胡士現(xiàn)，楊 寧，蔣成猛，晏 芳

(昆明源瑞制藥有限公司研發(fā)中心，云南昆明651701)

奧美沙坦酯由日本Sankyo和美國Forest Laboratories開發(fā)，2002年5月以商品名Benicar在美國上市，同年8月在德國獲批準并在10月初以Olmetec上市之后得到英國、奧地利、荷蘭、希臘、西班牙、丹麥、挪威、芬蘭、法國、比利時、葡萄牙等多個歐盟國家的認可，用于治療高血壓。本品上市劑型為片劑，規(guī)格為5 mg、20 mg、40 mg 3種。于2006年8月在我國上市，商品名“傲坦”。該藥是一種新的血管緊張素Ⅱ受體抑制劑，該藥對不同程度的高血壓病人均有很好的療效。奧美沙坦酯難溶于水，藥物的溶出直接影響藥物在體內(nèi)的吸收和利用，因此要對其進行溶出度檢測，溶出度試驗技術不僅已作為評價固體制劑內(nèi)在質(zhì)量的一種重要手段［1］，也是一種評價藥物在體內(nèi)釋放和吸收的有效手段［2］。溶出度試驗的深入全面研究以及溶出曲線的精確客觀繪制，既可初步為體內(nèi)生物利用度研究提供參考，也可以揭示各制劑工藝的差別和內(nèi)在品質(zhì)的優(yōu)劣。本文以國外上市的制劑為參比制劑，考察自制奧美沙坦酯片在不同溶出介質(zhì)中的溶出行為，并采用相似因子法評價藥品的內(nèi)在質(zhì)量。

1 實驗材料與儀器

奧美沙坦酯片參比制劑:批號110 010，第一三共制藥(上海)有限公司;奧美沙坦酯片:批號20 120 201、20 120 202、20 120 203，昆明源瑞制藥有限公司自制;奧美沙坦酯對照品:中國藥品生物制品檢定所，批號100 864－200 601，質(zhì)量分數(shù)99.0%;乙腈:Merck KgaA，HPLC級;磷酸二氫鉀，AR，天津市風船化學試劑科技有限公司;氫氧化鈉:AR，國藥集團化學試劑有限公司;水為純化水。

Sartorius CPA225D十萬分之一電子天平:德國賽多利斯;ZRS－8G智能溶出試驗儀:天津天大天發(fā)科技有限公司;1 700型紫外分光光度儀:日本島津公司。

2 實驗方法

2.1 溶出度測定方法

參照奧美沙坦酯片(YBH06992006)質(zhì)量標準溶出度項下的方法，取奧美沙坦酯片，按照溶出度測定法(中國藥典2010年版二部附錄XC第二法)［3］，以磷酸鹽緩沖液(pH6.8)1 000 mL 為溶出介質(zhì)，轉速為50 r/min，經(jīng)30 min，取溶液10 mL，過濾，精密量取續(xù)濾液適量，加溶出介質(zhì)稀釋成每1 mL中約含奧美沙坦酯10 μg的溶液，按照紫外－可見分光光度法(中國藥典2010年版二部附錄ⅣA)，在258 nm的波長處測定吸光度;另取奧美沙坦酯對照品約20 mg，精密定量，置100 mL容量瓶中，加乙腈－水(60∶40，體積比)適量，超聲使溶解，放冷，加乙腈－水(60∶40，體積比)稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL，置100 mL容量瓶中，加磷酸鹽緩沖液(pH6.8)稀釋至刻度，搖勻，測定吸光度。

2.2 溶出度檢測方法驗證

2.3 專屬性

取奧美沙坦酯對照品、奧美沙坦酯片及奧美沙坦酯空白片按奧美沙坦酯片溶出度檢查項下方法制備奧美沙坦酯對照品溶液、供試品溶液及空白輔料溶液。

取上述空白輔料溶液、對照品溶液和供試品溶液，在258 nm的波長處測定吸光度;并分別于240～300 nm進行紫外掃描，空白輔料溶液在258 nm處無吸收，對照品溶液和供試品溶液在258 nm處均有最大吸收，空白輔料對奧美沙坦酯片溶出度檢測無干擾，表明奧美沙坦酯片溶出度檢測方法專屬性良好。

2.4 濾膜吸附試驗

按奧美沙坦酯片溶出度項下方法，制備奧美沙坦酯片供試品溶液，分別過0.8 μm濾膜，分別棄濾液2、3、4 mL，取續(xù)濾液檢測，與供試液離心分離，取上清液檢測進行對比，判斷濾膜的吸附性。檢測結果證明，奧美沙坦酯片供試品溶液用0.8 μm濾膜過濾，對檢測結果無明顯影響。

2.5 線性范圍

精密稱取奧美沙坦酯對照品20.55 mg，置100 mL容量瓶中，加溶劑適量，超聲溶解，放置冷卻，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL，置50 mL容量瓶中，加溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，作為奧美沙坦酯線性儲備液。分別精密量取該儲備液1、3、4、5、6、7 mL 置于10 mL 容量瓶中，加溶出介質(zhì)稀釋至刻度，依次配制成 2.034，6.102，8.136，10.170，12.204，14.238 μg/mL 的溶液，取上述溶液在 258 nm波長處測定吸光度，試驗結果見圖1。

圖1 奧美沙坦酯溶出度標準曲線圖Figure 1 The dissolution curve of olmesartan medoxomil

由圖1可知，奧美沙坦酯在2.034～14.238 μg/mL范圍內(nèi)，質(zhì)量濃度與吸光度呈良好線性關系。

2.6 重復性

按奧美沙坦酯片溶出度檢查項下方法由同一分析人員同法制備6份供試品溶液進行檢測，6次檢測結果的RSD=0.62%，表明溶出度檢測方法重復性良好。

2.7 中間精密度

按奧美沙坦酯片溶出度檢查項下方法由不同分析人員于不同日期同法各制備6份供試品溶液檢測，12次檢測結果的RSD=0.73%，表明溶出度檢測方法中間精密度良好。

2.8 溶液穩(wěn)定性

按奧美沙坦酯片溶出度檢查項下方法，制備奧美沙坦酯片供試品溶液，室溫放置 0、1、2、4、6、8 h進行檢測，6個時間點檢測結果的 RSD=0.32%，證明本品溶出度檢測供試品溶液在室溫下放置8h穩(wěn)定。

2.9 準確度

采用加樣回收法，按奧美沙坦酯片溶出度檢查項下對照品溶液制備方法，取奧美沙坦酯空白片及奧美沙坦酯對照品適量制成質(zhì)量分數(shù)為50%、75%、100%的供試品溶液，分別計算其回收率，驗證溶出度檢測方法的準確度，結果見表1。

表1 奧美沙坦酯片溶出度回收率試驗結果Table 1 Olmesartan tablets dissolution recovery test results

表1結果表明溶出度檢測方法準確度良好。綜上所述研究結果表明該方法適用于奧美沙坦酯片溶出度檢測。

3 溶出曲線測定

取奧美沙坦酯片樣品6片，照2.1方法進行測定，以4種不同pH的溶出介質(zhì)1 000 mL，分別在5、10、15、20、30、45、60、90、120、180、240、300、360 min取溶出液10 mL(每次取液補同溫度的溶出介質(zhì)10 mL)，過濾，精密量取濾液5 mL，置10 mL容量瓶中，加溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，在258 nm的波長處測定吸光度，計算各取樣點的累計溶出度，當連續(xù)兩點的溶出率達90%以上，且差值在5%以內(nèi)時試驗可以提前結束。

3.1 溶出曲線檢測方法的重現(xiàn)性驗證

取奧美沙坦酯片參比制劑(110 010)按溶出曲線測定法重復檢測2次，繪制溶出曲線，考察2次檢測結果的重現(xiàn)性，試驗結果見表2。

表2 奧美沙坦酯片(參比制劑)的溶出曲線重復試驗結果Table 2 Repeat results of the dissolution curve of olmesartan medoxomil tablets(reference formulation)

表2結果表明，奧美沙坦酯片溶出曲線兩次檢測各時間點的累計溶出度基本相等，說明溶出曲線檢測方法可操作性及重現(xiàn)性較好，可用于奧美沙坦酯片自制樣品與參比制劑溶出曲線的對比檢測。

3.2 溶出均一性

取奧美沙坦酯片(批號為:20110201及參比制劑(批號為:110010)分別測定在pH6.8的磷酸鹽緩沖溶液中溶出曲線，考察批內(nèi)溶出均一性，試驗結果見表3、表4。

表3 奧美沙坦酯片(20110201批)溶出均一性試驗結果Table 3 Olmesartan medoxomil tablets(20110201 batch)dissolution homogeneity test results

表4 奧美沙坦酯片(參比制劑，110010批)溶出曲線結果Table 4 Olmesartan medoxomil tablets(reference formulation，110010 batch)dissolution profile results

表3、表4結果顯示溶出5 min后自制品和參比制劑6片間溶出度RSD均小于5%，表明二者6片間的溶出均一性均良好。

3.3 自制奧美沙坦酯片溶出重現(xiàn)性及與參比制劑的溶出相似性

按溶出曲線測定法檢測自制奧美沙坦酯片3批樣品(20120201、20120202、20120203)在 pH6.8的磷酸鹽緩沖溶液中的溶出曲線，將第一批(20120201)自制樣品與另外兩批(20120202和20120203)自制樣品在pH6.8的磷酸鹽緩沖液中的溶出曲線進行對比，以考察自制3批樣品的批間重現(xiàn)性;將自制品第一批和參比制劑在pH6.8的磷酸鹽緩沖液中溶出曲線進行對比，以考察自制樣品與參比制劑在pH6.8的磷酸鹽緩沖液中溶出行為的一致性，試驗結果見圖2。

圖2 自制樣品與參比制劑溶出曲線對比Figure 2 Dissolution curve comparison of self－prepared and reference samples

將3批自制樣品在pH6.8的磷酸鹽緩沖液中的溶出曲線和參比制劑的溶出曲線進行對比，采用5、10、15、30 min的平均累計溶出度分別計算f2因子，并以pH6.8的磷酸鹽緩沖液中3批自制樣品的第一批為參照，計算另外兩批樣品在同種介質(zhì)中溶出曲線的f2［4］因子，結果見表 5。

表5 自制樣品與參比制劑溶出曲線f2因子的計算結果Table 5 Caculation results of factor f2of dissolution curve of self－prepared and reference samples

表5結果顯示，自制3批樣品與參比制劑在pH6.8的磷酸鹽緩沖液中的溶出行為相似;自制3批樣品在pH6.8的磷酸鹽緩沖液中的溶出曲線重現(xiàn)性較好。

3.4 不同介質(zhì)中的溶出曲線比較

采用多條溶出曲線剖析自制品與參比制劑溶出特性，方法:取奧美沙坦酯片(自制20120201)以參比制劑(110010)按溶出度測定法，分別以純化水、0.1 mol/L鹽酸溶液、pH4.5醋酸鹽緩沖溶液為溶出介質(zhì)進行溶出曲線檢測。

自制樣品和參比制劑在上述3種溶出介質(zhì)中溶出曲線圖見圖3、圖4、圖5。

圖3 自制樣品與參比制劑在水中的溶出曲線對比Figure 3 Dissolution curve comparison of self－prepared and reference samples in water

3.5 不同介質(zhì)中的溶出曲線相似性評價

奧美沙坦酯片自制品與參比制劑在4種溶出介質(zhì)中溶出曲線相似性評價結果見表6。

由表6結果可知，奧美沙坦酯片自制品與參比制劑在4種溶出介質(zhì)中溶出曲線均相似，表明自制品與參比制劑體外溶出行為一致。

圖4 自制樣品與參比制劑在pH=1.0鹽酸溶液中溶出曲線對比Figure 4 Dissolution curve comparison of self－prepared and reference samples in pH=1.0 HCl solution

圖5 自制樣品與參比制劑在pH=4.5醋酸鹽緩沖溶液中溶出曲線對比Figure 5 Dissolution curve comparison of self－prepared and reference samples in pH=4.5 HAc buffer solution

表6 溶出曲線相似性評價結果Table 6 Evaluation results of the dissolution profile similarity

4 結論

奧美沙坦酯難溶于水，實驗中自制品與參比制劑在水和pH4.5醋酸鹽緩沖溶液中360 min均未溶出90%以上，未達到溶出平臺，在后續(xù)研究中應在這兩種介質(zhì)中加入一定量的表面活性劑使樣品中奧美沙坦酯溶出完全，以提高自制品與參比制劑在這兩種介質(zhì)中溶出行為的區(qū)分度。雖然奧美沙坦酯片自制品與參比制劑在4種溶出介質(zhì)中溶出曲線均相似，體外溶出行為一致，但是自制品與參比制劑體內(nèi)生物利用度是否等效還有待進一步考察。

［1］謝沐風.改善溶出度評價方法，提高固體藥物制劑水平［J］.中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2005，36(7):447－451.

［2］張啟明，謝沐風，寧保明，等.采用多條溶出曲線評價口服固體制劑的內(nèi)在質(zhì)量［J］.中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2009，40(12):946—955.

［3］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:二部［M］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:附錄85.

［4］陳賢春，吳清，王玉蓉，等.關于溶出曲線比較和評價方法［J］.中國醫(yī)院藥學雜志，2007，27(5):662－664.