馬善治，郭劍華，劉渝松，郭 亮，林 於，劉 新，彭文忠，王 健，廖興隆，胡 曉

（1.重慶市中醫(yī)骨科醫(yī)院，重慶400010；2.重慶醫(yī)科大學(xué)，重慶400016）

頸舒膠囊系重慶市中醫(yī)骨科醫(yī)院臨床使用多年的驗(yàn)方制劑，是由葛根、桂枝、白芍10味等藥物組成，其中葛根作為方中君藥，而葛根素是葛根的主要有效成分。為控制制劑質(zhì)量，我們用高效液相色譜法測(cè)定葛根中的葛根素的含量［1，2］，取得滿意結(jié)果。

1 儀器和試藥

SY-810高效液相色譜儀（瑞利分析儀器公司），色譜柱Kromasil NH2（250mm×4.6mm，5μ），乙腈（色譜純），重蒸水，分析純，葛根素對(duì)照品（供含量測(cè)定用，批號(hào)110713-200609，中國(guó)生物制品檢定所提供），頸舒膠囊樣品（重慶市中醫(yī)骨科醫(yī)院提供）。

2 測(cè)試方法

色譜條件：色譜柱（Kromasil NH2（250mm×4.6mm，5μ），流動(dòng)相，乙腈，水（8∶2），流速1mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm。理論板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。色譜條件下葛根素分離良好，陰性無(wú)干擾（圖1-3）［3］。

圖1 葛根素HPLC

圖2 樣品HPLC

圖3 陰性樣品HPLC

供試品溶液的制備：取頸舒膠囊內(nèi)容物4g，碾細(xì)，精密稱定，用甲醇100mL分二次超聲提取，每次5min；放冷，離心取上清液，合并上清液，用石油醚（60～90℃）50mL萃取1次，棄石油醚液，甲醇液蒸干，殘?jiān)眉状挤执问谷芙獠⑥D(zhuǎn)移至50mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

對(duì)照品溶液的制備：精密稱取葛根素對(duì)照品適量，用甲醇制成每1mL含50μg的溶液，即得。

葛根素線性關(guān)系考察：精密稱取葛根素對(duì)照品適量，用甲醇制成每1mL含5.2、26.0、52.0、78.0、104μg/mL的系列溶液，在選定的色譜條件下分別進(jìn)樣20μL，記錄色譜圖中葛根素峰面積積分值，葛根素在5.2～104.0μg/mL范圍與其峰面積積分值之間線性關(guān)系良好，見(jiàn)表1。

表1 葛根素與其峰面積積分值的關(guān)系

儀器精密度考察：取同一葛根素對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣相等量5次，記錄葛根素的峰面積積分值，見(jiàn)表2。

表2 儀器精密度測(cè)試結(jié)果

供試品溶液的穩(wěn)定性考察：取同一剛制備的供試品溶液，分別于0、5、9、12和24小時(shí)在選定的色譜條件下進(jìn)樣20μL，記錄葛根素的峰面積積分值，即供試品溶液在24h內(nèi)保持穩(wěn)定，見(jiàn)表3。

表3 供試品溶液穩(wěn)定性測(cè)試結(jié)果

方法重現(xiàn)性考察：取同一批樣品，依法取5份樣品，精密稱定，依法制備5份供試品溶液，在選定的色譜條件下分別進(jìn)樣10μL，記錄葛根素的峰面積積分值，即方法重現(xiàn)性符合要求，見(jiàn)表4。

表4 方法重現(xiàn)性測(cè)試結(jié)果

加樣回收率試驗(yàn)：從己知葛根素含量（0.045%）的樣品中取6份供試品，精密稱定，分別精確加入葛根素對(duì)照品的甲醇稀釋液，依法制備6份供試品溶液，依法測(cè)定，記錄葛根素的峰面積積分值，按下式計(jì)算回收率，其平均回收率為97.6%，見(jiàn)表5。

表5 加樣回收率測(cè)定結(jié)果

中試樣品含量測(cè)定：取本品中試樣品3批，依法測(cè)定葛根素含量，見(jiàn)表6。

表6 中試樣品含量測(cè)定結(jié)果

3 討 論

采用照高效液相色譜測(cè)定法對(duì)頸舒膠囊有效成分之一的葛根素作定量研究，可有效測(cè)定葛根素的含量，使頸舒膠囊的配制以及制定有效成分的下限有了明確標(biāo)準(zhǔn)。

［1］黃亞非，張永明，何翱，等.采用高效液相色譜法測(cè)定心脈通口服液中葛根素的含量［J］.中國(guó)中藥雜志，2001，26（11）：760-761.

［2］王建平，秦紅巖，何偉，等.HPLC法測(cè)定解酒靈沖劑中葛根素的含量［J］.時(shí)珍國(guó)藥研究，1997，8（4）：322.

［3］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典中藥材薄層鑒別彩色圖鑒［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2010.