方 楷,陳尚钘,楊光耀,于 芬,王宗德,楊清培,施建敏,陳伏生
(江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 江西省竹子種質(zhì)資源與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江西 南昌 330045)
竹類是重要的林業(yè)可再生資源,竹葉、竹枝和竹稈都有十分廣闊的應(yīng)用前景。厚壁毛竹(Phyllostachys edulis‘Pachyloen’)是毛竹一種材性優(yōu)良的變異種類,竹稈高可達(dá)12 m,胸徑可達(dá)8 cm,髓心部分的細(xì)胞解體較少,竹稈壁厚是等徑毛竹的1.8~2.0 倍,竹材沖擊韌性和纖維性狀特征優(yōu)良[1]。厚壁毛竹作為一種稈壁厚、材質(zhì)好的中型竹種,具有較高的種質(zhì)研究價(jià)值和綜合利用價(jià)值[1-4]。
但目前主要用途仍是以竹漿造紙、燒制竹碳、生產(chǎn)竹地板及竹家具為主,用于生物質(zhì)能源和生物質(zhì)化學(xué)品等高值化利用途徑仍相對較少[5-6]。纖維素、半纖維素和木質(zhì)素是細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)性成分,以復(fù)雜分子結(jié)構(gòu)單元聚合成高度異質(zhì)的三維網(wǎng)格結(jié)構(gòu),成為生物質(zhì)抗降解的主要屏障,結(jié)構(gòu)性成分的組成及變化特征成為生物質(zhì)降解利用過程中急需解決的重大基礎(chǔ)問題[7-13]。
生物材料中纖維素等成分含量的測定常采用造紙?jiān)戏治龇椒?如GB/T 2677 系列測定方法),得到的纖維素、半纖維素、木質(zhì)素含量總和常接近或大于100%,這與真實(shí)含量值之間存在較大偏差[10,14-15]。而采用范氏洗滌纖維分析法測定纖維素等結(jié)構(gòu)性成分,能有效去除復(fù)合組分的影響,較好地反映出同一樣品中纖維素、半纖維素和木質(zhì)素的含量,為研究纖維素等結(jié)構(gòu)性成分含量的變化趨勢提供很好的參考。本文采用范氏洗滌纖維法測定厚壁毛竹3 大成分含量,旨在探究厚壁毛竹中結(jié)構(gòu)性成分含量隨部位和生長時間的變化特征。
試驗(yàn)材料于2012 年6 月采自于江西農(nóng)業(yè)大學(xué)竹類種質(zhì)園,選取無明顯病蟲害、生長健壯的代表樣株。分竹葉、竹枝和竹稈基部、竹稈中部和竹稈梢部,分別采集生長時間為竹筍出土后的2、14、38、62 和86 個月的樣株(各3 株),分別按竹葉、竹枝、竹稈基部、竹稈中部和竹稈梢部5 個部位選取試驗(yàn)樣品。鮮樣迅速用冷凍干燥機(jī)干燥,粉碎后密封備用。
冷凍干燥機(jī)VDF-1000A(北京博醫(yī)康實(shí)驗(yàn)儀器有限公司),實(shí)驗(yàn)所用試劑均為分析純。
厚壁毛竹的竹葉、竹枝和竹稈試樣中纖維素、半纖維素和木質(zhì)素含量的測定和計(jì)算采用范氏洗滌纖維分析法測定,并參考GB/T 20805-2006《飼料中酸性洗滌木質(zhì)素(ADl)的測定》。纖維素均指酸性洗滌纖維素,木質(zhì)素均為酸不溶性木質(zhì)素,結(jié)構(gòu)性成分含量總和為纖維素、半纖維素和木質(zhì)素含量之和,以下同。
厚壁毛竹竹葉結(jié)構(gòu)性成分含量隨生長時間的變化趨勢見圖1。由圖1 可知,竹葉結(jié)構(gòu)性成分含量總和為(70.93±6.44)%,其中半纖維素的含量最高,為(38.02±5.76)%,纖維素含量次之,為(27.71±5.82)%,木質(zhì)素含量最低,僅(5.20±0.33)%。隨竹稈的生長,竹葉的結(jié)構(gòu)性成分含量呈現(xiàn)不同的變化趨勢。與第2、86 個月相比,竹葉結(jié)構(gòu)性成分含量總和在第14~62 個月期間略有下降。而纖維素含量在第2個月時較高,為(30.23±9.52)%,在第14~86 個月期間的纖維素含量則介于(26.04±1.44)%~(27.03±1.43)%,竹葉木質(zhì)素含量在整個生長時期內(nèi)的變化都不明顯,介于(4.42±0.49)%~(5.78±0.56)%。
厚壁毛竹竹枝的結(jié)構(gòu)性成分含量的變化見圖2。竹枝的結(jié)構(gòu)性成分含量總和平均為(85.38±2.37)%。由圖2 可知,各結(jié)構(gòu)性成分中,纖維素含量最高,達(dá)(43.06±3.30)%,半纖維素和木質(zhì)素含量依次降低,分別為(27.92±3.05)%、(14.40±3.00)%。竹枝中結(jié)構(gòu)性成分含量總和在第2~38 個月期間保持在較低水平(低于0.85 %),而第62、86 個月時有明顯的升高,分別為(88.53±1.60)%、(86.73±0.73)%。木質(zhì)素含量隨生長時間增加而明顯升高,如第2 個月時木質(zhì)素含量僅(11.41±2.53)%,到第86 個月時,木質(zhì)素含量增加到前者的1.5 倍,達(dá)(16.98±0.56)%。而纖維素、半纖維素的含量隨生長時間的變化不明顯。
圖1 竹葉結(jié)構(gòu)性成分的含量Fig.1 The contents of the structural compositions in leaf
圖2 竹枝結(jié)構(gòu)性成分的含量Fig.2 The contents of the structural compositions in branch
2.3.1 竹稈基部的結(jié)構(gòu)性成分特征 厚壁毛竹竹稈基部結(jié)構(gòu)性成分含量隨生長時間增長而相對穩(wěn)定(圖3)。由圖3 可知,不同生長時間,竹稈基部結(jié)構(gòu)性成分含量總和的平均值為(89.10±3.60)%,其中,第2 個月時為(87.18±5.53)%,隨后略有升高穩(wěn)定在(89.29±2.75)%~(90.11±1.52)%。竹稈基部的纖維素、半纖維素的平均含量分別為(49.05±2.44)%、(23.87±2.83)%,第2~62 個月期間二者變化較小,分別介于(49.14±1.50)%~(49.77±3.08)%、(22.87±2.53)%~(23.47±3.29)%。而木質(zhì)素平均含量為(16.18±3.83)%,在第14~86 個月期間介于(16.45±2.60)%~(18.56±3.34)%。
圖3 竹稈基部結(jié)構(gòu)性成分的含量Fig.3 The contents of structural compositions in basal portions of culm
2.3.2 竹稈中部的結(jié)構(gòu)性成分特征 厚壁毛竹竹稈中部的結(jié)構(gòu)性成分的含量存在顯著差異(圖4)。由圖4 可知,竹稈中部的結(jié)構(gòu)性成分總和的平均值為(89.21±2.85)%,且隨生長時間的變化相對較小[介于(88.46±3.87)%~(90.37±1.72)%]。纖維素含量達(dá)(49.43±3.39)%,明顯高于半纖維素和木質(zhì)素含量[二者分別為(23.34±3.91)%、(16.44±3.71)%]。竹稈中部的各結(jié)構(gòu)性成分中,纖維素含量隨生長時間的增加而有所降低[從第2 個月的(52.10±3.89)%降低至第86 個月的(47.32±2.63)%],而半纖維素、木質(zhì)素含量隨生長時間的變化均無明顯變化。
圖4 竹稈中部結(jié)構(gòu)性成分的含量Fig.4 The contents of structural compositions in middle portions of culm
2.3.3 竹稈梢部的結(jié)構(gòu)性成分特征 厚壁毛竹竹稈梢部的結(jié)構(gòu)性成分含量的特征見圖5。由圖5 可知,竹稈梢部的結(jié)構(gòu)性成分含量的總和為(88.12±4.24)%,在第2 個月時僅(84.54±6.48)%,第14~86 個月期間則保持在較高水平[介于(88.75±1.53)%~(90.00±1.76)%]。竹稈梢部的纖維素、半纖維素和木質(zhì)素含量依次降低,分別為(47.32±4.33)%、(25.76±4.59)%、(15.04±4.41)%,但3 者隨生長時間變化的趨勢存在明顯差異。第2 個月時,纖維素、木質(zhì)素含量分別為(46.86±6.93)%、(11.66±5.19)%,在第14 個月時,二者含量分別升高到(48.19±2.12)%、(16.97±3.31)%,隨后均又逐漸降低。但半纖維素含量的變化趨勢則與之相反,第2、14 個月時分別為(26.02±4.98)%、(23.59±2.54)%,隨后則逐漸升高。
圖5 竹稈梢部結(jié)構(gòu)性成分的含量Fig.5 The contents of structural compositions in upper portions of culm
統(tǒng)計(jì)分析的結(jié)果表明,部位因素和生長時間因素對結(jié)構(gòu)性成分含量的影響存在明顯差異(表1),不同部位間的纖維素、半纖維、木質(zhì)素含量及其總和的差異性均達(dá)到極顯著性水平(P<0.01)。除木質(zhì)素含量的差異達(dá)到顯著性水平(F=4.777,P=0.012),生長時間因素所引起的結(jié)構(gòu)性成分含量的差異均未達(dá)到統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)顯著性水平。
由于受來源和生長時間等材料異質(zhì)性因素的影響,大量有關(guān)生物質(zhì)材料的成分結(jié)構(gòu)及其綜合應(yīng)用研究常得到不同的研究結(jié)果,增加了研究生物質(zhì)材料的難度[7,9,11-13]。對厚壁毛竹不同器官(部位)和不同生長時間的纖維素、半纖維素、木質(zhì)素的含量及其總量的變化特征進(jìn)行研究,對生物質(zhì)能源和生物質(zhì)化學(xué)品等的高值化利用具有重要意義,但由于纖維素等結(jié)構(gòu)性成分為復(fù)雜的高分子化合物[11-12,20-22],它們的分子結(jié)構(gòu)特征有必要綜合含量與結(jié)構(gòu)這兩方面的異質(zhì)性特征進(jìn)行深入研究,以便更好地為厚壁毛竹生物質(zhì)材料的高值化利用提供理論基礎(chǔ)。
表1 結(jié)構(gòu)性成分的方差分析Tab.1 The ANOVA of structural compositions
厚壁毛竹竹葉中纖維素含量低于半纖維素含量(二者分別為27.71±5.82%、38.02±5.76%),而竹枝和竹稈中纖維素含量均高于半纖維素含量。纖維素、木質(zhì)素和結(jié)構(gòu)性成分含量總和均按竹葉、竹枝、竹梢、基部、中部的順序遞增,而半纖維素含量卻逐漸降低。不同部位間的纖維素、半纖維、木質(zhì)素含量及其總和的差異性均達(dá)到極顯著性水平(P<0.01),不同生長時間的結(jié)構(gòu)性成分含量的差異較小,僅木質(zhì)素含量的差異達(dá)到顯著性水平(F=4.777,P=0.012),與毛竹等竹類植物結(jié)構(gòu)性成分含量的分析結(jié)果相似。
[1]楊光耀,黎祖堯,杜天真,等.毛竹新栽培變種:厚皮毛竹[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1997,19(4):97-98.
[2]楊光耀,郭起榮,杜天真,等.厚皮毛竹竹材沖擊韌性研究[J].經(jīng)濟(jì)林研究,2000,18(1):38-39.
[3]郭起榮,楊光耀,陳伏生,等.厚皮毛竹纖維形態(tài)研究[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1999,21(2):223-225.
[4]莊若楠,金愛武.施肥對毛竹桿型特征的影響[J].中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報(bào),2013,33(1):80-84.
[5]張齊生.竹類資源加工的特點(diǎn)及其利用途徑的展望[J].中國林業(yè)產(chǎn)業(yè),2004(1):9-11.
[6]崔丹丹,蔣劍春,孫康,等.高比表面積竹質(zhì)活性炭的制備與性能研究[J].林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè),2010,30(5):57-60.
[7]Himel M E,Ding S Y,Johnson D K,et al.Biomass recalcitrance:engineering plants and enzymes for biofuels production[J].Science,2007,315:804-807.
[8]Koivula A,Rouhonen L,Wohlfahrt G,et al.The active site of cellobiohydrolase Cel6A from trichoderma reesei:The roles of aspartic acids D221 and D175[J].Journal of the American Chemical Society,2004,124:10015-10024.
[9]Wyman C E,Dale B E,Elander R T,et al.Coordinated development of leading biomass pretreatment technologies[J].Bioresource Technology,2005,96:1959
[10]許風(fēng),孫潤倉,詹懷宇.木質(zhì)纖維原料生物轉(zhuǎn)化燃料乙醇的研究進(jìn)展[J].纖維素科學(xué)與技術(shù),2004,12(1):45-54.
[11]Zaldivar J,Nielsen J,Olsson L.Fuel ethanol production from lignocellulose:a challenge for metabolic engineering and process integration[J].Applied Microbiology and Biotechnology,2001,56(1/2):17-34.
[12]Carlos D,Maria T B,George J M,et al.Evolution of cellulose crystals during prehydrolysis and soda delignification of sugarcane lignocelluloses[J].Cellulose,2011,18(6):1509-1519.
[13]Zhu Z G,Noppadon S,Todd V,et al.Comparative study of corn stover pretreated by dilute acid and cellulose solvent-based lignocellulose fractionation:Enzymatic hydrolysis,supramolecular structure,and substrate accessibility[J].Biotechnology and Bioengineering,2011,103(4):715-724.
[14]熊素敏,左秀鳳,朱永義.稻殼中纖維素,半纖維素和木質(zhì)素的測定[J].糧食與飼料工業(yè),2005(8):40-41.
[15]李華,孔新剛,王俊.秸稈飼料中纖維素、半纖維素和木質(zhì)素的定量分析研究[J].新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2007(3):65-68.
[16]張齊生,關(guān)明杰,紀(jì)文蘭.毛竹材質(zhì)生成過程中化學(xué)成分的變化[J].南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2002,26(2):7-10.
[17]周純芳.竹林培育與利用[M].南京:南京林業(yè)大學(xué)出版社,1998:1-84.
[18]鄭蓉.不同海拔毛竹竹材化學(xué)組成成份分析[J].浙江林業(yè)科技,2001,21(1):17-20.
[19]魯順保,丁貴杰,彭九生.立地條件對毛竹材化學(xué)性質(zhì)的影響[J].中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報(bào),2008,28(1):79-83.
[20]Drew B,MacCallum J L,Tieleman D P.Thermodynamic analysis of the effect of Cholesterol on dipalmitoylphosphatidylcholine lipid membranes[J].Journal of the American Chemical Society,2009,131(5):1972-1978.
[21]Sun Y,Cheng J Y.Hydrolysis of lignocellulosicmaterials for ethanol production:a review[J].Bioresource Technology,2002,83(1):1-11.
[22]黎祖堯,李曉霞.厚竹種質(zhì)性狀與生理活性研究綜述[J].經(jīng)濟(jì)林研究,2013,31(2):167-170.