學(xué)特性研究中的一項重要內(nèi)容，在常規(guī)育種特別是人工輔助授粉或雜交授粉時，需要早期采集和貯藏花粉。自Hirata證實長春花具有較強生物堿研究以來^[1]，國內(nèi)外學(xué)者開始關(guān)注長春花，尤其是對長春花生物堿進行了大量的研究，此外，關(guān)于長春花的組織培養(yǎng)，國內(nèi)外研究者也開展了大量工作^[1-4]。對于長春花花粉貯藏技術(shù)方面的研究目前尚未系統(tǒng)報道。通過研究本地長春花品系白長春花（C. roseus cv. albus）、黃長春花（C. roseus cv. flavus）和進口長春花品系的農(nóng)藝性狀及其花粉在自然條件下衰敗和花粉貯藏技術(shù)，為解決長春花遠距離雜交、解決花期不遇問題奠定理論基礎(chǔ)，同時為進行長春花雜交制種、新品系的培育提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗長春花品系及其農(nóng)藝性狀調(diào)查

參試長春花品系如表1所見。2012年7月調(diào)查各品系的農(nóng)藝性狀，包括株高、花徑、株幅、花朵數(shù)及花色，利用SAS 8.0對不同品系各性狀進行Duncans檢驗。

1.2 花粉活力測定

1.2.1 測定方法 將試驗用培養(yǎng)皿洗凈晾干，和配制好的培養(yǎng)基一起消毒；消毒完成后，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，培養(yǎng)基盡量薄而均勻；自然冷卻后，用棉花棒蘸上花粉，輕彈到培養(yǎng)基上，通過顯微鏡觀察花粉的萌發(fā)情況，統(tǒng)計花粉萌發(fā)率來衡量花粉品質(zhì)及活力?；ǚ勖劝l(fā)率計算公式：花粉萌發(fā)率=目鏡視野中萌發(fā)花粉粒數(shù)/目鏡視野中花粉粒總數(shù)×100%。所有操作均在超凈工作臺上完成。

1.2.2 試驗內(nèi)容 （1）長春花不同開花時間花粉活力變化：采集本地長春花開花第1天至第7天的花朵，收集新鮮花粉進行離體培養(yǎng)，檢測花粉活力。每種花粉5個培養(yǎng)皿，每培養(yǎng)皿取3個視野進行觀察，每隔1 h進行1次花粉活力測定，直至觀察6 h，統(tǒng)計萌發(fā)率。（2）不同貯藏方式對長春花花粉活力的影響：分別將常溫貯藏、5 ℃低溫貯藏和5 ℃低溫干燥貯藏的花粉各1份，每天進行離體培養(yǎng)，直至第15天，每種花粉5個培養(yǎng)皿，每培養(yǎng)皿取3個視野進行觀察，統(tǒng)計萌發(fā)率。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同長春花品系農(nóng)藝特性調(diào)查

由表2、表3可見，除冠幅外，參試不同長春花品系的農(nóng)藝性狀之間均存在很大差異；花色種類繁多，以紅色為主；各品種的株高分布在18.38～25.12 cm之間，這與本地長春花株高差異非常大；最矮的是6號品系（Pacifica Orchid Deep），株高均值為18.38 cm，最大株高的為3號品系（Cora Punch），其株高均值為25.12 cm；不同品系間冠幅差異不顯著，其單株間存在一定差異，可能與個體的營養(yǎng)生長環(huán)境有關(guān)；不同品系間花徑差異極顯著，最小花徑為2號品系，為4.04 cm，最大花徑為4號品系， 達到5.20 cm；不同品系間花朵數(shù)差異也很大，從8.3朵到15.9朵，花朵數(shù)最多的為11號品系。

2.2 長春花不同開花時間花粉活力的變化

由圖1可見，長春花不同開花時間的花粉活力都保持在較高的水平，花粉萌發(fā)率第1天就達到最高，為99.82%，到第7天花瓣即將脫落，花粉萌發(fā)率仍保持在95%以上，不同時間花粉萌發(fā)率差異不明顯。這說明長春花從開始開花到落花，其花粉活力都保持在一個較高的水平，有較高的可育率，隨時可以收集花粉進行雜交授粉。

2.3 不同貯藏方式對長春花粉活力的影響

由圖2可見，常溫貯藏下，花粉活力隨貯藏時間的增加呈明顯下降趨勢，貯藏15 d后，花粉萌發(fā)率僅為7.56%，且花粉管明顯縮短；5 ℃低溫貯藏的花粉活力一直保持在較高水平，貯藏半個月后，其花粉活力仍達到80%以上；5 ℃低溫干燥處理4 d后的花粉，其花粉萌發(fā)率保持在50%左右，不同處理間差異較大，變化范圍在30%～70%之間，隨著貯藏時間延長，其活力變化不大。

3 小結(jié)

對15個進口長春花品系的農(nóng)藝特性進行調(diào)查，結(jié)果表明，除了冠幅外，不同品種的農(nóng)藝性狀之間均存在很大差異，尤其是不同品系花朵數(shù)差異顯著；花色種類繁多，以紅色為主。對長春花不同開花時間的花粉進行活力進行檢測，結(jié)果表明，長春花不同開花時間的花粉都保持較高的可育率，其花粉離體培養(yǎng)萌發(fā)率保持在90%以上。對不同貯藏方式的長春花花粉活力進行研究，結(jié)果表明，常溫貯藏、5 ℃低溫貯藏和5 ℃低溫干燥貯藏3種貯藏方式間花粉萌發(fā)率差異顯著，短時間保存宜選用5 ℃低溫貯藏，長時間進行長春花花粉保存，宜選用5 ℃低溫干燥貯藏。長春花干燥處理后導(dǎo)致花粉活力大大降低，這可能是由于長春花花粉活力對水分的要求相對較高所導(dǎo)致，這與絲瓜、玉米、甘薯等花粉離體萌發(fā)的研究結(jié)果^[5-7]一致，高濕度是許多植物花粉活力降低的重要因素^[7]。

低溫冷凍貯藏的溫度大概在-20～-15 ℃。一般來說，花粉冷凍貯藏比冷藏效果好，如西南樺花粉在-20 ℃下干燥貯藏效果最佳^[8]；楊傳友等發(fā)現(xiàn)12種果樹14個品種的花粉在冷凍室的貯藏效果比冷藏室好，花粉萌發(fā)率可提高7.5%～27.2%^[9]。超低溫（-80 ℃）能最大限度地抑制生理代謝強度，Knowlton第1次報道了-180 ℃貯存后的金魚草（Antrirrhinum majus）花粉仍具有生活力，降低花粉含水量能夠提高冰凍保存的生存率^[10]，目前已經(jīng)進行了30多種植物花粉的超低溫保存研究^[11]。對長春花花粉進行冷凍低溫貯藏（-5 ℃）和超低溫（-80 ℃）貯藏，結(jié)果表明，0 ℃以下低溫不利于常規(guī)處理花粉的保存，冷凍貯藏1 h即喪失活力，而對于干燥真空貯藏的花粉則能起到延長保存時間的作用。

參考文獻：

[1]Hirata K，Yamanaka A，Kurano N，et al. Production of indole alkaloids in multiple shoot culture of Catharanthus roseus（L）G. Don.[J]. Agricultural and Biological Chemistry，1987，51（5）：1311-1317.

[2]楊玉敏，元英進，胡宗定. 正交試驗法優(yōu)化長春花分化培養(yǎng)基[J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，1993，5（3）：34-37.

[3]黃 勇，郭善利，錢關(guān)澤，等. 長春花的組織培養(yǎng)與快速繁殖[J]. 植物生理學(xué)通訊，2000，36（1）：39.

[4]郭勝娟. 長春花細胞培養(yǎng)與快速繁殖的初步研究[D]. 武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2004.

[5]王少先，李普安，喬明亮. 蔬菜作物花粉生物學(xué)特性的研究——Ⅰ：絲瓜花粉的萌發(fā)特性[J]. 洛陽農(nóng)專學(xué)報，1995，2（1）：22-27.

[6]史桂榮. 玉米花粉生活力的研究[J]. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，1996（2）：13-15.

[7]王慶美，郗光輝，王大箴，等. 甘薯花粉離體萌發(fā)及不同保存方法對其生活力的影響[J]. 萊陽農(nóng)學(xué)院學(xué)報，1996，13（3）：28-31.

[8]程 偉，趙志剛，郭俊杰，等. 西南樺花粉低溫貯藏試驗初報[J]. 浙江林業(yè)科技，2007，27（6）：49-52.

[9]楊傳友，畢 杰，楊先棟. 十二種果樹花粉貯藏試驗[J]. 果樹科學(xué)，1994，11（2）：103-104.

[10]Lwanami Y. Storage in an organic solvent as a mean for preserving viability pollen grain[J]. Stain Technology，1972，47（4）：137-139.

[11]趙樹仁，武麗英，姚民昌，等. 番茄花粉超低溫保存的研究[J]. 園藝學(xué)報，1993，20（1）：66-70.