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山刺玫果提取物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

2014-11-15 08:02:34楊揚(yáng)
江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年9期
關(guān)鍵詞:總黃酮槲皮素

摘要:建立山刺玫果提取物的定性鑒別和含量測(cè)定方法,采用薄層色譜法對(duì)山刺玫果提取物進(jìn)行定性分析;采用紫外-可見分光光度法建立山刺玫果提取物總黃酮的含量測(cè)定方法;采用高效液相色譜法建立山刺玫果提取物中槲皮素的含量測(cè)定方法,其中色譜柱為伊利特C18色譜柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流動(dòng)相為甲醇-水-磷酸-三乙胺(50 ∶50 ∶0.45 ∶0.2),流速為1 mL/min,進(jìn)樣量為20 μL,檢測(cè)波長374 nm,柱溫30 ℃。建立的薄層色譜鑒別方法熒光斑點(diǎn)清晰,陰性無干擾;蕓香苷在3.70~44.40 μg/mL(r=0.999 7)、槲皮素在0.02~0.20 μg(r=0.999 9)內(nèi)線性關(guān)系良好;蕓香苷平均回收率為101.32%,RSD為1.67%(n=9),槲皮素平均回收率99.80%,RSD為1.31%(n=9)。建立的薄層鑒別方法專屬性高,含量測(cè)定方法具有良好的精密度,結(jié)果準(zhǔn)確可靠,可用于山刺玫果提取物的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞:山刺玫果;金絲桃苷;總黃酮;槲皮素

中圖分類號(hào): R284.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A文章編號(hào):1002-1302(2014)09-0248-03

收稿日期:2013-11-29

基金項(xiàng)目:吉林省科技計(jì)劃(編號(hào):20110948)。

作者簡介:楊揚(yáng)(1989—),女,吉林吉林人,碩士研究生,主要從事天然產(chǎn)物有效成分的提取及純化工藝研究。E-mail:15643957455@163.com。

通信作者:鐘方麗,博士,教授,主要從事天然產(chǎn)物的研究與開發(fā)。E-mail:fanglizhong@sina.com。山刺玫果別稱野薔薇、野玫瑰、薔薇果,系薔薇科植物山刺玫(Rosa davurica Pall.)的成熟果實(shí),廣泛分布在我國東北及山西、內(nèi)蒙等地,花、根、果均可入藥,其果實(shí)為卵形或球形,營養(yǎng)豐富、酸甜可口,可抗衰老,治腸炎、食欲不振,防治心血管疾病等,民間大量采食或用于泡酒、泡茶等,《中藥大辭典》認(rèn)為其有健脾理氣、養(yǎng)血調(diào)經(jīng)的作用。據(jù)報(bào)道,山山刺玫果內(nèi)含多種維生素、氨基酸及黃酮類化合物等成分,具有很大的開發(fā)價(jià)值,山刺玫果作為一種具有保健和治療作用的天然產(chǎn)物被日益重視[1-5]。山刺玫果中所含的總黃酮類物質(zhì)具有防治高血脂和血栓所致的心腦血管疾病的功效[6-7],其中蕓香苷具有舒張血管、抗病毒、抗衰老等生物活性[8];槲皮素具有抗炎、抗氧化、清除體內(nèi)自由基的作用,對(duì)由膠原、ADP或凝血酶引起的血小板聚集及血栓形成也有抑制作用,并有免疫增強(qiáng)功能及鎮(zhèn)痛等作用[9-10]。本研究以蕓香苷為對(duì)照品采用紫外-可見分光光度法對(duì)山刺玫果提取物總黃酮的含量進(jìn)行了測(cè)定,并采用高效液相色譜法對(duì)山刺玫果提取物中的槲皮素量進(jìn)行了測(cè)定。

1材料

1.1試藥

山刺玫果提取物(批號(hào)20120810、20120820、20121011、20121022、20121103)為吉林化工學(xué)院化學(xué)與制藥工程學(xué)院藥學(xué)系自制。槲皮素對(duì)照品(批號(hào):100081-200907),蕓香苷對(duì)照品(批號(hào):100080-200707),金絲桃苷對(duì)照品(批號(hào):111521-201004),均為含量測(cè)定用,購于中國食品藥品檢定研究院。

1.2儀器

TU-1810紫外分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限公司);LC2000高效液相色譜儀(上海天美科學(xué)儀器有限公司);AEG-220電子天平(日本島津);KQ-250B超聲波清洗器(江蘇省昆山市超聲儀器有限公司);ZF-20D暗箱式紫外分析儀(上海寶山顧村電光儀器廠)。

1.3試劑

薄層色譜硅膠G、H(青島海洋化工集團(tuán)公司),甲醇為色譜純,三乙胺為優(yōu)級(jí)純,水為重蒸餾水,醋酸乙酯、甲酸、乙醇等其他化學(xué)試劑均為分析純。

2結(jié)果與分析

2.1薄層色譜鑒別

2.1.1對(duì)照品溶液及供試品溶液的制備精確稱取干燥至恒重的金絲桃苷對(duì)照品5.05 mg,置于10 mL容量瓶中,甲醇溶解,定容,作為對(duì)照品溶液,備用。稱取干燥至恒重的山刺玫果提取物0.16 g,精確稱定,置于25 mL容量瓶中,加60%乙醇溶解,定容,吸取5 mL于25 mL容量瓶中,60%乙醇定容,作為供試品溶液,備用。

2.1.2陰性對(duì)照液的制備稱取干燥至恒重的山刺玫果提取物0.16 g,精確稱定,50 mL蒸餾水分散,將上述分散液經(jīng)過D-101樹脂柱,流出液重復(fù)上柱,至流出液無黃酮顏色反應(yīng),收集流出液,水浴上揮干,用適量60%乙醇溶解,即得除去總黃酮的陰性對(duì)照液,備用。

2.1.3結(jié)果按《中國藥典》2010年版一部附錄Ⅵ B 薄層色譜法試驗(yàn)[11-12],吸取上述金絲桃苷對(duì)照品溶液、3批供試品溶液及陰性對(duì)照溶液各5 μL,分別點(diǎn)于同一層析硅膠(G)薄層板(市售鋁箔片基)上,以醋酸乙酯-甲酸-水(8 ∶1 ∶1)為展開劑展開,取出,晾干,均勻地噴以5%AlCl3-乙醇溶液,用電吹風(fēng)吹至無有機(jī)溶劑氣味,置于紫外分析儀(365 nm)下檢視。供試品色譜中,在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上顯有相同顏色的熒光斑點(diǎn)(圖1)。

2.2總黃酮含量的測(cè)定

2.2.1對(duì)照品溶液的制備精確稱取干燥至恒重的蕓香苷對(duì)照品10.0 mg,置于50 mL容量瓶中,加60%乙醇溶解,定容,搖勻,配制成濃度為0.2 mg/mL的對(duì)照品溶液,備用。

2.2.2供試品溶液的制備按“2.2.1”節(jié)的方法制備。

2.2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精確吸取蕓香苷對(duì)照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL,置于25 mL容量瓶中,加5% NaNO2溶液 1.0 mL,搖勻,放置6 min,加10% Al(NO3)3溶液1.0 mL,搖勻,放置6 min,加4% NaOH 10.0 mL,再加60%乙醇定容至刻度,搖勻,放置15 min。以相應(yīng)的試劑為空白,按照分光光度法,在505 nm處測(cè)定其吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo)、蕓香苷對(duì)照品濃度(mg/mL)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線[13-14],進(jìn)行直線回歸,回歸方程為:y=12.831x+0.003 5,r=0.999 7。結(jié)果表明蕓香苷在3.70~44.40 μg/mL范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。endprint

2.2.4儀器精密度試驗(yàn)吸取對(duì)照品溶液2.0 mL于25 mL容量瓶中,按“2.2.3”節(jié)的方法顯色,連續(xù)測(cè)定6次吸光度,RSD為0.18%,結(jié)果表明精密度較好。

2.2.5中間精密度試驗(yàn)吸取對(duì)照品溶液2.0 mL于25 mL容量瓶中,按“2.2.3”節(jié)的方法顯色,分別在2臺(tái)儀器上連續(xù)測(cè)定6次吸光度,RSD為1.68%、1.05%,中間精密度的RSD為2.07%,結(jié)果表明中間精密度較好。

2.2.6穩(wěn)定性試驗(yàn)吸取2.0 mL供試品溶液于25 mL容量瓶中,按“2.2.3”節(jié)的方法分別于配制后0、1、2、4、6、8、24 h進(jìn)行顯色,測(cè)定吸光度,RSD為0.41%。按“2.2.3”的方法分別在顯色后于0、5、10、15、20、25、30、35、40、60 min測(cè)定吸光度,RSD為1.61%,結(jié)果表明供試品溶液在24 h穩(wěn)定性良好,顯色后60 min穩(wěn)定,滿足測(cè)定要求。

2.2.7重復(fù)性試驗(yàn)取同一批號(hào)山刺玫果提取物6份,精確稱量,按“2.2.1”節(jié)的方法制成供試品溶液,吸取2.0 mL于25 mL容量瓶中,按“2.2.3”節(jié)的方法顯色,在505 nm處測(cè)定吸光度,RSD為 2.38%,結(jié)果表明重復(fù)性良好。

2.2.8加樣回收率試驗(yàn)稱取9份總黃酮含量已知的供試品,精確稱定,每3份中加入3.18、6.34、9.52 mg/mL對(duì)照品溶液5.0 mL,按“2.2.1”節(jié)的方法制備供試品溶液,按“2.2.3”節(jié)的方法顯色測(cè)定,結(jié)果見表1。

2.2.9樣品含量測(cè)定稱取5批供試品,精確稱定,按“2.2.1”節(jié)的方法制備供試品溶液,按“2.2.3”節(jié)的方法顯色,在505 nm處測(cè)定吸光度,結(jié)果顯示5批山刺玫果提取物中總黃酮的含量分別為74.67%、73.00%、74.54%、7321%、75.80%。

2.3槲皮素含量測(cè)定

2.3.1對(duì)照品溶液的制備精確稱取干燥至恒重的槲皮素對(duì)照品10.0 mg,置于50 mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得濃度為0.20 mg/mL的槲皮素對(duì)照品溶液。

2.3.2供試品溶液的制備精確稱取干燥的山刺玫果提取物0.16 g,置于具塞錐形瓶中,加入甲醇-25%鹽酸溶液(4 ∶1)30 mL,密塞,稱質(zhì)量,置于90 ℃水浴中加熱回流1 h,放冷,稱重,用甲醇補(bǔ)充減失的質(zhì)量,搖勻,過濾,將濾液轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中,甲醇稀釋至刻度[15-16],搖勻,吸取5 mL于25 mL容量瓶中,流動(dòng)相定容,微孔濾膜(0. 45 μm) 過濾,取續(xù)濾液作為供試品溶液。

2.3.3色譜條件及適應(yīng)性試驗(yàn)色譜柱為伊利特C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),流動(dòng)相為甲醇-水-磷酸-三乙胺(50 ∶50 ∶0.45 ∶0.2),流速為1.0 mL/min,檢測(cè)波長為 374 nm,柱溫為30 ℃,進(jìn)樣量為20 μL。在此條件下,槲皮素的保留時(shí)間為8.7 min,分離度為2.4,理論塔板數(shù)為5 100,其HPLC圖如圖2所示。

2.3.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制吸取對(duì)照品溶液適量,配成濃度分別為1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 μg/mL的系列對(duì)照品溶液,分別進(jìn)樣20 μL,以槲皮素峰面積積分值y為縱坐標(biāo),進(jìn)樣量x(μg)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程為:y=3×106x-11 000,r=0.999 9。結(jié)果表明,槲皮素的進(jìn)樣量在0.02~0.20 μg 范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.3.5重復(fù)性試驗(yàn)取同一批號(hào)山刺玫果提取物6份,按“2.3.1”節(jié)中已定的方法制備供試品溶液,各進(jìn)樣20 μL進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果顯示槲皮素峰面積的RSD為1.68%,說明該方法具有良好的重復(fù)性。

2.3.6儀器精密度試驗(yàn)稱取20 μg/mL的槲皮素對(duì)照品溶液,連續(xù)進(jìn)樣6次,每次進(jìn)樣20μL,結(jié)果顯示槲皮素峰面

積的RSD為0.98%,說明儀器精密度良好。

2.3.7穩(wěn)定性試驗(yàn)吸取供試品溶液,在同一色譜條件下,分別于0、1、2、3、4、5、6、7、8 h進(jìn)樣20 μL,結(jié)果顯示槲皮素的峰面積RSD為1.57%,說明供試品溶液在室溫下8 h穩(wěn)定。

2.3.8加樣回收率試驗(yàn)稱取9份槲皮素含量已知的供試品,每3份中分別加入0.20 mg/mL槲皮素對(duì)照品溶液1.50、1.88、2.25 mL,按“2.3.1”節(jié)的方法制備供試品溶液,在上述色譜條件下進(jìn)行含量測(cè)定,結(jié)果見表2。

2.3.9樣品含量測(cè)定稱取3批樣品,精確稱定,按“2.3.1”節(jié)中已定的方法制備供試品溶液,分別進(jìn)樣20 μL,測(cè)定槲皮素峰面積,計(jì)算其含量,結(jié)果3批樣品中槲皮素的含量分別為0.221%、0.220%、0.224%。3結(jié)論與討論

3.1薄層色譜條件的選擇

3.1.1展開劑的選擇分別以醋酸乙酯-甲酸-水(8 ∶1 ∶1、9 ∶1 ∶1、7 ∶1 ∶1、10 ∶1 ∶1、12 ∶1 ∶1、20 ∶1 ∶1)、甲醇-冰醋酸-水(4 ∶1 ∶5)、苯-醋酸乙酯-甲酸(5 ∶4 ∶1,6 ∶4 ∶1)、三氯甲烷-甲醇-水(28 ∶10 ∶1)為展開劑對(duì)展開系統(tǒng)進(jìn)行比較,結(jié)果顯示醋酸乙酯-甲酸-水(8 ∶1 ∶1)系統(tǒng)金絲桃苷比移值適中,斑點(diǎn)分離效果好。

3.1.2硅膠板的選擇分別吸取供試品溶液3批、金絲桃苷對(duì)照品溶液及陰性對(duì)照溶液,分別考察自制硅膠G板(玻璃片基)、自制硅膠H板(玻璃片基)、層析硅膠(G)薄板(鋁箔片基)、層析硅膠(G)薄板(玻璃片基)的展開效果,結(jié)果表明層析硅膠(G)薄板(鋁箔片基)展開效果良好,熒光斑點(diǎn)清晰。

3.1.3顯色劑的選擇根據(jù)山刺玫果提取物的主要化學(xué)成分為黃酮類化合物,顯色時(shí)選擇9%FeCl3、5%AlCl3-乙醇溶液為顯色劑進(jìn)行顯色,結(jié)果顯示,5%AlCl3-乙醇溶液為顯色劑,熒光斑點(diǎn)清晰,所以宜以5%AlCl3-乙醇溶液為顯色劑。endprint

3.2 測(cè)定槲皮素含量的供試品溶液制備方法的確定

在槲皮素含量測(cè)定中,對(duì)供試品溶液制備方法進(jìn)行研究,分別對(duì)水解液的用量、水解時(shí)間和水解溫度進(jìn)行探索。

3.2.1水解液用量的選擇取6份干燥的山刺玫果提取物 0.16 g,精確稱定,置于具塞錐形瓶中,分別加入甲醇-25%鹽酸溶液(4 ∶1)10、15、20、25、30、35 mL,密塞,稱質(zhì)量,分別于50 ℃下進(jìn)行水解,每次水解時(shí)間為0.5 h。放冷,稱重,用甲醇補(bǔ)充減少的質(zhì)量,搖勻,過濾,將濾液轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中,甲醇稀釋至刻度,搖勻,吸取5 mL于25 mL容量瓶中,流動(dòng)相定容,微孔濾膜(0.45 μm) 過濾,取續(xù)濾液作為供試品溶液,進(jìn)樣20 μL,峰面積分別為27 146、28 147、30 009、34 359、34 479、33 380,根據(jù)峰面積選擇水解液用量為30 mL。

3.2.2水解時(shí)間的選擇取6份干燥的山刺玫果提取物 0.16 g,精確稱定,置于具塞錐形瓶中,加入甲醇-25%鹽酸溶液(4 ∶1)30 mL,密塞,稱質(zhì)量,50 ℃進(jìn)行水解,每次水解時(shí)間分別為0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 h。按“3.2.1”節(jié)中的方法稀釋過濾,取續(xù)濾液作為供試品溶液,進(jìn)樣20 μL,峰面積為31 326、32 636、35 966、46 117、42 897、40 699,根據(jù)峰面積選擇水解時(shí)間為2.0 h。

3.2.3水解溫度的選擇按“3.2.2”節(jié)中的方法稱取提取物加入水解液,分別于50、60、70、80、90、100 ℃下進(jìn)行水解,每次水解時(shí)間為2.0 h。按“3.2.1”節(jié)中的方法稀釋過濾,取續(xù)濾液作為供試品溶液,進(jìn)樣20 μL,峰面積分別為49 692、51 232、62 290、63 009、74 759、68 396,根據(jù)峰面積選擇水解溫度為90 ℃。

供試品溶液制備方法為:稱取干燥的山刺玫果提取物0.16 g,精確稱定,置于具塞錐形瓶中,加入水解液甲醇-25%鹽酸溶液(4 ∶1)30 mL,90 ℃水解2.0 h。

本試驗(yàn)分別采用HPLC、UV法對(duì)山刺玫果提取物中槲皮素、總黃酮的含量測(cè)定進(jìn)行了相關(guān)的探索,并建立了山刺玫果提取物的薄層鑒別方法,本試驗(yàn)建立的薄層鑒別方法斑點(diǎn)清晰、簡便快捷,建立的含量測(cè)定方法專屬性強(qiáng)、操作簡便、線性關(guān)系良好,回收率、重現(xiàn)性符合要求,可以更全面地對(duì)山刺玫果提取物進(jìn)行質(zhì)量控制,為進(jìn)一步開發(fā)山刺玫果提供了理論依據(jù)。endprint

3.2 測(cè)定槲皮素含量的供試品溶液制備方法的確定

在槲皮素含量測(cè)定中,對(duì)供試品溶液制備方法進(jìn)行研究,分別對(duì)水解液的用量、水解時(shí)間和水解溫度進(jìn)行探索。

3.2.1水解液用量的選擇取6份干燥的山刺玫果提取物 0.16 g,精確稱定,置于具塞錐形瓶中,分別加入甲醇-25%鹽酸溶液(4 ∶1)10、15、20、25、30、35 mL,密塞,稱質(zhì)量,分別于50 ℃下進(jìn)行水解,每次水解時(shí)間為0.5 h。放冷,稱重,用甲醇補(bǔ)充減少的質(zhì)量,搖勻,過濾,將濾液轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中,甲醇稀釋至刻度,搖勻,吸取5 mL于25 mL容量瓶中,流動(dòng)相定容,微孔濾膜(0.45 μm) 過濾,取續(xù)濾液作為供試品溶液,進(jìn)樣20 μL,峰面積分別為27 146、28 147、30 009、34 359、34 479、33 380,根據(jù)峰面積選擇水解液用量為30 mL。

3.2.2水解時(shí)間的選擇取6份干燥的山刺玫果提取物 0.16 g,精確稱定,置于具塞錐形瓶中,加入甲醇-25%鹽酸溶液(4 ∶1)30 mL,密塞,稱質(zhì)量,50 ℃進(jìn)行水解,每次水解時(shí)間分別為0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 h。按“3.2.1”節(jié)中的方法稀釋過濾,取續(xù)濾液作為供試品溶液,進(jìn)樣20 μL,峰面積為31 326、32 636、35 966、46 117、42 897、40 699,根據(jù)峰面積選擇水解時(shí)間為2.0 h。

3.2.3水解溫度的選擇按“3.2.2”節(jié)中的方法稱取提取物加入水解液,分別于50、60、70、80、90、100 ℃下進(jìn)行水解,每次水解時(shí)間為2.0 h。按“3.2.1”節(jié)中的方法稀釋過濾,取續(xù)濾液作為供試品溶液,進(jìn)樣20 μL,峰面積分別為49 692、51 232、62 290、63 009、74 759、68 396,根據(jù)峰面積選擇水解溫度為90 ℃。

供試品溶液制備方法為:稱取干燥的山刺玫果提取物0.16 g,精確稱定,置于具塞錐形瓶中,加入水解液甲醇-25%鹽酸溶液(4 ∶1)30 mL,90 ℃水解2.0 h。

本試驗(yàn)分別采用HPLC、UV法對(duì)山刺玫果提取物中槲皮素、總黃酮的含量測(cè)定進(jìn)行了相關(guān)的探索,并建立了山刺玫果提取物的薄層鑒別方法,本試驗(yàn)建立的薄層鑒別方法斑點(diǎn)清晰、簡便快捷,建立的含量測(cè)定方法專屬性強(qiáng)、操作簡便、線性關(guān)系良好,回收率、重現(xiàn)性符合要求,可以更全面地對(duì)山刺玫果提取物進(jìn)行質(zhì)量控制,為進(jìn)一步開發(fā)山刺玫果提供了理論依據(jù)。endprint

3.2 測(cè)定槲皮素含量的供試品溶液制備方法的確定

在槲皮素含量測(cè)定中,對(duì)供試品溶液制備方法進(jìn)行研究,分別對(duì)水解液的用量、水解時(shí)間和水解溫度進(jìn)行探索。

3.2.1水解液用量的選擇取6份干燥的山刺玫果提取物 0.16 g,精確稱定,置于具塞錐形瓶中,分別加入甲醇-25%鹽酸溶液(4 ∶1)10、15、20、25、30、35 mL,密塞,稱質(zhì)量,分別于50 ℃下進(jìn)行水解,每次水解時(shí)間為0.5 h。放冷,稱重,用甲醇補(bǔ)充減少的質(zhì)量,搖勻,過濾,將濾液轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中,甲醇稀釋至刻度,搖勻,吸取5 mL于25 mL容量瓶中,流動(dòng)相定容,微孔濾膜(0.45 μm) 過濾,取續(xù)濾液作為供試品溶液,進(jìn)樣20 μL,峰面積分別為27 146、28 147、30 009、34 359、34 479、33 380,根據(jù)峰面積選擇水解液用量為30 mL。

3.2.2水解時(shí)間的選擇取6份干燥的山刺玫果提取物 0.16 g,精確稱定,置于具塞錐形瓶中,加入甲醇-25%鹽酸溶液(4 ∶1)30 mL,密塞,稱質(zhì)量,50 ℃進(jìn)行水解,每次水解時(shí)間分別為0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 h。按“3.2.1”節(jié)中的方法稀釋過濾,取續(xù)濾液作為供試品溶液,進(jìn)樣20 μL,峰面積為31 326、32 636、35 966、46 117、42 897、40 699,根據(jù)峰面積選擇水解時(shí)間為2.0 h。

3.2.3水解溫度的選擇按“3.2.2”節(jié)中的方法稱取提取物加入水解液,分別于50、60、70、80、90、100 ℃下進(jìn)行水解,每次水解時(shí)間為2.0 h。按“3.2.1”節(jié)中的方法稀釋過濾,取續(xù)濾液作為供試品溶液,進(jìn)樣20 μL,峰面積分別為49 692、51 232、62 290、63 009、74 759、68 396,根據(jù)峰面積選擇水解溫度為90 ℃。

供試品溶液制備方法為:稱取干燥的山刺玫果提取物0.16 g,精確稱定,置于具塞錐形瓶中,加入水解液甲醇-25%鹽酸溶液(4 ∶1)30 mL,90 ℃水解2.0 h。

本試驗(yàn)分別采用HPLC、UV法對(duì)山刺玫果提取物中槲皮素、總黃酮的含量測(cè)定進(jìn)行了相關(guān)的探索,并建立了山刺玫果提取物的薄層鑒別方法,本試驗(yàn)建立的薄層鑒別方法斑點(diǎn)清晰、簡便快捷,建立的含量測(cè)定方法專屬性強(qiáng)、操作簡便、線性關(guān)系良好,回收率、重現(xiàn)性符合要求,可以更全面地對(duì)山刺玫果提取物進(jìn)行質(zhì)量控制,為進(jìn)一步開發(fā)山刺玫果提供了理論依據(jù)。endprint

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